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刘玉: 作品数：49 被引量：167H指数：9; 供职机构：南京医科大学基础医学院微生物学系与免疫学系更多>>; 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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HCV NS5A基因在hepG2细胞中的表达以及对PI3K的影响被引量：4: 2007年; 目的:探讨HCV-NS5A对PI3K表达的影响。方法:应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得NS5A全长基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中。通过酶切、PCR及测序鉴定,NS5A基因已正确插入到pcDNA3.0(-)中,再利用脂质体转染HepG2细胞。结果:经RT-PCR及Western blot检测,HCV的NS5A基因在HepG2细胞中获得表达,而且在表达重组NS5A的转染HepG2细胞中,检测到PI3K蛋白的表达。结论:NS5A可在体外激活PI3K及其信号通路。; 胡学芳邓小昭刁振宇张云周宗安刘玉; 关键词：HCV NS5A HEPG2细胞基因表达

不同源传染性法氏囊病病毒的分离及其生物学特性分析: 2003年; 用传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)单克隆抗体夹心抑制 EL ISA对麻雀、鸭、鹅进行了血清学调查 ,阳性率分别为 7.4% ( 4/ 54 )、95.5%( 3 6 3 / 3 80 )、9.4% ( 1 1 / 1 1 7)。从 IBD阳性麻雀、IBD病鸡以及同群饲养的鸭、鹅体内分离到了 4株不同源病毒 ,IBDV单克隆抗体夹心 EL ISA、Dig-标记 IBDV c DNA探针斑点杂交和交叉中和试验证明该病毒均为 IBDV血清型。病毒可适应并致死鸡胚 ,适应于鸡胚成纤维细胞并产生细胞病变效应 ( CPE)。病毒代谢抑制试验证明其基因组为 RNA,病毒对乙醚不敏感 ,p H2 .0不能灭活病毒 ,p H 1 2可使病毒失去感染性 ,56℃作用 3 h病毒仍有活性 ,70℃ 1 h可灭活病毒。以上结果表明 ,从鸡、麻雀、鸭、鹅体内分离到的 IBDV生物学性质比较稳定且非常相似。本研究结果提示 IBDV已在我国广泛流行 ,麻雀、鸭、鹅可成为 IBDV携带者或传染源 ,在; 王永山周宗安刘玉侯继波何孔旺丁铲邓小昭高健刁振宇; 关键词：传染性法氏囊病病毒分离禽病细胞病变效应

检测囊虫循环抗原胶体金试条的研制与初步应用被引量：1: 2009年; 目的研制快速检测囊虫循环抗原(CA)的胶体金试纸法。方法以部分纯化囊虫抗原免疫BALB/c小鼠制备抗CA单克隆抗体(McAb),经筛选获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株。用制备的McAb两两配对,制备了囊虫CA免疫胶体金快速诊断试条。结果以1A5和1B6配对的试条对人体囊虫CA、囊虫CA标准抗原以及63份囊虫病患者血清、9份脑囊虫病患者脑脊液的检测结果均为阳性,对弓形虫病感染者、包虫病患者及非疫区献血员血清的检测结果均为阴性;与酶联免疫吸附试验(ELISA)的平行对比试验表明,试条检测敏感性与ELISA的敏感符合率为97.03%。结论研制的免疫胶体金诊断试条可用于人体囊虫病CA的特异性诊断和流行病学调查。; 刘玉唐雨德王永山王长军王平冷欣彦

高血脂对囊虫病循环抗原检测结果的影响被引量：2: 2007年; 刘玉王永山王平王元伦; 关键词：囊虫病循环抗原高血脂

炭疽杆菌双重实时荧光PCR检测方法的建立被引量：6: 2013年; 目的建立同时检测炭疽杆菌capA基因、PA基因的双重实时定量荧光PCR方法,用于应对突发传染病疫情和流行病学调查、突发公共卫生事件应急处置的早期检测及防范生物恐怖威胁。方法设计和合成分别针对炭疽杆菌capA基因、PA基因的引物对和荧光双标记探针,构建质粒标准品,通过优化探针、引物浓度、反应体系试剂组分等参数,建立可同时检测capA基因、PA基因的双重实时荧光PCR方法,测试方法的灵敏度和特异性,并在实战检测中应用。结果双重实时荧光定量PCR的炭疽杆菌capA基因、PA基因检测的灵敏度分别可达到每反应5和50拷贝,并具有良好的特异性,在实战应用中亦经过考验。结论双重实时荧光定量PCR技术具有可以同时筛查、经济、快速、特异性强等优点,在炭疽杆菌检测方面有良好应用价值。; 谭维国陈文琦吕恒刘玉王平陈凤娟王长军张锦海; 关键词：炭疽杆菌

炭疽杆菌双重可视化LAMP检测方法的建立被引量：3: 2016年; 目的建立同时检测炭疽杆菌cap A基因、PA基因的双重环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,用于防范生物恐怖威胁。方法设计和合成分别针对炭疽杆菌cap A基因、PA基因的引物对,通过优化参数,建立可同时检测cap A基因、PA基因的双重LAMP方法,测试敏感性和特异性,并应用于模拟样本和实战检测。结果双重LAMP的检测cap A基因、PA基因的敏感性均可达到50模板拷贝每反应,并具有良好的特异性,在重大保障活动中得到检验。结论双重LAMP方法具有可以同时筛查、简单快速、灵敏度高等优点,在炭疽杆菌检测方面有良好应用前景。; 刘玉陈文琦王平操敏韩一芳张琪张锦海王长军; 关键词：炭疽杆菌环介导等温扩增

EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析被引量：2: 2013年; 目的:制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串联蛋白并分析其免疫学特性。方法:用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位,将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,经大肠杆菌BL21表达并纯化。制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定后,免疫小鼠制备多克隆抗体,以ELISA检测抗体的效价,免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性。结果:通过原核表达与纯化,获得高纯度的表位融合蛋白,经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体,该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析。结论:本研究制备的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体,为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础。; 曹清唐小军李文杰熊四平毛园熊林刘玉王长军冯振卿陈仁杰; 关键词：鼻咽癌 EB病毒多克隆抗体重组基因

猪囊虫病基因工程疫苗的研制被引量：9: 1999年; 从猪带绦虫六钩蚴ｃＤＮＡ文库中筛选目的基因并进行克隆表达，重组抗原用血清学方法和猪体免疫试验进行鉴定。将具有免疫保护作用的重组抗原纯化，与免疫刺激复合物疫苗佐剂混合，制备成猪囊虫病基因工程疫苗，免疫仔猪并攻虫。该疫苗安全、无毒副作用，免疫猪减虫率９２．２％，完全保护率５５．５％，且免疫组发现的囊虫多数已死亡。以上结果表明用大肠杆菌表达的重组抗原制备的猪囊虫病基因工程疫苗安全、高效、成本低廉、可规模化生产，有望成为预防猪囊虫病的一种新型生物制剂。; 唐雨德顾志香刘玉郁兴明; 关键词：猪囊虫病基因工程疫苗免疫效果

应用小鼠动物模型进行猪囊虫病免疫预防的实验研究: 78只昆明小鼠随机分为三组,第一组用猪囊虫病基因工程疫苗免疫一次,每二组免疫两次,第三组不免疫.第一次免疫后20天各小鼠经尾静脉感染已孵化的有活力的六钩蚴,63天后剖检小鼠检查有无囊虫,并观察虫体的活力.用免疫学方法检测...; 唐雨德顾志香刘玉郁兴明于明明; 关键词：昆明小鼠动物模型免疫猪囊虫病基因工程疫苗; 文献传递

稳定表达Trop-2基因的NIH3T3细胞系的构建和特性分析被引量：1: 2013年; 目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长、增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法检测NIH3T3-Trop-2细胞的增殖能力,软琼脂集落形成实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的克隆形成能力,明胶酶谱法检测NIH3T3-Trop-2细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及细胞划痕实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的迁移能力。结果:稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞在生长增殖、克隆形成及侵袭能力均较NIH3T3细胞强,细胞培养上清中的MMP-2和MMP-9增多。结论:Trop-2对细胞的增殖与迁移能力具有明显的促进作用。; 刘玉唐小军曹清丁贵鹏张慧林王欢郑峰徐凛锋林红; 关键词：NIH3T3 真核表达

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