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周颖
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中南大学湘雅二医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
吴刘亦文
中南大学湘雅二医院
杨璞
中南大学湘雅二医院
黄志凌
中南大学湘雅二医院
肖波
中南大学湘雅医院
吴小妹
中南大学湘雅医院
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大鼠脑内突触后致密物蛋白质的提取及鉴定
被引量:1
2009年
目的提取纯度高、易分离溶解的突触后致密物(PSD)蛋白质。方法应用蔗糖密度梯度离心法,逐次获取P2,突触小体和PSD-1;应用Western blot检测PSD-1蛋白质的纯度;对PSD-1运用膜顺序提取法获取可溶性蛋白PSD-2;应用双向凝胶电泳技术分离PSD-1与PSD-2蛋白质点,PDQuest软件分析比较其数目差异。结果突触后标志分子PSD-95在P2成分、突触体和PSD-1 3组成分中均呈免疫染色阳性,而突触前标志分子突触素在PSD-1成分中呈免疫阴性。从PSD-1蛋白中电泳分离到286±25个蛋白质点而显著低于从PSD-2中分离到720±17个蛋白质点(P<0.01)。结论蔗糖密度梯度离心联合膜顺序提取法可获得纯度高、易分离溶解的PSD蛋白质。
周颖
黄志凌
肖波
吴小妹
吴刘亦文
杨璞
关键词:
双向凝胶电泳
颞叶癫痫相关突触后致密物蛋白质的蛋白质组学筛选研究
被引量:2
2008年
目的筛选颞叶癫痫(TLE)相关突触后致密物(PSD)蛋白分子。方法建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型;收集颞叶癫痫组(TLE组)、非颞叶癫痫组(非TLE组)以及正常对照组(Norm)3组的新鲜全脑组织,联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取PSD;进行双向凝胶电泳,并通过PDQuest图像分析软件比较分析,筛选TLE组特异性和差异性表达的蛋白质点;选取部分差异蛋白质点进行取MALDI—TOF—MS质谱鉴定;应用Western验证部分所鉴定蛋白质在PSD中的表达状况。结果与Norm和非TLE组比较,TLE组中存在40个差异表达蛋白质点,表达上调的主要有热休克蛋白27(HSP-27)、果糖二磷酸醛缩酶(FBA)、肌酸激酶(CK)、甲状腺受体相互作用蛋白6(TRIP6)、髓鞘碱性蛋白S(MBP)、LIM结构域(LIM);表达下调的主要有细胞骨架蛋白、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶(PPIase)、分选连接蛋白3(SNX3)、乌头酸水合酶(ACO)、甘油醛三磷酸脱氢酶(GAPDH)、琥珀酸辅酶A连接酶(SCOAL)。HSP27和微管蛋白仅、SNX3在TLE、非TLE和Norm3组PSD中均免疫染色阳性。结论TLE组PSD蛋白质差异性表达可能是脑损伤后可塑性反应的结果,但其表达量改变的程度可能与颞叶癫痫形成有关,可视为促/抗TLE形成的重要候选分子。
黄志凌
周颖
肖波
吴军
吴小妹
杨璞
吴刘亦文
关键词:
癫痫
颞叶
蛋白质组学
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