吴业红
- 作品数：10 被引量：13H指数：3
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金长春市科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 重组戊型肝炎病毒抗原ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 目的建立重组戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于HE疫苗中HEV抗原含量的检测。方法以重组HEV病毒样颗粒作为免疫原,免疫母鸡,制备抗HEV-IgY多克隆抗体,纯化后作为包被抗体,HRP标记的抗HEV单克隆抗体作为检测抗体,建立HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行验证。用建立的方法检测3批HE疫苗成品的HEV抗原含量,计算HEV抗原对氢氧化铝的吸附率。结果建立的ELISA方法线性范围为2～128 ng/ml,最低定量限为2 ng/ml;该方法检测冻干甲肝减毒活疫苗、重组人白介素-2(IL-2)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、人血白蛋白、小牛血清及健康人血清均无交叉反应;该方法检测3个浓度的HEV抗原内部参考品的回收率在95.13%～104.50%之间,试验内及试验间变异系数均<15%;包被抗HEV-IgY的酶标板于37℃放置5 d,其检测HEV抗原内部参考品的A450值及敏感性均未发生显著变化;3批HE疫苗成品中HEV抗原对氢氧化铝的吸附率均大于95%,符合相关质控要求。结论已成功建立了HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,可用于HEV抗原含量的检测。
- 陈子杨吴业红张健锋常军亮时成波贾媛郭立君李春晖
- 关键词：肝炎病毒戊型病毒样颗粒IGY酶联免疫吸附测定
- 抗卵巢癌相关抗原CA125单抗及其磁酶诊断试剂的制备
- 2014年
- 目的制备卵巢癌相关抗原CA125（cancer antigen 125）磁酶检测试剂,并进行验证及初步应用。方法应用CA125抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合,筛选效价高、稳定性分泌抗体的杂交瘤细胞株后,接种小鼠腹腔,收集腹水,制备抗CA125单抗,并对其亚型、特异性、相对亲和力、抗原结合位点及抗原决定簇进行鉴定。通优化反应条件制备CA125抗原磁酶检测试剂,并进行验证后,将其应用于50份女性健康体检者及100份卵巢癌患者血清的检测。结果共获得3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为4B6、2G10、1C2;1C2、4B6和2G10单抗的抗体亚型分别为Ig G2a、Ig G1和Ig G1,轻链均为κ链,相对亲和力依次为2G10〉4B6〉1C2,与AFP、CA50、CEA、CA199、CRP、CA242和小牛血清未发生交叉反应,1C2单抗识别位点与2G10和4B6不同,且3株单抗的抗原决定簇均在CA125蛋白部分上。确定该磁酶检测的反应条件为：包被抗体按100μg/ml,37℃包被1 h;20%小牛血清37℃封闭1 h或4℃封闭过夜;酶标抗体最佳反应时间为45 min。当CA125浓度在10~500 U/ml时,与对应的A450值线性关系良好,R2=0.992;该检测试剂最低检测极限约10 U/ml,灵敏度高;与人血清白蛋白、小牛血清、CA50、CEA、AFP、CRP、CA199和CA242均未发生反应,特异性高;于37℃放置4 d的CA125 A450值与2~8℃相比,差异无统计学意义（P〈0.05）;批内及批间变异系数均〈10%,重复性较好;高、中、低3个浓度的CA125抗原的回收率在94.45%~105.21%之间,准确性高。50份健康体检者血清中CA125阳性率为4%,100份卵巢癌患者血清中CA125阳性率为88%。结论已成功制备了卵巢癌相关抗原CA125磁酶检测试剂,该试剂具有应用于卵巢癌患者的诊断价值。
- 李雨桐王甲男韩顺子于爱东吴业红张秀霞
- 关键词：CA125抗原单克隆抗体磁珠
- 甲型H1N1流感病毒佐剂疫苗小鼠免疫效果
- 2010年
- 为了探讨甲型H1N1流感病毒氢氧化铝佐剂疫苗对小鼠的免疫作用及对小鼠繁殖性能的影响,以不同剂量、不同免疫程序免疫小鼠后定期采血;用血凝抑制(HI)方法检测血清H1N1流感病毒HI抗体滴度,观察H1N1流感病毒佐剂疫苗对小鼠受孕、产仔、哺乳的影响;比较孕鼠及非孕鼠的抗体滴度,免疫后孕鼠所产仔鼠的体重及H1N1胎传抗体水平。结果显示,以0.5μg组开始的不同剂量、不同免疫程序均可使小鼠产生90倍以上水平的H1N1流感病毒抗体;免疫后的小鼠不影响受孕、产仔及哺乳;仔鼠保护性抗体可持续1个月以上。H1N1流感病毒佐剂疫苗是一种高免疫原性的制剂,用低剂量免疫,即可产生90倍以上持续时间较长的保护性抗体。这种佐剂疫苗对小鼠的繁殖性能无明显影响,免疫产生的抗体经胎盘可垂直传递给仔鼠。
- 常军亮陈维金李春晖吴业红王莹徐军王伟善郭立君郭凤云
- 关键词：甲型H1N1流感病毒佐剂疫苗免疫原性繁殖性能
- HEV抗原ELISA检测方法的建立及初步应用
- 戊型肝炎(hepatitis E)是由戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)引起的病毒性肝炎,其在亚洲、非洲及中美洲等发展中国家是一种比较严重的传染病,占急性病毒性肝炎的50%,孕妇死亡率高达20%。...
- 吴业红陈子杨张健峰常军亮王莹迟春萍时成波徐军贾媛郭立君郭凤云
- 文献传递
- 甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在动物体内诱导中和抗体水平及其过敏原性被引量：1
- 2014年
- 目的评价甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在动物体内诱导的中和抗体水平及其过敏原性。方法将昆明小鼠随机分为7组,分别经腹腔注射3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗(剂量分别为15、30、45μg/0.5 ml)、3批季节性H1N1流感病毒裂解疫苗(剂量分别为15、30、45μg/0.5 ml)和PBS(阴性对照),每只0.5 ml,间隔21 d加强免疫1次,分别于免疫前、初次免疫后21 d及加强免疫后14 d采血,分离血清,采用固定病毒-稀释血清法检测小鼠血清中和抗体滴度。将豚鼠随机分为4组,分别经腹腔注射上述3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗和PBS(阴性对照)各0.5 ml,隔日注射1次,共3次,第1次注射后第14和21 d,分别经静脉注射同一批号的疫苗1.0 ml攻击,观察豚鼠的过敏反应。结果初次免疫后21 d,甲型H1N1流感病毒裂解疫苗15、30、45μg剂量组免疫小鼠血清中和抗体滴度分别为免疫前和阴性对照组的47.9、113.5和319.9倍,且呈剂量依赖性;加强免疫后14 d,甲型H1N1流感病毒裂解疫苗各剂量组中和抗体滴度比初次免疫后21 d均明显升高,也呈剂量依赖性,且均高于与相应剂量的季节性H1N1流感病毒裂解疫苗。甲型H1N1流感病毒裂解疫苗各剂量组豚鼠均无过敏反应发生。结论甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在昆明小鼠体内可诱导产生保护性中和抗体,对豚鼠无过敏反应。
- 赵大鹏李晓波郭雪任琦王亚军支百惠李晓辕吴业红曹宇商凤云张雪梅
- 关键词：甲型H1N1流感病毒裂解疫苗中和抗体
- 球状功能性烟草花叶病毒纳米颗粒的制备及表征
- 2017年
- 烟草花叶病毒(TMV)由于其良好的生物相容性、单分散性、多价性、低成本等优点,已作为功能材料的基本构筑单元应用于光电器件、组织工程、疫苗载体,无机纳米材料制备等研究领域。然而,相比于棒状的TMV,球状TMV纳米颗粒无核酸分子,抗环境影响能力更强,比表面积更大。本文利用蛋白质的热致变性原理,对经基因和化学改性后的棒状TMV如半胱氨酸突变体(TMV-Cys)、赖氨酸突变体(TMV-EPMK)和β-环糊精(β-CD)修饰的TMV(TMV-β-CD)进行热变性处理,探究其形成球型纳米颗粒(TMV-SNP)的能力及功能性。结果显示,改性后的TMV经历热变性后可得到形貌均一的球型纳米颗粒,且其暴露在纳米颗粒表面的功能基团Cys、Lys和β-CD仍具有反应活性。
- 吴业红赵霞胡君林园王倩
- 关键词：烟草花叶病毒热变性功能性突变体
- 聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林治疗停药后复发性慢性丙型肝炎16例被引量：3
- 2011年
- 干扰素不但能清除部分丙型肝炎病毒（HCV）的感染，还能减轻HCV感染所致肝脏的坏死性炎症和阻止／延缓肝脏纤维化，是公认治疗丙肝的首选药物。长效干扰素的出现克服了普通干扰素半衰期短的特性，减轻了患者长期用药的痛苦。随着人们对健康的重视，越来越多的慢性丙型肝炎患者接受了长效干扰素抗病毒治疗，我们观察到一部分患者经过抗病毒治疗达到一定疗程后取得了较好疗效，同时我们观察到一部分患者经过抗病毒治疗后停药复发，
- 姜艳玲沈科书高雪娟李艳玲吴业红
- 关键词：聚乙二醇干扰素Α-2A利巴韦林
- 胸腺五肽治疗低复制状态慢性乙型肝炎的临床疗效被引量：1
- 2011年
- 目的观察胸腺五肽(Thymopentin,TP-5)治疗低复制状态慢性乙型肝炎的临床疗效。方法将72例HBV-DNA定量检测低于2 000 IU/ml的慢性乙型肝炎患者随机分为两组:治疗组(38例)经肌肉注射TP-5 1 mg,每日1次;对照组(34例)口服护肝片,每日3次。疗程为12周,治疗结束后随访12周。采用PCR法检测两组患者HBV-DNA水平,化学发光法检测乙肝血清标志物变化,全自动生化仪检测肝功能指标,放射免疫法检测肝纤维化指标。结果治疗组在治疗及随访结束后,HBV-DNA阴转率均明显高于对照组(P<0.05),治疗组治疗后肝功能指标和肝纤维化指标均得到明显改善(P<0.01或P<0.05),与对照组治疗后相比,差异也有统计学意义(P<0.05);两组HBsAg阴转率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TP-5可促进低复制状态慢性乙型肝炎HBV-DNA转阴,改善受损肝脏功能,延缓肝纤维化进展。
- 姜艳玲沈科书高雪娟李艳玲吴业红
- 关键词：胸腺五肽
- 乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上增殖条件的优化被引量：3
- 2020年
- 目的优化乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件。方法以乙型流感病毒感染无血清悬浮培养的MDCK细胞,对培养条件中的MOI(10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7)、胰酶终浓度(2.5、5、7.5、10、15、20μg/mL)、细胞接毒密度(50×10^4、100×10^4、300×10^4、500×10^4、700×10^4个/mL)及病毒收获时间(24、48、72、96、120 h)进行优化。同时对流感病毒在贴壁培养及无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖情况进行比较。结果乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上最适增殖条件为:MOI为10^-2、胰酶终浓度为10μg/m L、细胞接毒密度为300×10^4个/mL、病毒收获时间为72 h。流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上增殖的HA血凝滴度及病毒滴度(CCID50)均明显高于贴壁培养的MDCK细胞(P<0.05)。结论优化了乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件,为后续采用生物反应器大规模生产流感疫苗奠定了基础。
- 王笑天李爽席莉丁瑞远刘玮彤姚为民柴文张雪梅吴业红
- 关键词：MDCK细胞流感病毒
- 甲型H1N1流感病毒裂解疫苗动物体内的安全性和免疫原性被引量：1
- 2013年
- 目的 评价甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在动物体内的安全性和免疫原性。方法 按《中国药典》三部（2005版）方法进行异常毒性试验。将小鼠随机分为7组,每组10只,实验组小鼠分别经小鼠后腿胫前肌肌肉注射不同血凝素含量（15、30、45μg/0.5 ml）的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗,同时设疫苗对照组（相应规格的季节性H1N1流感病毒裂解疫苗）及阴性对照组（PBS）,注射剂量均为0.1 ml/只,间隔21 d加强免疫1次,分别于初免后0、21、28、35及42 d采集眼静脉血,分离血清,检测血凝抑制（hemagglutination inhibition,HI）抗体水平。结果 异常毒性试验结果符合《中国药典》三部（2005版）判定标准。与阴性对照组比较,初免后21、28、35、42 d,各剂量实验组小鼠血清抗体水平均明显升高,21 d即上升到较高水平,28 d达到峰值（P均〈0.01）;初免后0、21、28、35、42 d,除35 d外,均高于相应剂量疫苗对照组（P均〉0.05）。初免后21 d,15、30、45μg/0.5 ml剂量实验组小鼠血清中HI抗体阳转率分别为80%、90%和90%,HI抗体保护率分别为100%、90%和90%,与相应剂量疫苗对照组相比,差异均无统计学意义（P均〉0.05）;初免后28、35、42 d,15、45μg/0.5 ml剂量实验组HI抗体阳转率维持在80%以上,30μg/0.5 ml剂量实验组HI抗体阳转率略低,而各剂量实验组HI抗体保护率均在90%～100%之间。结论 甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在昆明小鼠中具有良好的安全性和免疫原性。
- 赵大鹏李晓波任琦王亚军支百惠李晓辕吴业红郭雪张雪梅
- 关键词：疫苗安全性免疫原性
