齐奇
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:上海交通大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大鼠HO-1表达质粒构建、活力检测及抗HUVEC凋亡的作用研究被引量:1
- 2005年
- 异种移植排斥反应的主要特征为内皮细胞发生Ⅱ型激活,引起黏附分子、细胞因子和前促凝分子等基因高表达,造成血管收缩、白细胞黏附、激活、聚集和血栓形成,最终导致内皮细胞凋亡。保护基因HO-1通过抑制前炎症反应及免疫调抑作用以保护异种移植器官。因此,通过构建含剪切的野生型大鼠HO-1 cDNA的表达型质粒,用DOTAP包裹转入HUVEC中表达,测定表达量及表达产物活性;采用TNF-α诱导细胞凋亡,以及Heme和SnPP分别刺激细胞,诱导和抑制细胞内HO-1表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡率,明确HO-1的抗细胞凋亡作用。结果显示HO-1在HUVEC中高度表达,活力为对照组5倍;TNF-α诱导细胞凋亡,但Heme处理后细胞凋亡率下降至20%以下,而SnPP处理后细胞凋亡率显著上升,最高达到95%以上,并且HO-1基因表达抑制时细胞凋亡率是诱导时的5-20倍。本实验表明Heme处理后HO-1表达上调,具有显著抗细胞凋亡作用,细胞凋亡率与HO-1表达量呈负相关,提示HO-1通过抑制细胞凋亡,对细胞有保护作用。
- 夏振炜齐奇张雪洪申庆祥李云珠俞善昌
- 关键词:血红素加氧酶-1肿瘤坏死因子-Α血红素细胞凋亡抗细胞凋亡质粒构建
- HO-1保护人血管内皮细胞抗凋亡作用的研究
- 本实验的目的是研究HO-1在保护细胞凋亡中的作用,探讨其产生保护作用的机理。实验中将克隆了HO-1基因的质粒pcDNA3HO-1用DOTAP包裹转入人血管内皮细胞(HUVEC)中进行表达。质粒表达一段时间后采用TNF-α...
- 齐奇
- 关键词:血红素加氧酶-1血红素
- 血红素加氧酶-1抗人血管内皮细胞凋亡的实验研究被引量:2
- 2005年
- 目的 转染pcDNA3HO1入人血管内皮细胞(HUVEC)并表达,研究血红素加氧酶-1(HO-1)保护细胞凋亡的作用。方法 将构建好的质粒用DOTAP包裹转入细胞中表达:用CCLR破碎细胞后,SDS-PAGE鉴定表达量,采用TNF-α诱导细胞凋亡,以流式细胞仪测定细胞的凋亡率;采用Hemin和SnPP,分别刺激细胞,促进和抑制HO-l在细胞中的表达。结果 经Hemin处理后细胞的凋亡率均在20%以下,而SnPP处理后细胞的凋亡率大幅上升,最高可达到95%以上。实验数据显示HO-1基因表达被抑制时细胞凋亡率是诱导时的5~20倍。结论 细胞凋亡率与质粒转染效率和HO-l表达量均成反比,提示HO-l对细胞有保护作用,可以抑制细胞凋亡,存临床具有广泛的应用前景。
- 齐奇周文普张雪洪徐宇虹夏振炜
- 关键词:血红素加氧酶-1肿瘤坏死因子-Α血红素细胞凋亡