宋永继
- 作品数：15 被引量：30H指数：4
- 供职机构：解放军第302医院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金“首都临床特色应用研究”专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 两种不同方法检测HIV抗体结果的比较被引量：3
- 2012年
- 目的对化学发光和酶联免疫法（ELISA）检测HIV抗体的方法进行评价，比较检测结果的差异，为HIV初筛的方法的选择和临床应用提供参考。方法以HIV抗体确认实验结果为金标准，对3000例我院就诊的患者同时应用两种方法检测，对两结果进行比较，评价两种检测方法筛查HIV感染者的特异性、灵敏度。结果ELISA检测法阳性率为0．93％，特异性为99．93％，灵敏度为89．66％，化学发光法阳性率为1．03％，特异性为99．93％，敏灵度为100％。结论两种方法均适合HIV的初筛，都具有较高的特异性，化学发光法的灵敏度要优于ELISA方法。
- 郭静霞徐军陈霖刘佳赵静宋永继刘爱霞李伯安毛远丽
- 关键词：HIV酶联免疫吸附测定化学发光法
- 临床实验室仪器间比对实验探讨被引量：4
- 2013年
- 目的按照ISO15189要求对两台强生VITROS3600化学发光分析仪上的相同项目进行比对试验，以评估检测结果的一致性。方法分别使用两台仪器对anti—HCV的精密度，准确度进行验证试验，并对临床收集的Anti-HCV阴性10份、阳性10份和弱阳性20份血清样本共40份进行比对试验，检测结果行统计学分析。结果两台仪器阴性和阳性质控品批内精密度变异系数分别为5％、4％、7．14％和7．23％，批间精密度分别为9．47％、7．7％和8．04％、7．6％，均小于IS015189要求的CV（15％），两仪器准确度为100％，质控品检测结果差异无统计学意义（P〈0．05）。临床样本检测结果相关性分析R^2=0．9984，具有良好的一致性。结论两台强生VITROS3600化学发光分析仪检测结果，一致性良好，具有可比性。
- 刘佳陈霖郭静霞徐军赵静宋永继刘爱霞李伯安毛远丽
- 关键词：肝炎病毒化学发光临床实验室技术
- 化学发光酶免疫分析法定量检测人血清层粘连蛋白
- 2013年
- 目的建立检测人血清层粘连蛋白(LN)的化学发光酶免疫分析法(CEIA)。方法用3μg/mL抗人LN单抗包被微孔板制成固相抗体,辣根过氧化物酶标记抗人LN单抗浓度为1∶2 000,建立检测人血清LN浓度的CEIA法。评价该法的线性范围、灵敏度、稳定性等性能指标;并与ELISA法检测LN进行比对;初步检测100例健康献血员血清LN水平。结果该法线性范围为22～1 635 ng/mL,灵敏度为12.2 ng/mL,批内、批间变异系数均<10%,检测高、中、低值LN血清的回收率分别为100.9%、95.2%和105.0%;试剂在4℃和37℃条件下至少稳定7 d;健全性良好;与ELISA法检测LN结果差异无统计学意义(t=0.299,P>0.05);100例健康献血员LN水平为(44.9±16.3)ng/mL。结论成功建立定量检测LN的CEIA法,该法性能较好,可用于临床检测。
- 徐军刘佳郭静霞赵静陈霖宋永继刘爱霞戴亮李伯安
- 关键词：层粘连蛋白肝纤维化
- AMA-M2阳性的原发性胆汁性肝硬化患者免疫学特点分析被引量：2
- 2013年
- 目的分析抗线粒体M2亚型抗体阳性(AMA-M2)的原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者免疫学等实验室诊断特点,推进临床PBC的早期诊断和治疗。方法对400例AMA-M2阳性的PBC患者采用间接免疫荧光法检测血清ANA、AMA、SMA、LKM和PCA等5种自身抗体。采用免疫印迹法检测患者血清7种主要肝抗原:Sp100、PML、gp210、LKM-1、LC-1、SLA/LP和Ro-52。应用全自动生化分析仪检测患者ALP、γ-GT等生化指标,全自动血细胞分析仪和凝血分析仪检测患者WBC、RBC、HGB、PLT和PT等血液学指标。结果患者自身抗体检测:ANA荧光模型主要包括核膜型、多核点型、着丝点型和胞浆颗粒型,阳性率分别为70%、52%、43%、3%。荧光模型组合方式包括:多核点型+核膜型、着丝点型+核膜型、着丝点型、多核点型、胞浆颗粒型以及仅AMA阳性者,阳性率分别为42%、28%、15%、10%、3%、2%,荧光滴度均≥1∶320。SMA、PCA、LKM阳性率均低于5%。患者主要肝抗原为Ro-52、gp210、PML和Sp100,阳性率分别为53%、44%、43%、24%,荧光滴度≥1∶320,而LKM-1、LC-1、SLA/LP阳性率均低于5%。PML、Sp100及Sp100+PML与gp210的阳性一致率分别为29%、11%、7%。临床血液检测结果显示有41%的患者WBC和RBC降低,53%的患者HGB降低,38%的患者PLT降低,而有42%的患者PT延长。生化检测结果显示有96%和93%的患者ALP和γ-GT升高。结论 AMA-M2阳性的PBC患者具有高滴度、特征性自身抗体荧光模型及自身肝抗原,结合临床血液及生化检测结果将为临床诊断提供重要帮助。
- 王晗徐军刘佳郭静霞谢娜赵静陈霖宋永继杨丽华刘爱霞李伯安毛远丽
- 关键词：自身抗体免疫印迹法
- 临床实验室仪器间比对实验探讨
- 刘佳陈霖郭静霞徐军赵静宋永继刘爱霞李伯安毛远丽
- 文献传递
- 原核表达人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ及其单克隆抗体的制备
- 目的：制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ(TIMP-Ⅰ)融合蛋白的单克隆抗体.方法：用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠杆菌BL21,诱导表达后通过6×His...
- 侯俊张健刘爱霞宋永继李伯安
- 关键词：融合蛋白单克隆抗体
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测方法的建立被引量：1
- 2013年
- 目的建立人血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白（HBV-LP）的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法。方法辣根过氧化物酶标记HBV-LP单抗，优化各类反应液的工作浓度和各种反应条件，建立双抗体夹心的ELISA检测方法；同时评价所建立方法的灵敏度、特异性、稳定性等性能指标。结果所建立方法的灵敏度为5ng／ml，批内、批间变异均小于10％。在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察，线性相关系数均〉0．98，标准偏差〈10％。结论成功建立了血清中HBV—LP的检测方法，该方法性能能够满足临床检测的需求。
- 赵静马洪滨侯俊郭静霞徐军宋永继陈霖刘爱霞刘佳魏红山李伯安
- 关键词：酶联免疫吸附测定病毒包膜蛋白质类
- 微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测基质金属蛋白酶抑制剂-I的方法研究
- 2013年
- 目的建立定量检测人血清中金属蛋白酶抑制剂-I（TIMPI）的微孔板化学发光酶免疫分析方法。方法以辣根过氧化物酶标记TIMPI单抗，以过氧化氢（H2O2）一鲁米诺（1uminol）化学发光体系作为检测体系，采用双抗体夹心反应模式，优化筛选温育条件、抗体包被条件、酶标记物稀释度和发光反应时间等指标。同时进行了回收实验，热稳定性实验，并随机选取60例肝纤维化患者血清与进口试剂进行比对实验。结果所建立方法的线性范围为0．2—12rig／ml，相关系数0．996，检出限为0．12ng／ml，批内、批间变异均小于10％。检测TIMPI的临床高、中、低值血清回收率为分别为100．6％、96．5％和106．5％；在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察，线性相关系数均〉0．98，标准偏差〈6％；比对实验分析证明2种方法相关性具有统计学意义。结论成功建立定量TIMPI微孔板化学发光酶免疫分析方法，该方法具有较高的准确性、灵敏度及良好的重复性，并与进口试剂检测结果一致。
- 侯俊张健刘佳赵静郭静霞陈霖徐军刘爱霞宋永继李伯安魏红山
- 关键词：基质金属蛋白酶化学发光免疫酶技术肝硬化
- 高尔基体蛋白73原核表达系统的构建及单克隆抗体的制备被引量：4
- 2013年
- 目的克隆、表达高尔基体蛋白73（GP73），并制备单克隆抗体。方法用逆转录聚合酶链反应法从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增GP73编码序列，将产物与pQE31载体连接，转化人大肠埃希菌BL21，诱导表达后通过His标签进行纯化，用纯化后的蛋白免疫BALB／c小鼠，采用常规的细胞融合技术制备单克隆抗体，并对其进行鉴定。结果重组载体经序列分析与报道序列同源性100％，并获得了重组蛋白。筛选出5株能稳定分泌抗GP73的单克隆抗体杂交瘤细胞株，免疫球蛋白类型有2株为IgGl类。WesternBlot印迹显示这些单抗能特异结合GP73蛋白。结论成功构建了人高尔基体蛋白73原核表达体系，并获得了单克隆抗体。
- 郭静霞魏红山宋永继赵静刘爱霞刘佳陈霖徐军李伯安毛远丽
- 关键词：高尔基体肝肿瘤
- 人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核核表达系统的构建及单克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的 制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ （TIMP-Ⅰ）融合蛋白的单克隆抗体.方法 用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠埃希菌BL21,诱导表达后通过6×His标签进行纯化,用纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备单克隆抗体,并进行鉴定.结果 成功构建了TIMP-Ⅰ原核表达体系,并获得了重组蛋白.筛选出4株能稳定分泌抗TIMP-Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞株,免疫球蛋白类型有3株为IgGl类.Western Blot印迹显示这些单抗能特异结合TIMP-1蛋白.结论 成功构建了人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核表达体系,并获得了单克隆抗体.
- 侯俊张健郭静霞陈霖赵静刘佳徐军刘爱霞宋永继貌盼勇李伯安毛远丽
- 关键词：间质胶原酶
