马艳娇
- 作品数：19 被引量：58H指数：3
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划黑龙江省农垦总局科技攻关项目黑龙江省研究生创新科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 猪肺炎支原体环介导等温扩增检测方法的建立被引量：8
- 2011年
- 目的建立检测猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal am-plification,LAMP)方法。方法根据GenBank中登录的猪肺炎支原体的核苷酸序列,设计4条特异性引物,用外引物进行PCR反应,对内外引物浓度、dNTP+和MgSO4浓度及Bst DNA聚合酶用量等进行优化,建立猪肺炎支原体LAMP检测方法,并对该方法进行特异性和敏感性验证。结果内外引物浓度分别为0.5和0.20 pmol/μl,dNTP+浓度为0.5 mmol/L,MgSO4浓度为3.75 mmol/L,Bst DNA聚合酶用量为8.0和9.6 U时,LAMP反应效果较好;应用该方法检测多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎双球菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌和链球菌均呈阴性;当猪肺炎支原体的拷贝数低于3时,检测不到该病原体。结论已建立了猪肺炎支原体LAMP检测方法,该方法特异性较好,敏感性较高。
- 李鹏马艳娇于剑薛晓萌刘丛夏伟
- 关键词：环介导等温扩增
- 人乳腺癌细胞、结肠癌细胞和宫颈癌细胞生长曲线测定被引量：1
- 2011年
- 为检测比较人乳腺细胞(MDA-MB-231、MCF-7、HBL-100)、人结肠癌细胞(HCT-8)和人宫颈癌细胞(HeLa)生长曲线的差异性。本实验首先常规培养MDA-MB-231、MCF-7、HBL-100、HCT-8和HeLa细胞,然后应用MTT方法测定这几种细胞的生长曲线。在本实验条件下,这几种细胞生长速度从高到低依次为HeLa、MCF-7、HCT-8、MDA-MB-231、HBL-100细胞,并且细胞生长速度一直升高。HeLa、MCF-7、HCT-8、MDA-MB-231和HBL-100都是癌症细胞,但是其生长速度却不相同,不同癌症的发生和发展都存在着一定的差异性,而同为乳腺癌的细胞的生长速度也不相同,这可能是与这些细胞在乳腺癌中来源有一定的关系。
- 李鹏马艳娇宫鹏涛李建华欧阳红生张西臣
- 关键词：人乳腺癌细胞结肠癌细胞宫颈癌细胞
- Kozak序列对TIMP1基因在人乳腺癌细胞MCF-7中表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨Kozak序列对基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因在人乳腺癌细胞MCF-7中表达的影响。方法构建pcDNA3.1-TIMP1和pcDNA3.1-TIMP1-K(含有Kozak序列)重组真核表达质粒,用FugeneHD转染试剂将重组表达质粒转染MCF-7细胞,采用荧光定量PCR和Western blot检测pcDNA3.1-TIMP1和pcDNA3.1-TIMP1-K在MCF-7细胞中表达的差异。结果重组真核表达质粒经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确。质粒pcDNA3.1-TIMP1-K转染细胞比空白对照细胞TIMP1基因mRNA表达量高约0.95倍,蛋白表达量高0.43倍;而质粒pcDNA3.1-TIMP1转染细胞比空白对照细胞mRNA表达量高0.37倍,蛋白表达量高0.25倍。结论质粒pcDNA3.1-TIMP1-K与pcDNA3.1-TIMP1在MCF-7细胞中mRNA和蛋白表达水平均存在差异,Kozak序列提高了TIMP1基因的表达。
- 马艳娇李鹏周海峰阮楠宫鹏涛李建华欧阳红生张西臣
- 关键词：KOZAK序列基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶抑制剂1MCF-7细胞
- 16S rRNA、23S rRNA及16S～23S rRNA基因在细菌分离与鉴定中的应用被引量：31
- 2008年
- 在细菌的进化过程中,rRNA结构既具保守性又具高变性。保守性反映生物物种的亲缘关系,高变性则揭示生物物种的特征核酸序列,rRNA是属种鉴定的分子基础。因此,可以利用保守区设计通用引物扩增细菌的相应靶序列,再利用可变区的差异鉴别菌种。文章就16S rRNA、23S rRNA和16S～23S rRNA基因在细菌分离与鉴定中的应用做以下综述。
- 李鹏马艳娇赵云
- 关键词：RRNA基因RRNA基因RRNA基因细菌
- TIMP1基因对人结肠癌HCT-8细胞增殖影响的研究
- 2012年
- 目的采用体外试验探讨基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因对人结肠癌(HCT-8)细胞增殖的影响。方法构建TIMP1基因的真核表达载体和RNA干扰质粒(pcDNA3.1-TIMP1-K、TIMP1 RNAi、pcDNA3.1和空白对照),将TIMP1基因真核表达质粒和RNA干扰质粒分别瞬时转染入HCT-8细胞48～72 h后,采用Real Time PCR方法检测TIMP1基因在HCT-8细胞中基因转录表达水平,并用Western blot方法检测TIMP1基因在HCT-8细胞中蛋白表达水平,采用MTT试验检测TIMP1基因过表达和干扰后对HCT-8细胞增殖的影响。结果成功构建了TIMP1真核表达质粒和RNA干扰质粒。与空白对照比较,质粒pcDNA3.1-TIMP1-K在HCT-8细胞中mRNA和蛋白的相对表达含量较高,质粒TIMP1 RNAi的mRNA和蛋白表达含量较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。构建过表达质粒(pcDNA3.1-TIMP1-K)转染HCT-8细胞后,与空白对照相比,第1～4天HCT-8细胞的活性无显著变化(P>0.05),第5～7天TIMP1基因过表达能够促进HCT-8细胞的增殖活性(P<0.05);构建干扰质粒(TIMP1 RNAi)转染HCT-8细胞后,与空白对照相比,第1～4天HCT-8细胞生长无显著变化(P>0.05),第5～7天TIMP1基因过表达能够抑制HCT-8细胞增殖(P<0.05)。结论 TIMP1基因过表达后能够促进人结肠癌细胞的增殖,在一定条件下还能够抑制人结肠癌细胞的增殖。
- 马艳娇李鹏宫鹏涛杨举李赫李建华欧阳红生张西臣
- 关键词：基质金属蛋白酶抑制剂1人结肠癌细胞增殖
- 细胞培养箱专用自动补水控制系统
- 本实用新型涉及的是一种细胞培养箱专用自动补水控制系统，它包括置于细胞培养箱内部的水盘，还包括重力传感器、电磁阀、进水管以及由中央处理器、A/D转换器、D/A转换器组成的中央处理单元，重力传感器安装在水盘正下方，并与A/D...
- 李鹏马艳娇陈红
- 文献传递
- CCNL1真核表达载体的构建及其在MDA-MB-231细胞中表达的鉴定
- 2011年
- 目的:构建pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAXⅠ-CCNL1和pEGFP-C1-CCNL1三组重组载体,鉴定其在MDA-MB-231细胞中的表达情况。方法:用PCR方法扩增得到CCNL-1基因,然后用EcoRⅠ、HindⅢ酶切CCNL1基因,将其分别与pcDNA3.1(+)、pVAXⅠ和pEGFP-C1载体连接,构建pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAXⅠ-CCNL1和pEGFP-C1-CCNL1三组重组载体,然后用Fugene HD转染试剂将构建的真核表达质粒转染入MDA-MB-231细胞,48h后,用荧光定量PCR和Western blotting方法检测CCNL1在MDA-MB-231细胞中的差异表达。结果:转染MDA-MB-231细胞48h后,在荧光显微镜下,pEGFP-C1-CCNL1重组载体能观测到绿色荧光,而pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAXⅠ-CCNL1重组载体未观测到;在MDA-MB-231细胞中CCNL1的mRNA和蛋白质表达水平由高到低依次为pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAXⅠ-CCNL1和pEGFP-C1-CCNL1。结论:成功构建pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAXI-CCNL1和pEGFP-C1-CCN1三组重组载体,且pcDNA3.1(+)-CCNL1在MDA-MB-231细胞中高表达。
- 李鹏马艳娇徐晓芳袁婷宫鹏涛李建华李赫欧阳红生张西臣
- 关键词：真核表达载体
- TIMP1基因重组真核表达质粒的构建及其在MCF-7细胞中的表达
- 2011年
- 目的构建3种TIMP1基因重组真核表达质粒,并在人乳腺癌MCF-7细胞中表达。方法将TIMP1基因分别插入3种真核表达载体pcDNA3.1(+)、pVAXⅠ和pEGFP-C1,构建3种重组表达质粒pcDNA3.1(+)-TIMP1、pVAXⅠ-TIMP1和pEGFP-C1-TIMP1,转染MCF-7细胞,采用Real-time PCR和Western blot法检测TIMP1基因在MCF-7细胞中的表达。结果 3种重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;重组表达质粒pEGFP-C1-TIMP1转染MCF-7细胞48 h后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,而pcDNA3.1(+)-TIMP1和pVAXⅠ-TIMP1转染的细胞则观察不到绿色荧光;在转染的MCF-7细胞中,TIMP1基因mRNA转录水平和蛋白表达水平从高到低依次为pcDNA3.1(+)-TIMP1、pVAXⅠ-TIMP1和pEGFP-C1-TIMP1。结论已成功构建了3种TIMP1基因重组真核表达质粒,其在MCF-7细胞中的表达量有差异。
- 李鹏马艳娇赵娜袁婷宫鹏涛李建华欧阳红生张西臣
- 关键词：基质金属蛋白酶抑制剂1真核细胞基因表达乳腺肿瘤
- 转基因动物的研究进展及其在畜牧业上的应用被引量：3
- 2010年
- 转基因动物技术始于20世纪80年代，近30多年来，随着研究的深入，转基因动物的研究工作取得了突破性的发展，并且是目前生物技术领域研究的热点之一，具有重大的科学意义和应用价值。这项技术是继连锁分析、体细胞遗传和基因克隆之后的第四项技术。转基因动物是通过向受精卵或早期胚胎中导入外源基因，有目的地对生物的遗传物质基础进行修饰、改造、培育新的品系。若外源基因与动物本身的基因（染色体）整合在一起，外源基因就能随生物的分裂而增殖，在体内得到表达，并能稳定地遗传给后代。目前，已经有转基因小鼠、兔、绵羊、山羊、猪、牛、鸡和鱼等多种转基因动物问世。
- 周丹安玲马艳娇李鹏
- 关键词：转基因动物技术畜牧业生物技术领域外源基因转基因小鼠
- 托瑞米芬的研究进展
- 2009年
- 托瑞米芬(toremifene)是新一代抗雌激素、抗肿瘤药物,其化学成分是三苯乙烯的衍生物,分子式为C26H28NOCl·C6H8O7,相对分子质量为598,将从托瑞米芬的化学合成、托瑞米芬的抗肿瘤作用机制、托瑞米芬的实验研究、托端米芬的药物动力学、临床研究及不良反应等方面进行阐述。
- 李鹏马艳娇曹剑郜冬雪
- 关键词：托瑞米芬抗雌激素抗肿瘤
