高玉光 作品数:75 被引量:129 H指数:6 供职机构: 滨州医学院附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 山东省高等学校教学改革研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 建筑科学 化学工程 更多>>
活化型TAK1转基因小鼠的建立及TAK1对牙釉质发育影响的初步研究 被引量:1 2014年 目的:建立人活化型TAK1(caTAK1)转基因小鼠,初步研究TAK1对釉质发育的影响。方法:克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人TAK1的全长基因,并利用缺失突变原理扩增caTAK1基因;运用Gateway技术将caTAK1基因插入Amelx启动子下游构建转基因表达载体,并通过显微注射法建立caTAK1转基因小鼠;用PCR扩增对转基因小鼠的基因型进行鉴定,RT-PCR检测外源性TAK1基因在转基因小鼠颌骨中的表达,并运用X线片、体视显微镜及微型CT对转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度和病理性磨损程度进行观察。结果:成功构建了caTAK1转基因表达载体并制备转基因小鼠;转入的人caTAK1基因在小鼠颌骨组织中特异性表达;活化型TAK1转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度较野生型小鼠差,1月龄时,两种小鼠磨牙釉质表面的磨损程度无明显差别,而6月龄时,与野生型小鼠相比,活化型TAK1转基因小鼠磨牙釉质有严重磨损。结论:TAK1在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。 相黎黎 褚青 荣丽 韩晓谦 孙轶群 张莉 高玉光关键词:基因突变 转基因动物 釉质发育 c-Jun调控成釉细胞Amelotin基因表达的研究 被引量:1 2011年 目的:通过过表达及knockdown c-Jun基因,观察小鼠成釉细胞中釉成熟蛋白(amelotin)的表达变化,以初步确定c-Jun对amelotin的调控作用。方法:①应用免疫组化和细胞免疫荧光方法观察体内外成釉细胞中的c-Jun及amelotin的表达情况;②RT-PCR获得c-Jun基因,克隆至pcDNA3.1/myc-hisA,瞬时转染成釉细胞,real time RT-PCR观察其对amelotin表达的影响;③化学合成c-Jun siRNA,瞬时转染成釉细胞,re-al time RT-PCR观察其对amelotin表达的影响。结果:①体内外成釉细胞中c-Jun和amelotin均有表达,c-Jun主要在成釉细胞胞核中表达,amelotin在成釉细胞和釉质全层均有表达;②成功构建c-Jun真核重组表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-c-Jun,转染成釉细胞后amelotin mRNA表达水平显著上升;③成功沉默c-Jun,amelotin在转染c-Jun siRNA组表达水平显著下降。结论:在成釉细胞中,c-Jun在转录水平调控amelotin基因的表达。 孙岩 张娟娟 刘晓影 何永云 梁广智 李武修 高玉光关键词:原癌基因 小RNA干扰 釉成熟蛋白Amelotin抗体的制备和初步鉴定 被引量:7 2009年 目的:表达并纯化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin),制备多克隆抗体,并进行初步鉴定。方法:RT-PCR获得Amelo-tin成熟肽片段,构建pET32a-Amelotin,IPTG诱导表达Amelo-tin,纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体滴度。Western blot和免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果:成功构建了Amelotin重组表达载体pET32a-Amelotin,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可以达到1∶12800。Western blot分析表明该抗体能特异结合Amelotin,免疫组化分析表明自制的抗体能特异的与Amelotin相互作用。结论:以纯化的Amelo-tin为免疫原,成功地制备了效价及特异性较高的兔抗Amelo-tin抗体,为进一步建立简便的Amelotin检测方法及研究Amelotin生物学功能奠定了良好的基础。 孙岩 张娟娟 韩婷婷 李东亮 曹雪梅 李武修 高玉光关键词:原核表达 多克隆抗体 激活转录因子-2调控小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶-20分子机制的初步研究 2014年 目的:通过克隆激活转录因子-2(ATF-2)基因以及真核表达载体的构建,初步研究ATF-2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶-20(MMP-20)基因表达的影响。方法:根据引物设计原则设计ATF-2基因逆转录-聚合酶链反应(PCR)引物,从小鼠成釉细胞中提取总RNA逆转录所得c DNA为模板,进行PCR法扩增。得出含有HindⅢ和xhol酶切位点的ATF-2目的基因连接到pc DNA 3.1/myc-His A真核表达载体上;用重组质粒转染小鼠MMP-20基因,观察其对MMP-20基因转录活性的影响。结果:经过PCR引物扩增得到1 463 bp基因片段,将获得的重组质粒pc DNA 3.1/myc-His A-ATF-2双酶切分析鉴定,测序结果与Gen Bank登录基因序列完全一致;双荧光素酶结果显示ATF-2可以促进MMP-20启动子的表达(P<0.01),且在-825^+23(848 bp)启动子区段促进作用最明显。结论:成功实现了ATF-2基因克隆及真核表达载体的构建,并发现ATF-2对MMP-20启动子区域活性表达起正向调节作用。 王文江 冯琦 袁杰 高玉光关键词:基因克隆 小鼠 欠发达地区儿童乳牙龋病调查分析 2016年 目的:了解欠发达地区儿童乳牙龋病患病情况。方法:随机抽取滨州市六个县六个农村的2132名5岁常住儿童,采用第二次全国口腔健康流行病学调查标准调查龋病情况。结果:滨州市5岁儿童乳牙患龋率为75.80%,龋均为4.44,充填率仅为6.57%,仅占构成比的4.39%。结论:滨州市5岁儿童乳牙龋齿患病率高,充填率低,儿童龋病防治应注重两个方面:1加强对家长和教师的幼儿口腔卫生保健知识及方法的宣传。2采用简便可行的预防措施,定期群体进行预防工作,定期检查,早期诊断早期治疗。 王岩莉 高玉光关键词:龋齿 乳牙 牙科焦虑症患者心理干预的疗效分析 被引量:4 2009年 为了探讨心理诱导对牙科焦虑症(dental anxiety,DA)患者治疗的影响,采用焦虑自评量表及汉密顿焦虑量表对门诊就诊患者进行焦虑调查,筛选出伴焦虑者82例,随机分为两组,分别进行心理干预治疗和一般治疗,并对数据进行统计分析。结果显示,心理诱导指导组与对照组相比较焦虑水平明显降低,患者无论在完成第一次治疗还是复诊情况均优于对照组(P<0.01)。提示心理干预对DA患者治疗有显著效果。 胥欣 韩成冰 冀洪海 曹雪梅 高玉光关键词:心理干预 牙科焦虑症 牙科疾病 人牙成釉细胞相关蛋白启动子的克隆和转录活性分析 被引量:1 2010年 目的:构建人牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞、Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础。方法:以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力。结果:成功地获得了不同长度的ODAM基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-333~-195与-195~-96区域为特异的转录调控作用区。结论:初步确定了ODAM基因启动子的转录活性区,为进一步研究该基因转录调控特点奠定基础。 韩婷婷 刘晓影 郝建忠 高玉光关键词:启动子 成釉细胞 碧兰麻在牙科治疗中的应用与疗效 被引量:5 2008年 目的通过局部浸润注射碧兰麻来观察急性牙髓炎患者治疗时的麻醉疗效。方法将120例患者随机分为两组,运用不同的麻醉方法,实验组注射碧兰麻,对照组注射利多卡因。观察两组在牙髓治疗中的疗效。结果注射碧兰麻的实验组与注射利多卡因的对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组麻醉效果优于对照组。结论碧兰麻的麻醉效果越来越得到人们的认可和满意,可以取代利多卡因在牙科治疗中应用。 胥欣 冀洪海 杨勇 曹雪梅 高玉光关键词:碧兰麻 麻醉 牙科 疗效 口腔健康教育实验教学改革探索 被引量:8 2014年 目的提高学生口腔健康宣教能力,巩固学生口腔健康教育理论,增加学生学习的兴趣和主动性。方法选择潍坊医学院2006—2008级口腔医学专业大学四年级学生为研究对象进行口腔健康教育实验教学改革探索,将学生分为试验组和对照组,试验组采用"讲出去"的教学方式,对照组采用传统的教学方法,对试验组的课堂、课后评价以及两组的期终考试和实习考核评价结果进行分析和比较。结果试验组的课堂、课后评价结果表明,"讲出去"教学方式被学生普遍认可,能提高学生口腔健康宣教的能力;期终考试和实习考核成绩均显示试验组得分高于对照组(P<0.01)。结论 "讲出去"教学方式提高了学生口腔健康宣教的能力,符合教学改革发展趋势。 蒋英英 胡温庭 张娟娟 张娟娟 孙岩关键词:口腔健康教育 实验教学 教学改革 Smad3调控成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究 被引量:1 2015年 目的:研究Smad3对Amelotin启动子转录活性的影响。方法:用基因克隆技术获得含有不同长度Amelotin启动子片段的荧光素酶报告基因载体,然后将其与Smad3瞬时转染小鼠成釉细胞,并用双荧光素酶报告基因检测其活性;生物学信息软件对人和小鼠的Amelotin基因启动子序列的同源性进行BLAST分析;凝胶迁移实验(EMSA)观察Smad3和Amelotin启动子特异性结合位点之间的相互作用;基因定点突变构建Smad3结合位点突变型Amelotin启动子,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析Smad3对野生型和突变型Amelotin启动子转录活性的影响。结果:Smad3转染后,Amelotin启动子(-160^+196)转录活性明显增强(P<0.05);将人与小鼠的Amelotin启动子序列(-160^+196)进行Blast序列比对,发现两序列在(-160^-1)具有很大的同源性;EMSA结果显示,Smad3与Amelotin启动子(-160^+196)的GTCTG有相互作用;将Amelotin启动子上Smad3结合位点特征性序列"GTCTG"突变为"CCCTG"后,Smad3对突变型Amelotin基因启动子的转录活性无显著影响(P>0.05)。结论:转录因子Smad3可通过与Amelotin启动子特定序列结合而调控Amelotin的基因表达,从而在釉质发育过程中发挥重要作用。 许针针 张莉 王玉敏 李东亮 高艳 高玉光关键词:SMAD3 EMSA