高川
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 供体细胞来源和TSA处理对牦牛iSCNT胚胎重编程的影响被引量：5
- 2012年
- 【目的】探讨不同来源的供体细胞和TSA处理对牦牛异种体细胞核移植(Interspecies nuclear trans-fer,iSCNT)胚胎的影响。【方法】以黄牛卵母细胞为受体,分别以牦牛50日龄胎儿及6和18月龄个体成纤维细胞为供体,构建牦牛iSCNT胚胎,研究供体细胞来源对牦牛iSCNT胚胎的影响。分别用0(对照),20,40,60和80nmol/L的TSA处理50日龄胎儿成纤维细胞12h,构建iSCNT胚胎,比较其发育情况,确定TSA的最佳处理浓度;用最佳浓度的TSA处理50日龄胎儿成纤维细胞0(对照),6,12和18h,构建iSCNT胚胎,比较其发育情况,确定TSA的最佳处理时间。用最佳TSA作用时间和浓度处理供体细胞,构建牦牛iSCNT,之后用40和80nmol/L的TSA分别处理iSCNT胚胎6和12h,比较不同处理方式对牦牛iSCNT胚胎发育的影响。采用qRT-PCR方法检测40nmol/L TSA处理供体细胞6h的iSCNT胚胎及40nmol/L TSA处理供体细胞6h且处理iSCNT胚胎12h的iSCNT胚胎去乙酰化酶2(HDAC2)基因mRNA的表达水平,以不进行TSA处理的iSCNT胚胎为对照。【结果】以50日龄胎儿成纤维细胞作为供体细胞,牦牛iSCNT胚胎的囊胚率最高,但与其他组差异不显著(P>0.05)。40nmol/L TSA处理供体细胞6h能显著提高牦牛iSCNT胚胎的囊胚率(30.6%),且与对照组差异显著(P<0.05)。用40nmol/L TSA处理牦牛iSCNT胚胎12h组的囊胚率高于80nmol/L TSA处理iSCNT胚胎6h组,2组间差异不显著(P>0.05)。用TSA处理供体细胞和iSCNT胚胎之后,HDAC2mRNA表达水平降低,且与对照组差异显著(P<0.05)。【结论】不同来源的供体细胞对iSCNT胚胎发育的影响不明显;40nmol/L TSA处理供体细胞6h和iSCNT胚胎12h能显著提高牦牛iSCNT胚胎体外发育及重编程能力。
- 熊显荣高川符梅李键字向东钟金城
- 关键词：牦牛异种核移植
- 麦洼牦牛乳腺上皮细胞系的建立及其生物学特性被引量：2
- 2012年
- 为建立麦洼牦牛乳腺上皮细胞的体外培养方法,采用组织块贴壁法及Ⅰ型胶原酶消化法,从麦洼牦牛乳腺组织中成功分离并获得纯化的乳腺上皮细胞,并利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行鉴定。通过细胞生长曲线、群体倍增时间、细胞接种存活率、细胞活力等生物学特性的检测,建立并鉴定麦洼牦牛乳腺上皮细胞系。结果显示,乳腺细胞形态良好,细胞接种存活率达91%,群体倍增时间26.97h,细胞生长曲线呈典型"S"型,细胞传至25代以上仍保持旺盛的增殖活力。可见,通过对细胞传代及反复冻存和复苏已成功建立麦洼牦牛乳腺上皮细胞系,获得大量的乳腺上皮细胞,使麦洼牦牛物种在细胞水平上得以保存,为建立牦牛乳腺生物反应器及泌乳调控机制研究提供基础。
- 符梅熊显荣高川李宇王树茂李键
- 关键词：麦洼牦牛乳腺上皮细胞生物学特性
- 麦洼牦牛乳腺上皮细胞系的建立及其生物学特性
- 2013年
- 为建立麦洼牦牛乳腺上皮细胞的体外培养方法，采用组织块贴壁法及Ⅰ型胶原酶消化法，从麦洼牦牛乳腺组织中成功分离并获得纯化的乳腺上皮细胞，并利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行鉴定。
- 符梅熊显荣高川
- 关键词：麦洼牦牛生物学特性牦牛乳体外培养方法胶原酶消化法免疫荧光染色
- Scriptaid对核重编程及牦牛异种克隆胚体外发育的影响
- 体细胞核移植技术是动物胚胎工程中一项重要的技术手段。随着核移植技术的不断发展，异种核移植成为近年来的研究热点之一。但无论同种核移植还是异种核移植，目前效率仍很低。研究表明，供体细胞的不完全重编程或重编程错误，导致胚胎发育...
- 高川
- 关键词：重编程组蛋白乙酰化异种体细胞核移植
- 文献传递
