吕铁钢
- 作品数：7 被引量：21H指数：1
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 甜味蛋白(Brazzein)基因的人工合成及其在大肠杆菌中的重组表达
- 甜味蛋白是20世纪70年代以来在非州西部和南亚地区热带雨林植物的果实中提取到的一类蛋白质,其甜度是同重蔗糖的几千倍到几万倍,由于甜味蛋白是非糖物质、甜度高又无毒副作用。因此,对甜味蛋白的研究和开发应始终受到一些发达国家的...
- 刘松财任晓慧郝林琳章倩倩候峰吕铁钢周立光吴琼卢可齐建英张永亮
- 文献传递
- 生长抑素基因靶向siRNA表达载体的构建及对生长抑素基因表达的抑制作用
- 2008年
- 合成含靶向生长抑素(Somatostatin,SS)前体基因的siRNA转录模板的发夹结构,插入pSilencerTM2.1-U6载体构建重组质粒2.1-S。提取小鼠下丘脑组织总RNA,PCR扩增获得SS前体基因cDNA,构建真核表达载体pcDNA3.1-SS、pEGFP-SS。将2.1-S分别与pcDNA3.1-SS、pEGFP-SS共转染入细胞中瞬时表达,检测SS前体基因表达变化。结果显示,重组质粒在E.coli(DH5α)内扩增,酶切及测序鉴定证明siRNA转录模板完整,正确地插入到pSilencerTM2.1-U6质粒中,重组质粒pcDNA3.1-SS与pEGFP-SS经测序序列完全正确。转染细胞在mRNA水平及蛋白水平均检测到2.1-S对SS前体基因表达的抑制。这表明,SS基因靶向siRNA稳定表达载体能在哺乳动物细胞中表达,并对靶基因呈抑制作用。
- 吴琼张永亮赵志辉刘宇鹏周立光任晓慧侯锋章倩倩吕铁钢郝林琳刘松财
- 关键词：生长抑素SIRNA
- 松子壳多糖(PSPS)对小鼠淋巴细胞转化率的影响
- 淋巴细胞受到ConA或Lps作用后发生增殖活化,其胞内线粒体琥珀酸脱氢酶活性相应升高,MTT 作为其底物参与反应,形成蓝色颗粒沉淀与细胞内或细胞周围,经DMSO溶解后为蓝色溶液,可用酶标仪测定其OD值,测定波长为570。...
- 吕铁钢刘松财母连志任晓慧郝林琳章倩倩候峰周立光吴琼卢可齐建英张永亮
- 文献传递
- 基于RNA复制子GHRH基因表达载体的构建及在293细胞中的表达
- 2007年
- 本研究将GHRH基因克隆到塞姆利基森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pCMV-Rep-lacZ,构建了真核表达载体pCMV-Rep-GHRH。采用脂质体介导将表达质粒pCMV-Rep-GHRH转染293细胞,经RT-PCR、IFA、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot检测,证明表达质粒pCMV-Rep-GHRH在293细胞中正确地表达了GH-RH多肽分子。本研究还利用放免法检测质粒载体转染细胞培养上清中GHRH浓度,初步比较了RNA复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体(pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH)的表达效率,结果表明,转染48 h,RNA复制子载体表达GHRH的含量显著高于普通载体,分别比pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH高出36.12%(P<0.05)和67.94%(P<0.05)。结论:构建的真核表达载体pCMV-Rep-GHRH能够在真核细胞293中表达GHRH多肽分子,且表达水平显著高于普通载体,为下一步更好地调控动物生长以提高动物生产性能奠定基础。
- 任晓慧乔继光刘松财张明军章倩倩侯峰吕铁钢周立光吴琼欧阳松应张永亮
- 关键词：生长激素释放激素复制子
- 松子壳多糖(PSPS)对非洲绿猴肾细胞(vero)的细胞毒性、增殖率和存活时间的影响
- 用细胞维持液将松子壳多糖(PSPS)系列稀释(100 ug／mL、200 ug／mL、300 ug／mL、400 ug／mL、 500 ug／mL),分别加入到非洲绿猴肾细胞(vero)中,观察PSPS对vero细胞的细...
- 母连志吕铁钢刘松财任晓慧郝林琳章倩倩候峰周立光吴琼卢可齐建英张永亮
- 文献传递
- 鲜马鹿茸不同部位多肽的提取及含量比较被引量：21
- 2007年
- 采用醋酸溶液和乙醇提取了6支鲜二杠马鹿茸的主干顶部(未骨化部分)、中部(部分骨化)、根部(大部分骨化)3个部位的多肽,进行了多肤的SDS-PAGE分析和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、表皮生长因子(EGF)、神经生长因子(NGF)的Western-blotting分析。采用考马斯亮蓝G-250法进行了马鹿茸不同部位总多肽定量,RIA法测定了IGF-1含量,ELISA法比较了不同部位EGF、NGF的OD值。结果:SDS-PAGE表明鹿茸酸醇提取多肽为一系列分子量低于17kD的混合物,Western-botting证明其含有IGF-1、EGF、NGF等生长因子。定量分析表明:马鹿茸顶部、中部、根部总多肽、IGF-1及醇提多肽中IGF-1含量均差异显著(P<0.05),EGF、NGF ELISA检测OD值差异显著(P<0.05),均从顶部到根部递减。
- 郝林琳刘松财张明军程淑琴吕铁钢张永亮
- 关键词：马鹿茸多肽胰岛素样生长因子-1表皮生长因子神经生长因子
- 含RNA复制子表达载体介导的生长抑素基因在小鼠肌肉中的表达
- ＜正＞生长激素释放抑制因子（SS或GHRIH）是生长激素（GH）的负调控因子,与生长激素释放激素 （GHRH）一起,调节人和动物体内生长激素的浓度。将外源基因融合到HBsAg基因的适当部位,能表达成HBsAg杂和颗粒,而...
- 任晓慧张永亮刘松财戴建威郝林琳侯峰章倩倩吕铁钢周立光吴琼卢可齐剑英
- 关键词：小鼠
- 文献传递
