陈万义
- 作品数：43 被引量：134H指数：8
- 供职机构：光明乳业股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学石油与天然气工程更多>>
- 添有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法
- 本发明涉及的是一种食品安全技术领域的添有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法。本发明包括(1)人工构建合成扩增内标序列，并设计特异引物；(2)使PCR反应体系处于最优的反应条件；(3)PCR扩增；(4)提取不同血清型的副溶...
- 史贤明龙飞施春雷陈万义张忠明
- 文献传递
- 添加有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法被引量：20
- 2010年
- 【目的】发掘副溶血弧菌特异性更强的检测靶点,并人工构建扩增内标,建立可以有效避免假阴性的新PCR检测体系。【方法】利用生物信息学方法,从副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)基因组DNA中发掘特异性很高的序列,并设计相应的特异性引物,人工构建扩增内标,建立PCR检测体系。【结果】本研究发掘得到的序列vp1332特异性很强,经检索,该序列是编码ABC转运子接合蛋白组分的基因片段,根据此序列设计一对特异检测引物(vp1332L/vp1332R),同时,构建了扩增内标,并建立了PCR检测体系。利用该体系对296株副溶血弧菌和33株非副溶血弧菌进行检测,结果显示,所有以副溶血弧菌为模板的PCR反应均可扩增到一条343bp的特异片段,而模板来源于非副溶血弧菌的则只能扩增到一条499bp的扩增内标片段。灵敏度实验表明,该PCR反应体系的检测灵敏度为1.6×102cfu/mL。人工污染实验表明,起始染菌量为1.24cfu/25g样品时经8h增菌,即可检测到副溶血弧菌。实际样品检测结果也证实该方法的有效性。【结论】本研究建立的PCR反应体系能特异地检测副溶血弧菌,并可有效地排除假阴性,提高检测准确率。
- 何晓华余水静陈万义施春雷孟江洪史贤明
- 关键词：副溶血弧菌PCR检测扩增内标假阴性
- 生鲜蔬菜中阪崎克罗诺杆菌的分离与鉴定被引量：11
- 2014年
- 从上海市售蔬菜中共采集样品102份,按照国标方法GB 4789.40—2010进行阪崎克罗诺杆菌的分离与鉴定。采用生化实验、PCR检测方法、BAX System Q7全自动病原微生物检测仪、API 20E试剂条鉴定和16S rDNA序列的测定对分离到的可疑菌株进行鉴定与确证。根据国标法的鉴定结果,102份样品中共有18份样品分离到可疑阪崎克罗诺杆菌菌株,进一步结合其他4种鉴定方法确定13份样品中分离到的可疑菌株为阪崎克罗诺杆菌菌株,分离率达13%(13/102)。通过研究说明生鲜蔬菜也是阪崎克罗诺杆菌比较常见的宿主或者污染源之一。
- 陈万义任婧吴正钧杭锋刘振民郭本恒
- 一株产胞外多糖的短乳杆菌及其应用
- 本发明公开了一株产胞外多糖的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)及其应用。本发明的短乳杆菌BDLB0001保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.5223。本发明的短乳...
- 艾连中郭本恒孙克杰陈卫张灏邵丽吴正钧陈万义穆海菠
- 一种检测干酪乳杆菌菌株的方法及其试剂盒和引物对
- 本发明公开了一种检测干酪乳杆菌菌株(Lactobacillus casei)的方法及其试剂盒和引物对。该引物对的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO.1所示和如序列表中SEQ ID NO.2所示。所述的方法包括以下...
- 陈万义任婧郭本恒刘振民
- 文献传递
- 阪崎克罗诺杆菌分离菌株的核糖体分型研究被引量：3
- 2016年
- 利用Riboprinter对分离到的15株阪崎克罗诺杆菌进行了鉴定及核糖体分型,并利用Bio Numeicrus软件对其结果进行分析,如果按照相似性大于80%计算,根据辛普森方程计算该分型方法的分辨率可达到0.808。结果表明,核糖体分型(ribotyping)是一种适用于阪崎克罗诺杆菌的快速分子分型方法,可将不通来源的阪崎克罗诺杆菌分离菌株区别开来,能够对由该菌引起的食品中毒事件能够进行快速的溯源。
- 陈万义游春苹吴正钧刘振民
- 关键词：分子分型
- 一种检测干酪乳杆菌菌株的方法及其试剂盒和引物对
- 本发明公开了一种检测干酪乳杆菌菌株(Lactobacillus casei)的方法及其试剂盒和引物对。该引物对的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO.1所示和如序列表中SEQ ID NO.2所示。所述的方法包括以下...
- 陈万义任婧郭本恒刘振民
- 利用肠杆菌基因间重复序列PCR(ERIC-PCR)方法对阪崎克罗诺杆菌进行分子分型被引量：1
- 2013年
- 阪崎肠杆菌在2008年被重新命名为克罗诺杆菌属的一个新种,是一种条件致病菌,可引起严重的新生儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和菌血症,严重的可能引起神经系统后遗症和死亡.目前,越来越多的报道证明婴儿配方粉是其主要的传染源和传播媒介.利用肠杆菌基因间重复序列PCR(ERIC-PCR)方法对43株克罗诺杆菌属菌株和5株肠杆菌属菌株进行分子分型,利用BioNumericus软件对其结果进行分析,如果按照相似性大于80%计算,根据辛普森方程计算该分型方法的分辨率可达到0.984.研究结果表明:ERIC-PCR是一种适用于阪崎克罗诺杆菌的快速分子分型方法,能够对由该菌引起的食品中毒事件进行快速的溯源.
- 陈万义艾连中任婧穆海波
- 关键词：分子分型
- 食品中荧光假单胞菌双重PCR法检测体系的建立和评价被引量：3
- 2016年
- 根据荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）促旋酶（gyrase）的B亚单位基因以及金属蛋白酶（apr）基因设计出两对引物，经过反应条件的优化，建立了用于荧光假单胞菌快速检测的双重聚合酶链式反应（PCR）方法，并对该体系进行评价。结果显示，Pseudomonas，zuorescens菌株经普通PCR扩增均可见2条特异性条带（384bp和194bp），而其它阴性对照菌株PCR扩增均为阴性。基于基因组DNA的双重PCR检测灵敏度为16．9fg／uL（3～4拷贝／uL），1．8CFU／mL的uHT牛奶样品（250mL）经增菌24h后用该双重PCR方法均可检出。本研究建立的双重PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏度，能克服乳制品样品基质的干扰，可应用于乳制品中荧光假单胞菌的快速检测。
- 高琳陈万义徐煜刘振民游春苹
- 关键词：荧光假单胞菌双重PCR食品检测
- 婴幼儿配方粉中克罗诺杆菌属菌株检测方法研究进展被引量：6
- 2015年
- 2008年,阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)被重新命名并被划分成一个新的属即克罗诺杆菌属(Cronobacter spp.),是人和动物肠道内寄生的一种革兰氏阴性无芽孢杆菌,也是一种重要的食源性条件致病菌。2012年,克罗诺杆菌属被进一步重新分类并包括7个种。该属菌株能引起严重的新生儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和菌血症,严重的可引起神经系统后遗症和死亡。目前,国内外的多篇报道证明婴儿配方粉是其主要的传染源和传播媒介。因此,准确和快速鉴定克罗诺杆菌属菌株是预防和控制该病原菌的重要举措。本综述简要介绍了截止目前克罗诺杆菌属菌株的主要检测方法,期望能为我国检测机构提供一定的借鉴和帮助。
- 陈万义任婧刘振民郭本恒
- 关键词：婴幼儿配方粉
