目的:探讨鹿茸多肽诱导心肌干细胞(CSCs)向心肌细胞分化的机制。方法:从SD大鼠体内分离CSCs,鉴定后培养传代至P3代后,分为空白对照组、5-氮胞苷诱导组(3μmol/L)、鹿茸多肽诱导组(800μg/ml)及其联合诱导组,除空白对照组细胞只加含3%胎牛血清的培养液外,其余各组细胞加入含相应诱导剂的培养液,培养14 d。采用免疫组化法检测细胞表面心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达,免疫印迹技术检测细胞cTnT、活化复制因子2(ATF-2)和肌细胞增强因子2C(MEF-2C)表达,实时定量聚合酶链式反应技术检测细胞cTnT和转录因子Nkx2.5、GATA4 m RNA表达。结果:成功制得CSCs,纯度>97%。与空白对照组(cTnT呈阴性)比较,各诱导组细胞cTnT呈阳性,cTnT、ATF-2、MEF-2C蛋白表达和cTnT、Nkx2.5、GATA4 m RNA表达均增强(P<0.05)。与5-氮胞苷诱导组比较,鹿茸多肽诱导组细胞cTnT、MEF-2C蛋白表达和cTnT、GATA4 m RNA表达均增强(P<0.05),联合诱导组细胞cTnT、ATF-2、MEF-2C蛋白表达和cTnT、GATA4 m RNA表达均增强(P<0.05)。结论:鹿茸多肽可能通过增强Nkx2.5、GATA4、ATF-2、MEF-2C等转录因子的表达来诱导CSCs向心肌细胞分化。
