周培华
- 作品数：17 被引量：30H指数：4
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省科技统筹创新工程计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NRP-1在胃癌组织及细胞系中的表达及临床意义被引量：9
- 2016年
- 目的研究神经纤毛蛋白1(NRP-1)在胃癌组织的表达,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理因素的关系及可能的临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测180例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织标本NRP-1表达,用免疫印迹方法检测胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞NRP-1表达,K-M生存曲线和多因素回归模型用于分析胃癌预后。结果胃癌组织中NRP-1表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001),胃癌组织中NRP-1高表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、AJCC分期、T分期呈正相关(P<0.05)。多因素生存分析表明高表达NRP-1是胃癌患者总生存期的独立预后因子。结论过表达NRP-1可能在胃癌进展中发挥着重要作用,过表达NRP-1可作为生物标志物预测胃癌患者的不良预后。
- 张立张迪周培华王孝珑王炜陈南征李孝彬孙学军
- 关键词：胃癌免疫印迹
- 热诱导对8HSE修饰的hTERT启动子转录活性的增强作用
- 2015年
- 目的:探讨热诱导对8倍重复串联热休克元件(8HSE)修饰的人端粒酶逆转录酶启动子(h TERTp)转录活性及靶向性的影响。方法:用PCR法从人结肠癌基因组中克隆h TERTp;将单纯的h TERTp或8HSE修饰的h TERTp重组于双荧光素酶报告载体p GL4.2后,分别与内参质粒p GL4.74(含TK启动子)共转染h TERT高表达的SW480细胞株和h TERT低表达的MKN28细胞株,双荧光素酶法检测h TERTp在37℃及43℃下的转录活性。结果:PCR、酶切和DNA测序表明h TERTp克隆、8HSE合成及载体构建成功。37℃下,单纯h TERTp在SW480细胞中的转录活性明显高于MKN28细胞(P<0.05),8HSE对h TERTp转录活性无增强作用,且在SW480细胞中8HSE对h TERT转录活性具有抑制作用;43℃下,单纯h TERTp的转录活性在两种细胞中无明显改变(P>0.05),但与单纯h TERTp比较,8HSE修饰的h TERTp转录活性在SW480细胞中明显增强(P<0.05),而在MKN28细胞中无明显改变(P>0.05)。结论:热诱导对h TERTp转录活性无明显影响,但对8HSE修饰的h TERTp转录活性有明显的增强作用,且该调控元件靶向于h TERT高表达的肿瘤细胞。
- 王孝珑贺赛孙学军周培华郑见宝魏光兵崔飞博肖宁张立禄韶英
- 关键词：转录因子HSP70热休克蛋白质类转录启动子
- 5HRE强化的肝癌靶向性自杀基因载体的构建被引量：4
- 2007年
- 目的设计并构建5个拷贝的缺氧反应元件(5HRE)增强子和甲胎蛋白启动子(AFPp)联合调控的自杀基因硝基还原酶(NTR)真核表达载体。方法设计引物作重叠PCR从大肠杆菌中克隆融合有6个组胺酸基因标签(6his-tag)的自杀基因NTR,用合成的HRE寡核苷酸单链退火,多次重组克隆构建5HRE。将NTR基因、5HRE和AFPp与酶切去除了巨细胞病毒即刻早期启动子(Pcmvie)的pIRES2-EGFP载体重组,构建携带5HRE、AFPp和NTR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR。结果成功克隆了融合6his-tag的NTR基因,NTR基因与Genbank公布的序列一致。成功合成了5HRE,测序与预期相符。将上述片段和AFPp重组到去除了Pcmvie的pIRES2-EGFP载体上,酶切鉴定和DNA序列分析无误。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR,为下一步的体外实验奠定了基础。
- 周培华孙学军王燕禄韶英
- 关键词：缺氧反应元件肝癌自杀基因
- 胃袖带切除术对GK大鼠2型糖尿病的影响及其机理
- 2013年
- 目的研究胃袖带切除术(sleeve gastrectomy,SG)对GK大鼠2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗作用及其可能机理。方法将13只12周龄的GK大鼠随机分为2组:SG组7只和假手术组(SO组)6只,分别行SG术和假手术。于术前及术后1、4、10和26周测量2组大鼠的体质量、24 h进食量、空腹血糖值、血清胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)和血清生长激素释放肽(Ghrelin)浓度;于术后10周检测2组大鼠的粪便能量含量,并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)和胰岛素耐受性实验(ITT)。结果①体质量:各时点2组大鼠的体质量比较差异均无统计学意义(P>0.05);与术前比较,术后1周2组大鼠的体质量均降低(P<0.01),术后10和26周的体质量均增加(P<0.01)。②24 h进食量:与SO组比较,术后4和10周SG组大鼠的24 h进食量均较低(P<0.05)。与术前比较,SG组大鼠术后1、4及10周的进食量均较低(P<0.05),SO组大鼠术后1周的进食量低于术前(P<0.05)。③空腹血糖值:与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的空腹血糖值均较低(P<0.01)。与术前比较,SG组大鼠术后各时点的空腹血糖值均较低(P<0.01),而SO组大鼠仅术后1周明显低于术前(P<0.01)。④血清GLP-1水平:与SO组比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平均较高(P<0.05)。与术前比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平较高(P<0.05),而术后SO组大鼠的血清GLP-1水平无明显变化(P>0.05)。⑤血清Ghrelin水平:与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低(P<0.01)。与术前比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低(P<0.001),而SO组大鼠的血清Ghrelin水平无明显变化(P>0.05)。⑥曲线下面积(AUC):SG组大鼠的AUC(OGTT和ITT)均较SO组低(P<0.01)。结论 SG术可以明显降低GK大鼠的空腹血糖值,改善葡萄糖耐量及增强胰岛素敏感性,该作用可能是GLP-1、Grelin等多种胃肠道激素共同作用的结果。SG术可能是潜�
- 张仕运孙学军郑见宝王炜刘栋陈南征贺赛周培华王孝珑
- 关键词：2型糖尿病胃肠道激素
- 抑癌基因RASSF1A在结肠癌中的表达研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨抑癌基因Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因在结肠癌组织以及相应正常结肠组织中的表达并分析其表达与结肠癌临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法和Western blot法检测34例结肠癌手术标本和相应的正常结肠组织中RASSF1A蛋白的表达水平,应用RT-PCR法检测RASSF1A mRNA在结肠癌和正常结肠组织中的表达情况。结果①免疫组织化学法结果:结肠癌组织中RASSF1A蛋白表达阳性率明显低于其在正常结肠组织中的表达阳性率〔35.3%(12/34)比97.1%(33/34),P<0.05〕。结肠癌组织中RASSF1A蛋白的表达与肿瘤分化程度和TNM分期均有关(P<0.05),即高、中分化及TNM分期较低(Ⅰ+Ⅱ期)者的RASSF1A蛋白表达阳性率较高(P<0.05)。②Western blot法结果:在34例结肠癌患者中RASSF1A蛋白表达水平明显低于其在相应的正常结肠组织中的表达水平〔0.316 8±0.019 6比0.914 4±0.177 6,P<0.05〕;该结果与RT-PCR法检测到的RASSF1AmRNA表达情况基本一致〔0.158 9±0.223 7和0.572 3±0.193 9,P<0.05〕。结论 RASSF1A基因的失表达可能在原发性结肠癌的发生、发展中起重要作用,检测RASSF1A的表达情况可为结肠癌的早期诊断提供帮助。
- 贺赛孙学军郑见宝王炜周培华魏光兵王晖姚建峰张立禄韶英杜俊凯
- 关键词：结肠癌RASSFLAWESTERNBLOTRT-PCR
- 缺氧诱导的CEA阳性细胞靶向调控元件荧光素酶报告基因载体的构建
- 目的 设计并构建5拷贝缺氧反应元件(5HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合的靶向调控元件荧光素酶报告基因载体.方法 设计引物,通过PCR方法从载体pLEGFP-N1-5HRE-CEAp合成两端含有不同酶切位点的...
- 孙学军周培华贺赛陈南征郑见宝魏光兵龙立坚余钧辉石景森
- 原发性胆囊癌50年诊治临床总结
- ＜正＞目的探讨原发性胆囊癌的诊断,总结外科治疗经验,以利全面地认识本病和制订合理的诊治方案,提高疗效。方法对我院1956年～2005年的50年间收治的945例原发性胆囊癌的临床诊疗资料进行回顾性分析。 1956年～200...
- 石景森孙学军王林王健生禄韶英任予周培华
- 文献传递
- Pleiotrophin的表达及其在血清水平与结肠癌的关系被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨pleiotrophin(PTN)的表达及其血清水平与结肠癌的关系。方法:应用real time-PCR、Western blot方法检测46例结直肠癌组织及其对应癌旁组织中PTN mRNA及蛋白表达水平;ELISA方法检测76例结直肠癌患者和58例健康体检者血液样本中的PTN表达水平。结果:PTN mRNA在结直肠癌组织中表达量以及PTN蛋白的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(均P<0.05);无论是PTN mRNA表达水平还是蛋白阳性率均与患者年龄、肿瘤组织类型无关(均P>0.05),而与肿瘤的分化程度呈负向关系、与TNM分期呈正向关系(均P<0.05)。结直肠癌患者血清PTN水平明显高于正常人群(P<0.05)。结论:PTN在结直肠癌组织中表达增高;血清PTN水平检测可作为诊断结直肠癌参考指标之一。
- 陈南征孙学军贺赛郑见宝周培华魏光兵王晖姚建锋张立禄韶英杜俊凯
- 关键词：结直肠肿瘤PLEIOTROPHIN
- 应用Cox模型分析影响胆管癌术后的预后因素
- ＜正＞目的应用 Cox 比例风险模型分析影响胆管癌切除术后的预后因素。方法对我院1980～2004年间120例胆管癌切除术后患者进行研究。其中,男67例,女53例,男女之比为1．26：1。年龄32～82岁,平均58．3岁...
- 孙学军石景森刘刚周培华卢乐王炜
- 文献传递
- 5HRE联合CEAp靶向调控RASSF1A基因对SGC7901胃癌细胞株抑制作用的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人5拷贝低氧反应元件(5HRE)联合癌胚抗原启动子(CEAp)调控元件的靶向性及调控RAS相关区域家族1A(RASSF1A)抑癌基因的慢病毒载体对SGC7901胃癌细胞的抑制作用。方法 1分别采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学SP染色及Western blot法检测SGC7901、MKN28和MCF-10A细胞株中癌胚抗原(CEA)mRNA及其蛋白,以及RASSF1A蛋白的表达水平,以确定实验细胞和阴性对照细胞。2构建p GL4.20-5HRE-CEAp-Luc载体以转染SGC7901、MKN28和MCF-10A细胞株,将各细胞株分为2组,分别加入(缺氧组)或不加入CoCl2(常氧组),比较各细胞株中缺氧组和常氧组细胞的启动活性。3将重组慢病毒载体(p LV-5HRE-CEAp-RASSF1A)及相应空病毒载体包装成病毒颗粒LV-5HC-RASSF1A(感染组)和LV-NC(阴性对照组),感染SGC7901细胞。以未感染任何病毒的SGC7901细胞作为空白对照组,将该3组细胞再分为2个亚组,分别加入(缺氧组)或不加入CoCl2(常氧组),比较缺氧组和常氧组细胞中RASSF1A蛋白的表达水平和细胞增殖抑制率。结果 1 q RT-PCR结果显示:SGC7901细胞株中CEA m RNA的表达水平高于MKN28及MCF-10A细胞株(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示:CEA的表达水平在SGC7901、MKN28及MCF-10A细胞株中依次递减,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:在SGC7901及MKN28细胞株中未检测到RASSF1A蛋白的电泳条带,而在MCF-10A细胞株中可检测到。据此确定SGC7901细胞株为实验细胞,MKN28细胞株为阴性对照细胞。2转染p GL4.20-5HRE-CEAp-Luc载体后,在SGC7901及MKN28细胞株中,同种细胞株内与常氧组比较,缺氧组细胞的活性倍数均升高(P<0.01);而在MCF-10A细胞株中,常氧组和缺氧组细胞的活性倍数比较差异无统计学意义(P>0.05)。在不加入CoCl2条件和加入CoCl2条件下,同等条件下与SGC7901细胞株比较,MKN28及MCF-10A细胞株的活性倍数均较低(P<0.05);与MKN28细胞株比较,MCF-10A细胞株的活性倍数�
- 周培华孙学军郑见宝王炜王孝珑陈南征魏光兵范渊李孝彬王训凯禄韶英
- 关键词：胃癌
