刘春霞
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠隐睾模型制作方法的改进被引量：3
- 2006年
- 目的:简化隐睾模型的制作方法,提高隐睾模型的质量。方法:60只68周龄昆明白小鼠随机分为实验组、模型对照组、正常对照组,每组20只。实验组,速眠新麻醉,常规消毒阴囊,将睾丸挤入腹腔,于阴囊根部连续性缝合结扎阴囊。模型对照组用经典的方法,切开腹壁,将睾丸脂肪垫靠近附睾处固定在腹壁,关闭腹腔。3组均饲养75d后,切取睾丸进行形态学和组织化学比较。结果:实验组无死亡,切取睾丸时腹腔内未见粘连,模型对照组死亡率10%,腹腔内均见粘连。两组睾丸形态、大小相似,均较对照组小;形态学比较,实验组与模型对照组相似,管腔内未见成熟精子,与正常对照组比较,细胞形态改变相似;3β羟类固醇脱氢酶(3βHSD)染色显示实验组与模型对照组酶含量无显著性差异(P>0.05),较对照组低(P<0.01)。结论:这种新的方法操作简单,没有粘连,模型质量较经典的方法好。
- 刘春霞张茨王玲珑杨嗣星余小祥
- 关键词：隐睾小鼠
- 以α6-integrin和c-kit为特异性表面标志分离筛选小鼠精原干细胞的可行性被引量：1
- 2009年
- 背景:从目前文献报道来看,精原干细胞分离效率较高且较为公认的方法是通过隐睾模型结合表面标志进行多参数筛选。目的:探讨α6-integrin和c-kit作为分离筛选精原干细胞特异性表面标志的可行性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-05/12在武汉大学人民医院完成。材料:6周龄雄性昆明白小鼠40只,随机分为隐睾组、正常对照组,20只/组。方法:隐睾组小鼠建立隐睾模型,麻醉后腹部正中切口,将两侧睾丸拉入腹腔,将脂肪垫靠近附睾处各缝一针,分别固定在侧腹壁。正常对照组小鼠不进行任何干预。造模后两三个月,采用传统的两步消化法获取生精上皮单细胞悬液,加入FITC标记的抗α6-integrin抗体和PE标记的抗c-kit抗体,利用流式细胞仪进行α6-integrin+和c-kit-双重筛选,锥虫蓝染色监测细胞活性。主要观察指标:隐睾的形态学变化,精原干细胞分选结果。结果:隐睾小鼠的生精小管内细胞排列紊乱,层次及管腔消失,小管中央可见分裂相细胞,细胞数明显减少。与正常对照组比较,隐睾组sidescatterlow、Forwardscatterhi区的睾丸细胞增多,图形向左上移位。α6-integrin+和c-kit-细胞分布存在明显的相互偏离,即α6-integrin+细胞绝大多数不是精原干细胞,c-kit-细胞绝大多数也不是精原干细胞。从隐睾组筛选出具有sidescatterlow、α6-integrin+、c-kit-特征的细胞数占睾丸细胞总数的2.8%,此即为精原干细胞,锥虫蓝监测结果显示细胞活性达95%以上。结论:采用α6-integrin和c-kit这两种表面标志进行精原干细胞的筛选,尽管可以提高细胞悬液中的精原干细胞纯度,但均缺乏特异性。
- 杜贤进张茨刘春霞王玲珑余小祥
- 关键词：精原干细胞细胞分选
- GFRα1蛋白在小鼠隐睾精原细胞中的表达及意义
- 2006年
- 目的探讨胶质细胞源性神经营养因子受体α（GFRα1）蛋白在小鼠隐睾精原细胞中的表达及对精原干细胞增殖的调节作用。方法取成年小鼠40只制作单侧隐睾模型，饲养2～3个月后，切取睾丸行光镜和电镜观察，并用免疫组织化学方法检测睾丸细胞GFRα1的表达，与对侧睾丸做对照。结果隐睾模型GFRα1主要表达在位于基底膜的As型精原干细胞，在Apr型细胞和Aal型细胞未见表达，与对侧相比。GFRα1表达增多．P〈0．05。结论隐皋睾丸组织中Aal→A1分化受阻，已分化的精原细胞缺失，反馈性的GFRα1表达增多．可促进精原干细胞增殖。
- 刘春霞王玲珑张茨叶发根
- 关键词：隐睾精原细胞
- 小鼠精原干细胞分选被引量：4
- 2007年
- 目的：寻求富集小鼠精原干细胞的有效方法。方法：取6周龄雄性昆明白小鼠20只，手术制作成双侧隐睾模型，继续饲养2～3个月后，切取睾丸，用酶两步消化法制成单细胞悬液，加入FITC标记的抗α6-integrin抗体和PE标记的抗c—kit抗体冰浴20min后，利用流式细胞仅筛选出具有sidescatter^1o、α6-integrin^＋、c-kit^-特征的细胞，苔盼兰染色监测细胞活性。另取20只小鼠作为对照组，相同条件下饲养相同时间。结果：隐睾小鼠筛选出的精原干细胞占睾丸细胞总数的2．8％，95％以上的细胞具有活性。结论：利用免疫荧光激活细胞分选术能分离出大量有活性的精原干细胞。
- 刘春霞张茨王玲珑余小祥
- 关键词：精原干细胞小鼠
- 采用流式细胞术分离精原干细胞的实验研究
- 目的：利用文献报道的α6整合素和 c-kit 等表面标志来分离筛选精原干细胞。方法：构建隐睾小鼠模型40只,3月后采用传统的两步消化法获取生精上皮的细胞悬液,利用流式细胞术进行α6 integrin+和 c-kit-双筛...
- 张茨刘春霞王玲珑杨嗣星胡云飞
- 文献传递
