陈静 作品数:26 被引量:73 H指数:5 供职机构: 遵义医学院 更多>> 发文基金: 博士科研启动基金 贵州省科学技术基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 文化科学 更多>>
白背飞虱海藻糖酶Treh-2基因克隆及生物信息学分析 被引量:4 2013年 利用同源克隆及RACE方法,从白背飞虱Sogatella furcifera中克隆获得海藻糖酶基因(Treh-2)全长cDNA序列(GenBank登录号:JX204291),该基因全长为2 065 bp,包含73 bp 3,UTR和150 bp5,UTR,开放阅读框(ORF)为1 842 bp,编码613个氨基酸。该基因预测蛋白分子质量为70.45 ku,等电点为5.65,有5个预测糖基化位点,有1个信号肽结构。进化分析结果显示,白背飞虱海藻糖酶Treh-2与其他昆虫海藻糖酶Treh-2同源性较高,与灰飞虱相比,同源性为95%,与褐飞虱相比较,同源性为93%。海藻糖酶Treh-2基因克隆和比较分析为进一步深入研究白背飞虱迁飞能力与能量代谢具有重要意义。 陈静 张建华 郭玉双 张道伟关键词:白背飞虱 克隆 德国小蠊Akirin基因的克隆及表达分析 2018年 Akirin基因是新近发现的在果蝇NF-κB依赖的Imd信号通路调控中不可或缺的转录因子。在除果蝇以外的昆虫中,Akirin基因是否参与Imd通路的调控,亦或对NF-κB依赖的Toll通路也有调控作用还未有报道。本研究旨在初步研究德国小蠊Blattella germanica中Akirin基因的基本特征、在不同组织中的表达模式及注射法RNAi实验对Akirin基因沉默效果,以期为Akirin基因功能的研究奠定基础。通过与已报道的其它昆虫的Akirin基因进行同源比对,利用RACE(rapid amplification of c DNA ends)技术,成功从德国小蠊中克隆到1个Akirin基因,该基因全长864 bp,开放阅读框(ORF)大小为543 bp,编码180个氨基酸。蛋白序列比对及进化树结果显示,Akirin基因有非常保守的核定位信号序列,且与内华达古白蚁Zootermopsis nevadensis的亲缘关系最近,同源性为86%。荧光定量PCR的结果表明Akirin基因在德国小蠊检测的4个组织中均有表达,但表达水平有差异,在血淋巴的表达水平最高,其次为脂肪体。通过注射法RNAi实验成功抑制了Akirin基因的表达水平,并且RNAi的效果随时间的延长而更强,在注射72 h后,Akirin基因m RNA的表达水平下降了90%。上述研究为Akirin基因的功能及德国小蠊防治研究提供了科学依据。 陈静 张道伟 吕燕丽关键词:德国小蠊 克隆 RNA干扰 烟草中一个LTR类反转录转座子基因的克隆与功能分析 被引量:2 2015年 [目的]分析烟草中LTR类反转录转座子对植物生长发育的影响。[方法]利用同源克隆及RACE的方法,从烟草栽培品种‘贵烟1号’c DNA中克隆得到了1个烟草反转录转座子的全长c DNA序列,命名为Ntrt1(Gen Bank登录号:KC899077)。利用实时定量RT-PCR研究了该基因在烟草不同组织中的表达水平;构建了基于双生病毒卫星诱导的Ntrt1的基因沉默载体,以中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)为辅助病毒在烟草中沉默了该基因,并调查了基因沉默后的表型。[结果]序列分析表明:该基因全长5 046 bp,编码3个ORF,分别为Gag/pol多聚蛋白、反转录转座子的中心蛋白以及一个整合酶。该基因能在烟草的根、茎、叶中表达,在叶片中的表达量最高。Ntrt1基因沉默烟草与对照相比,烟草植株明显变矮。[结论]Ntrt1在烟草的生长发育中具有重要作用。 郭玉双 陈静 刘筱嘉 余世洲 余婧 林世锋 邹颉 付强 张孝廉 赵杰宏 任学良关键词:反转录转座子 烟草植株 同源克隆 全长CDNA序列 实时定量RT-PCR 中国番茄黄化曲叶病毒 植物LTR类反转录转座子在植物基因组学研究中的应用 被引量:3 2011年 LTR类反转录转座子是植物基因组中的重要转座元件,对植物基因组的结构及功能有重要的影响。综述了近年来植物LTR类反转录转座子的类型和结构、在基因组中表达和调控,并探讨了它们在植物基因组学研究中的应用前景。 郭玉双 陈静 张建华 李祥羽 胡重怡 任学良关键词:植物基因组 基因组学 白背飞虱海藻糖合成酶基因的克隆及序列分析 被引量:9 2012年 为进一步深入研究白背飞虱的迁飞能力与能量代谢,利用同源克隆及RACE的方法,从白背飞虱Soga-tella furcifera中克隆获得海藻糖合成酶基因(TPS)的全长cDNA序列(Genbank登录号:JQ013797),该基因全长为3 278bp,包含353bp的3非编码区域(UTR)和501bp的5UTR,开放阅读框(ORF)为2 424bp,编码807个氨基酸。该基因预测的蛋白分子量为90.372kD,等电点为6.08,有3个预测的糖基化位点,无信号肽及跨膜结构。进化分析结果表明:白背飞虱的海藻糖合成酶与其它昆虫的海藻糖合成酶基因的同源性较高,与褐飞虱相比较同源性高达98%。 张道伟 陈静 郭玉双关键词:白背飞虱 海藻糖合成酶基因 克隆 白背飞虱几丁质合成酶1基因的结构及特性研究 被引量:5 2018年 几丁质合成酶1(CHS1)是昆虫几丁质合成的关键酶,在昆虫几丁质合成的组织中发挥着重要作用。为探索白背飞虱Sogota furcifera几丁质合成酶1(Sf CHS1)的基因结构特征及其功能,利用转录组测序结合PCR扩增技术,研究了Sf CHS1基因的结构特性,采用定量PCR技术研究Sf CHS1基因的时空表达特性,最后利用显微注射RNAi方法研究Sf CHS1基因的RNAi效果。通过转录组测序获得的Sf CHS1基因开放阅读框为4 719 bp,编码1572个氨基酸,预测蛋白分子量为180.6 k D,预测有6个糖基化位点和16个跨膜螺旋。PCR扩增及测序结果表明Sf CHS1基因存在两个可变剪切,产生两个转录本(CHS1a和CHS1b)。通过系统进化树分析,Sf CHS1和灰飞虱Laodelphgax striatellus及褐飞虱Nilaparvata lugens的CHS1同源性最高,为97%。时间表达特异性分析结果表明,Sf CHS1基因在4龄期第1天,5龄期第1天,成虫第1天即几丁质合成时的表达量最高。组织特异性检测结果表明,Sf CHS1基因主要在白背飞虱的表皮中表达,其次为气管,在肠中也有少量表达。显微注射RNAi的结果表明该方法能显著降低Sf CHS1基因的转录水平,并导致白背飞虱的死亡。研究结果说明,Sf CHS1基因具有两个可变外显子结构,Sf CHS1基因在几丁质合成阶段及几丁质含量高的组织表达量较高,沉默Sf CHS1基因的表达会对白背飞虱产生致死的表型,出现较高的死亡率。 陈静 张道伟 钱正敏关键词:白背飞虱 RNA干扰 一种适用于白背飞虱饲喂法RNA干扰实验的喂养装置 本申请公开了适用于白背飞虱饲喂法RNA干扰实验的喂养装置,包括双通且中空的透明管、封口盖、遮光筒和托架,所述托架位于透明管的下部用于托起透明管,所述遮光筒覆盖在透明管外表面的中部上,所述封口盖扣合在透明管的两端,所述封口... 陈静 张道伟文献传递 白背飞虱HSP90全长cDNA的克隆与特性分析 被引量:4 2012年 利用同源克隆及RACE的方法,从白背飞虱Sogatella furcifera中克隆获得热激蛋白HSP90基因的全长cDNA序列(Genbank登录号:JQ743628),该基因全长为2 707bp,包含421bp的3′非编码区域(UTR)和93bp的5′UTR,开放阅读框(ORF)为2 193bp,编码730个氨基酸。该基因预测的蛋白分子量为83.85kD,等电点为4.94,无信号肽、糖基化位点及跨膜结构。在N端具有HSP90基因保守的ATPase结构,含有HSP90家族的C末端的保守序列MEEVD。从进化分析结果看出,白背飞虱的HSP90与其它昆虫的HSP90蛋白的同源性较高,与褐飞虱相比较,同源性高达98%。HSP90基因的克隆和比较分析为进一步深入研究白背飞虱的抗逆机理、耐受性及进化具有重要意义。 张道伟 陈静 郭玉双关键词:白背飞虱 HSP90基因 克隆 特性分析 研究生医学分子生物学教学改革与思考 被引量:4 2013年 《医学分子生物学》是医学院校研究生课程教学中的一门重要基础课程,为适应高校教学改革的需要,本文对我校研究生的医学分子生物学课程教学中存在的问题进行剖析,从教学内容和方法上进行了有益的探索与实践,以期能更加完善医学研究生分子生物学课程的教学。 杨加伟 陈静 陆红玲 冯赞杰 刘喜平 欧刚卫关键词:医学分子生物学 教学改革 微小RNA-7在脑部的表达调控机制和对生理功能的影响 被引量:2 2019年 微小RNA-7(microRNA-7, miR-7)作为微小RNA家族成员之一,在机体脑部组织中高表达。研究发现,miR-7与机体脑部组织的发育、功能维持和病理进程密切相关,提示其可能是一个对脑部生理、病理发生过程具有重要作用的新调节分子。该文综述了近年来关于miR-7在脑部生理发育和功能中的研究进展,以期为阐明以miR-7为代表的微小RNA分子在脑部发育和生理功能发展过程中的作用机制,以及为脑部相关临床疾病的诊断、治疗新策略的开发提供帮助。 赵娟娟 岳东旭 岳东旭 陈静 郭萌萌 徐林关键词:生理功能