吴淑华
- 作品数：43 被引量：303H指数：12
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 瓜类褪绿黄化病毒编码的P6蛋白亚细胞定位及致病特征分析被引量：6
- 2021年
- 以瓜类褪绿黄化病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)山东寿光分离物作为研究对象,对其RNA1编码的P6蛋白进行克隆,发现其基因全长为159 bp,编码1个大约6 kD的蛋白,并含1个跨膜区。进一步构建了带有YFP标签的荧光表达载体P6-YFP,浸润本氏烟叶片后利用激光共聚焦显微镜观察,发现P6-YFP在细胞质和细胞核均有分布。将P6构建到马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)异源表达载体获得的PVX-P6接种本氏烟,发现接种PVX-P6的植株新叶伴有明显黄化、皱缩等症状,并沿叶脉出现坏死,而接种PVX空载体的植株仅有轻微的花叶,表明在PVX异源表达系统中,P6诱导寄主植物出现更严重的症状,暗示P6能增强PVX的致病性,可能是参与症状形成的致病相关因子。
- 涂丽琴干射香吴淑华任春梅程兆榜章松柏朱月林周益军季英华
- 关键词：亚细胞定位
- 三对水稻抗白叶枯病近等基因系的RAPD分析被引量：8
- 1997年
- 以水稻抗白叶枯病３对近等基因系（ＩＲ２４与ＩＲＢＢ３、ＩＲ２４与ＩＲＢＢ４和ＩＲ２４与ＩＲＢＢ５）为材料，对近等基因系基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析，结果显示：经１２０个１０－核苷酸随机引物对３对近等基因系基因组ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增，有２个引物（ＯＰＫ－１１和ＯＰＮ－０４）在ＩＲＢＢ３中各扩增出１～２条特异性条带；有３个引物（ＯＰＫ－０８、ＯＰＮ－１１和ＯＰＮ－１８）在ＩＲＢＢ４中各扩增出了２条特异性条带；有３个引物（ＯＰＬ－０４、ＯＰＮ－１０和ＯＰＯ－１８）在ＩＲＢＢ５中各扩增出１～２条特异性条带；在轮回亲本中未见有上述类似的片段被扩增，多次重复均获得较一致的结果。因此，推测这些特异性条带（ＤＮＡ片段）分别与水稻抗白叶枯病抗性基因Ｘａ－３、Ｘａ－４和ｘａ－５相关。
- 吴淑华范永坚陆振晓周益军
- 关键词：水稻白叶枯病水稻近等基因系抗性基因RAPD分析
- 稻瘟病菌生理小种离体接种鉴定和致病性人工诱变研究被引量：25
- 1999年
- 稻瘟病菌品种专化性致病型（即生理小种）严重分化，给抗病育种及病害控制带来了许多困难。因此研究其生理小种变化是目前发展所必需。本试验对稻瘟病菌生理小种的致病性人工诱变研究前期工作进行了探讨，并初步掌握了产孢的技术、水稻离体培养和接种技术、菌株诱变的条件以及获得致病性突变菌株。
- 周益军范永坚吴淑华陆振晓程兆榜
- 关键词：稻瘟病菌生理小种离体接种人工诱变
- 辽宁省番茄上番茄斑驳花叶病毒的分子鉴定被引量：6
- 2020年
- 为明确2015年在辽宁省调查番茄病毒病时发现的病毒类型,对田间采集的番茄病样进行了分子检测。结果显示,在用烟草花叶病毒属通用检测引物进行RT-PCR扩增时22份样品中有6份扩增到800 bp左右的目的片段,扩增产物测序后BLAST分析结果表明它与已报道的番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,ToMMV)(KF477193)同源性最高,为99.2%。为进一步确认,针对ToMMV编码的外壳蛋白(CP)设计了一对特异性引物,对样品进行RT-PCR检测,结果显示6份阳性样品都能扩增到目的条带,对其克隆测序后发现CP基因序列全长480 bp,编码1个相对分子质量约1.77×104的蛋白质,系统进化树表明该病毒与ToMMV的同源性最高,共同聚类于一个分支。这些结果表明在辽宁省番茄病株上检测到的病毒为ToMMV的1个分离物,这是在辽宁省番茄上发现番茄斑驳花叶病毒的首次报道。
- 涂丽琴吴淑华高丹娜吉颖程兆榜周益军朱月林刘勇季英华
- 关键词：分子鉴定番茄
- 麦类土传线状病毒致病力分化、品种抗性及其病原分子生物学研究
- 2002年
- 范永坚周益军吴淑华程兆榜侯庆树
- 关键词：麦类土传病害黄花叶病致病力分化品种抗性
- 江苏省大豆上一种新粉虱传病毒的分子鉴定及系统进化分析被引量：2
- 2022年
- 2019年在对江苏大豆上病毒病进行调查时,发现徐州和淮安大豆田间出现一种表现叶片黄化、花叶症状的病毒病,为明确其伴随病毒种类,对田间采集的70份疑似病样进行分子检测和鉴定,结果在利用香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)通用引物检测时发现,70份疑似病样中有15份样品扩增到800 bp左右的目的片段,序列测定后BLAST分析结果显示,其与一种粉虱传病毒——豇豆轻斑驳病毒CpMMV(cowpea mild mottle virus, CpMMV)的同源性最高,暗示了其可能是CpMMV的一个分离物。针对CpMMV编码的CP基因设计特异性引物,检测结果显示15份阳性样品均扩增到目的片段,对获得的CP基因片段进行克隆测序,发现其序列全长867 bp,编码分子量约为32ku的蛋白;序列聚类分析结果显示,其与已报道的CpMMV分离物有较高的同源性,并聚类到同一个大的分支,其中与安徽、海南等地分离物相对近缘,聚在同一个小分支。这些结果表明江苏大豆存在豇豆轻斑驳病毒的侵染危害,生产上需要密切关注。
- 吉颖吴淑华崔晓艳涂丽琴高丹娜程兆榜周益军陈新季英华郭青云
- 关键词：大豆分子鉴定
- 一种利用RT-LAMP快速检测烟草轻型绿花叶病毒的方法
- 本发明提供了一种快速检测烟草轻型绿花叶病毒的方法，属植物保护领域。根据烟草轻型绿花叶病毒核苷酸序列设计RT-LAMP引物(TMG2-F3，TMG2-B3，TMG2-FIP，TMG2-BIP)。样品提取总RNA后，进行RT...
- 季英华赵文浩吴淑华李廷芳杜琳琳周彤程兆邦周益军
- 文献传递
- 本氏烟组蛋白H4与番茄斑驳花叶病毒外壳蛋白互作调控病毒侵染
- 2023年
- 以番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,ToMMV)外壳蛋白(Coat protein,CP)为研究对象,通过荧光素酶互补技术(Luciferase complementation imaging assay,LCI)研究ToMMV CP与本氏烟组蛋白H4在植物体内的互作情况。亚细胞共定位结果显示,ToMMV CP定位于细胞核和细胞质中,组蛋白H4定位于细胞核中,两者共定位于细胞核中。双分子荧光互补(BiFC)试验结果表明,ToMMV CP与组蛋白H4的互作位置主要在细胞核中。上述2种试验结果证明,烟草花叶病毒CP与本氏烟组蛋白H4在植物体内存在互作。采用病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术沉默本氏烟烟草中的H4基因,对沉默H4基因的植株接种ToMMV,接种后第4 d,通过实时荧光定量PCR检测方法检测系统叶的病毒含量,发现病毒含量显著低于对照组,结果表明H4基因的沉默会影响ToMMV在植株中的复制,组蛋白H4可能是ToMMV侵染植株的本氏烟感病因子。病毒编码的CP可能与寄主组蛋白H4在细胞核内发挥作用,进而使病毒完成系统侵染。
- 刘亚楠孙枫涂丽琴高丹娜李硕吴淑华季英华季英华
- 关键词：外壳蛋白组蛋白
- 江苏菜豆上分离的番茄黄化曲叶病毒基因组序列分析被引量：1
- 2016年
- 2012年,江苏南京菜豆上出现了一种新的病毒病害,病株表现明显的叶片皱缩、植株矮化等症状。根据其症状及介体发生状况,对其伴随的病毒种类进行了研究,结果从中检测到一种粉虱传双生病毒,对其基因组DNA-A组分克隆测序后发现其全长2 781 bp,编码6个ORF,BLAST及聚类分析结果显示该病毒与番茄黄化曲叶病毒同源性最高(99%),是番茄黄化曲叶病毒的一个分离物。这是江苏省番茄黄化曲叶病毒侵染菜豆的首次报道,暗示番茄黄化曲叶病毒可能是我国菜豆种植的重要潜在威胁。
- 季英华张晖赵文浩吴淑华胡婕程兆榜赵统敏余文贵朱叶芹周益军
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒菜豆
- 苏云金芽孢杆菌kurstaki亚种几丁质内切酶基因的生物信息学分析被引量：2
- 2008年
- 以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(Bacillus thuringiensissubspkurstaki)基因组DNA为模板,利用1对特异性引物通过Touchdown PCR方法扩增了长为2 576 bp的几丁质酶kchi基因序列(GenBank登录号:AY189740)。生物信息学分析发现:该序列包含1个完整的开放阅读框,编码688个氨基酸,推测是分子量约为75 820。等电点pI=5.89的几丁质酶前体。序列和结构比较分析结果表明:Kchi属于几丁质内切酶,包括几丁质酶催化区、粘蛋白Ⅲ型同源区和几丁质结合区3个结构域,在N端还有1个分泌信号肽。除与Bt巴基斯坦亚种几丁质酶同源性较低(相似性为61.3%)外,与Bt其他亚种的同源性都较高(≥92.0%)。
- 钟万芳阎文昭蔡平钟吴淑华方继朝
- 关键词：苏云金芽孢杆菌几丁质酶生物信息学
