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高旭: 作品数：77 被引量：119H指数：6; 供职机构：延边大学农学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金吉林省牧业管理局资助项目更多>>; 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>

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延边白鹅IFNα、IL-2和IL-17基因的克隆与序列分析: <正>引言为克隆延边白鹅IFNα、IL-2和IL-17基因。本课题组根据GenBank已发表的相关基因[1-3],经序列比对确定基因保守区,利用Oligo 6.0软件在保守区内设计三对特异性引物。同时,无菌采取雏鹅脾脏、...; 张紫璇高旭李卓昕王美琪刘晋宇肖伯驹; 文献传递

犬瘟热病毒检测方法的研究进展被引量：2: 2016年; 犬瘟热病毒是犬瘟热的病原体,属副粘病毒科、麻疹病毒属成员,是危害犬类健康最严重的病原之一,给养犬业带来巨大的经济损失,而采取早期诊断和对症治疗是预防犬瘟热的有效措施。本文对近些年国内外有关犬瘟热病毒检测技术的新进展予以了综述,期待为诊断、预防和控制犬瘟热的流行和蔓延提供参考。; 宋爽高旭王艳秋金丽兰陶志; 关键词：犬瘟热病毒免疫学分子生物学

地方综合性民族大学下涉农专业分子生物学课程的建设与思考: 2019年; 为了建设好地方综合性民族大学下涉农专业的分子生物学课程,文章在总结本单位分子生物学课程建设现状基础上,对存在的不足与问题进行了认真梳理和剖析,结合具体实际和发展瓶颈,提出了一系列具有针对性的整改措施,以期为国内相关民族院校分子生物学教学提供有益借鉴和参考。; 高旭姜成哲李海峰贾立军姜君; 关键词：分子生物学教学改革教学效果

猪附红细胞体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：6: 2013年; 为建立一种能定性与定量检测猪附红细胞体的方法,根据GenBank中猪附红细胞体的16SrRNA基因高度保守区设计了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了一种快速检测猪附红细胞体核酸载量的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该检测方法在107～101 copies/μL具有良好的线性关系(RSq=0.999)。能检测到模板的下限为30copies,灵敏度是普通PCR检测方法的100倍。该检测方法与其他猪常见病病原体无交叉反应,具有良好的重复性。对临诊疑似猪附红细胞体感染猪血液进行了检测,其检出率比常规PCR方法高10%。表明该方法可用于临床上猪附红细胞体的检测及定量分析。; 高旭张守发许应天贾立军于龙政薛书江; 关键词：猪附红细胞体实时荧光定量PCR

猪δ冠状病毒RBD蛋白多肽抗体的制备与鉴定: 2023年; 【目的】设计合成猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)受体结合结构域(receptor binding domain,RBD)的抗原表位,制备并鉴定多克隆抗体。【方法】为了特异性检测PDCoV RBD抗原,应用生物信息学技术预测其潜在抗原表位,将表位氨基酸序列与δ冠状病毒属中的其他15株病毒株以及14株其他猪冠状病毒株进行相似性比对,将筛选的优势抗原表位与载体蛋白血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,合成多肽并免疫小鼠,制备PDCoV RBD特异性抗体。通过Western blotting试验对不同系统表达的PDCoV RBD以及PDCoV、TGEV和PEDV感染ST细胞表达的S蛋白进行鉴定,通过间接ELISA方法测定抗体效价。【结果】经序列比对,利用生物信息学技术预测合成的表位抗原与δ冠状病毒属中的其他15株病毒株(0~14.28%)以及14株其他猪冠状病毒株(0~7.14%)序列相似性非常低,具有良好的保守性;Western blotting结果显示,制备的多肽抗体1∶500、1∶1000、1∶2000倍比稀释后均能特异性识别转染pcDNA3.1-PDR-Strep的Expi293F表达的PDCoV RBD蛋白、杆状病毒感染SF9细胞表达的PDCoV RBD蛋白,1∶1000稀释后能够检测到PDCoV感染ST细胞表达的PDCoV S蛋白,而在TGEV和PEDV感染的细胞中未检测到特异性蛋白的表达;ELISA检测抗血清中多肽特异性抗体的效价可以达到1∶12800。【结论】利用生物信息学技术成功预测PDCoV RBD蛋白抗原表位,免疫后获得的抗体具有较好的特异性。; 张国庆姜宇航张爽李乐天郝嘉翼陈竞邹万成李昌李太元高旭金宁一; 关键词：抗原表位多肽抗体

猪圆环病毒3型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及应用被引量：13: 2018年; 目的建立针对PCV3的操作简单、重复性好、灵敏度较高的检测方法。方法利用PCR方法扩增PCV3保守区基因片段(312bp),将其克隆到pMD18-T载体,构建重组质粒pMD18-T-PCV3作为阳性标准品质粒。优化反应条件,建立定量检测PCV3的实时荧光定量PCR方法,并进行敏感性、特异性和重复性验证。结果建立的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法的Ct值与标准品模板在4.24×10~1~4.24×10~8拷贝/μl范围内呈良好线性关系,其相关系数为0.996,斜率为-4.384。该方法特异性强,与PRRSV、FMDV、JEV、PCV2及PRV均无交叉反应;敏感性为4.24×10~1拷贝/μl,比常规PCR方法高10倍;组间和组内重复试验的变异系数均小于2%。利用实时荧光定量PCR方法对采集的155份猪肺组织进行检测,阳性率为36.13%,高于普通PCR阳性检出率的32.25%。结论建立的PCV3SYBR GreenⅠReal-time PCR方法敏感、特异,可用于猪体PCV3感染的快速检测。; 李卓昕温树波孙文超赵冠宇庄忻雨解长占张赫肖朋朋韩继成高旭高旭金宁一; 关键词：SYBR

鹅细小病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：5: 2010年; 根据GenBank发表的鹅细小病毒(GPV)NS1基因序列设计合成了1对引物,以构建的含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测GPV核酸的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。检测结果表明,该方法线性关系良好,标准曲线的相关系数达到0.998;对初始模板的检出下限为30个拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍;与鸭瘟病毒、犬细小病毒、新城疫病毒和鹅副粘病毒均不发生交叉反应;组内与组间的变异系数均小于2%。用建立的Real-time PCR检测13例GPV感染阳性病例,GPV阳性检出率为100%。表明建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于GPV的病原检测及定量分析。; 高旭鲁承杜秋明Qiu-ming; 关键词：鹅细小病毒实时荧光定量 PCR检测方法 GPV 鹅副粘病毒阳性病例

间充质干细胞在畜牧业中应用研究进展: 2024年; 干细胞是一类拥有强大增殖再生潜能的多能细胞,能够调节体内各项机能且免疫原性较低,在畜牧领域中有着巨大的应用潜力。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多能细胞,拥有干细胞的所有共性,且具有来源广泛,易于分离、道德和法律约束性低等特点,从基础研究逐步推进到临床应用阶段。MSCs通过迁移和旁分泌机制在体内发挥调控作用,如抵抗病原入侵,稳定免疫反应,减少细胞应激、促进组织再生等。然而,不同组织来源的MSCs生物学特性存在差异,其表面标记物是鉴别的重要依据。现阶段,MSCs的相关研究从人和宠物领域逐渐向畜牧业拓展,在牛、马等大动物体内也展现出强大的应用潜力。凭借其抗炎修复能力,可有效保护动物机体,促进疾病预后,提升动物的经济价值。但由于相关研究还不够深入,许多问题未能得到解决,使得大规模应用受到限制。为进一步提高MSCs的应用潜力,加快由实验室向实际应用的转化,细胞培养、基因编辑以及生物材料等领域的研究也在不断拓展。为此,作者通过系统梳理相关文献,介绍了MSCs来源、特性及作用机制,总结了其在畜牧领域的研究进展和应用潜力,以期为MSCs在畜牧业中的应用提供新思路。; 季新澎金诗宇滕海龙周禹泽李香子高旭李强; 关键词：间充质干细胞免疫调节炎症

延边白鹅CD4与CD8基因SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立与应用: 2019年; 为建立延边白鹅CD4与CD8基因在细胞免疫中的动态变化的检测方法,本研究根据CD4与CD8基因保守区分别设计两对特异性引物,在克隆目的基因的基础上,进行TA克隆和转化,构建的阳性质粒作为标准品,经反应条件优化建立了检测延边白鹅CD4与CD8基因的荧光定量PCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,建立的SYBR Green I荧光定量PCR方法在质粒标准品稀释倍数为101~108倍(CD4:1.2×10^8拷贝/μL^1.2×10^1拷贝/μL;CD8:1.8×10^8拷贝/μL^1.8×10^1拷贝/μL)范围内具有良好的线性关系,相关系数均为0.999,与其它相关鹅细胞因子基因不发生交叉反应,敏感性均是普通PCR的100倍,组内和组间变异系数均小于2%。初步应用本研究建立的方法检测鹅脾脏淋巴细胞CD4与CD8基因的转录水平,结果显示ConA可诱导目的基因转录水平升高,且显著高于PBS对照组(p<0.05)。本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR方法为进一步研究鹅细胞免疫水平和CD4、CD8生物学活性奠定了基础。; 王美淇李远超李文佳陈姗孟媛刘晋宇高旭; 关键词：CD4 CD8

孔雀产酸克雷伯氏菌的分离与鉴定被引量：1: 2005年; 从病死的孔雀分离到一种革兰氏阴性的粗短杆菌。经细菌学、培养特性和血清学鉴定为产酸克雷伯氏菌。该菌在M．C．K和SS培养基上生长良好,能在pH6-11范围内生长,最适生长为pH 6- 8,在无盐至2％NaCl培养基上生长良好,6％NaCl抑制其生长;最适生长温度为37℃;可致死小白鼠。对卡那霉素庆大霉素等药物高敏,而对青霉素、四环素等药物具有耐药性。; 高旭梁晓峰王苗; 关键词：孔雀生化特性

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