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CTGF shRNA表达质粒的构建及对大鼠肌源性干细胞CTGF表达的影响被引量：1: 2011年; 目的观察针对结缔组织生长因子（CTGF）所构建的短发卡RNA（shRNA）对转化生长因子岛（TGF-β1）诱导大鼠肌源性干细胞（MDSCs）表达CWF的影响。方法针对CTGF mRNA上的序列，体外合成表达shRNA的DNA质粒载体pC,enesil-3．shRNA并行测序鉴定；从新生SD大鼠骨骼肌中分离培养MDSCs并鉴定。实验分成对照组（MDSCs＋TCF-β培养），实验组（MDSCs＋TCF-β1＋pGenesil-3．shRNA培养）。观察shRNA质粒转染结果。利用Real-TimePER及WesternBlot检测CTGF mRNA和CI℃F蛋白表达。结果正确构建了靶向CrGF基因的质粒载体pGenesil-3．shCTGF；大鼠MDSCs48h、72h和96h时实验组的CIU_,FmRNA及蛋白质水平均低于对照组（P〈0．05）。结论针对CrGF构建的pCenesil-3．shCTGF能够转染MDSCs，并在48h、72h和96h时能明显降低TGF@1刺激MDSCs所产生CrGF的表达。; 莫路姣陈振兵翁雨雄陈燕花李涛孟繁斌陈亮; 关键词：基因干扰短发夹RNA 肌源性干细胞

Erk和p38信号转导通路对大鼠肌源性干细胞内结缔组织生长因子表达的调控作用被引量：6: 2010年; 目的探讨肌源性干细胞（muscle derived stem cells，MDSC）受转化生长因子田（transforming growth factor-β1，TGF-β1）刺激产生结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）的过程中，Erk信号转导通路和p38信号转导通路是否发挥作用。方法采用细胞差速贴壁法，从新生大鼠骨骼肌中分离提取肌源性干细胞，进行细胞表型鉴定后传代培养。实验设空白组、对照组和实验组共8组：空白组，添加液为基础培养基；对照组，基础培养基中加TGF-β1；PD98059实验组，分别用20、40、80μM的PD98059预处理；SB203580实验组，分别用0．2,0．5、1．0μM的SB203580预处理。用RealTime-PCR和Western Blot分别检测细胞中CTGFmRNA和蛋白质的水平。结果空白组、对照组和PID8059实验组间CrGFmRNA和蛋白质的相对表达量差异均有统计学意义（p〈0．05），对照组和SB203580实验组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论TGF—β1诱导MDSC产生CTGF的过程中，存在着Erk信号转导途径，不存在p38信号转导途径。; 陈亮陈振兵翁雨雄陈燕花李涛孟繁斌莫路姣刘娟; 关键词：干细胞结缔组织生长因子信号转导通路

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陈亮