康文玉
- 作品数：12 被引量：75H指数：4
- 供职机构：云南出入境检验检疫局更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 羊痘病毒P32蛋白编码基因的克隆及表达被引量：14
- 2006年
- 为获得山羊痘病毒膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列设计合成了1对特异性引物, 对CaPV P32基因进行了PCR扩增,产物大小约为969 bp;产物回收纯化后,将其克隆至pBAD／ Thio-TOPO载体中,转化TOP10大肠埃希氏菌感受态细胞,与已报道的多株CaPV P32基因序列的同源性高达99％;相应地,氨基酸序列同源性为98％。经测序筛选出阳性克隆,该重组菌株经 L-arabinose诱导,可稳定、高效地表达CaPV P32抗原。表达蛋白为融合蛋白,分子质量约 51．53 ku。
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- 关键词：山羊痘病毒克隆
- 羊痘病毒分子生物学的研究进展
- 羊痘病毒在分子生物学研究进展方面做一综述。羊痘病毒的基因组较大,山羊痘和绵羊痘的基因组非常相似,对其基因组及编码蛋白功能的深入研究,发现了病毒的感染、复制和与宿主细胞间的相互作用的机制,也有助于设计更有效的羊痘病毒疫苗。...
- 康文玉徐自忠花群义高洪周晓黎杨云庆董俊陈晓莹
- 羊痘病毒P32蛋白编码基因的克隆、测序及表达载体的构建
- 为获得羊痘病毒(Capripoxvirus,CaPV)膜蛋白重组P32抗原,根据其基冈序列(DNA)设计合成了1对特异性引物,对CaPV P32基因进行PCR扩增,产物大小约为969bp,同收纯化后,将其克隆至pBAD/...
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- 关键词：羊痘病毒P32基因
- 羊痘病毒P32蛋白编码基因的克隆、测序及表达载体的构建
- 为获得羊痘病毒(Capripoxvirus,CaPV)膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列(DNA)设计合成了1对特异性引物,对CaPVP32基因进行PCR扩增,产物大小约为969bp,回收纯化后,将其克隆至pBAD/T...
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- 关键词：羊痘病毒P32基因
- 文献传递
- 羊痘病毒P32基因的克隆、表达及快速检测方法的研究
- 康文玉
- 关键词：山羊痘病毒克隆荧光定量PCR
- 羊痘病毒P32蛋白编码基因的克隆、测序及表达载体的构建
- 为获得羊痘病毒(Capripoxvirus,CaPV)膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列(DNA)设计合成了1对特异性引物,对CaPVP32基因进行PCR扩增,产物大小约为969bp,回收纯化后,将其克隆至pBAD/T...
- 康文玉徐自忠花群义高洪杨云庆周晓黎董俊尹尚莲
- 关键词：羊痘病毒P32基因基因表达基因克隆基因序列
- 羊痘病毒分子生物学的研究进展
- 羊痘病毒在分子生物学研究进展方面做一综述.羊痘病毒的基因组较大,山羊痘和绵羊痘的基因组非常相似,对其基囚组及编码蛋白功能的深入研究,发现了病毒的感染、复制和与宿主细胞间的相互作用的机制,也有助于设计更有效的羊痘病毒疫苗....
- 康文玉徐自忠花群义高洪周晓黎杨云庆董俊陈晓莹
- 关键词：羊痘病毒分子生物学基因组编码蛋白基因工程疫苗
- 羊痘病毒被引量：26
- 2004年
- 羊痘病毒能引起山羊痘、绵羊痘和牛的结节性疹块病。作者着重综述山羊痘和绵羊痘。羊痘病毒的基因组较大 ,山羊痘病毒和绵羊痘病毒的基因组非常相似 ,但自然条件下一般不会发生交叉感染。临床症状主要以发热和全身性丘疹或结节为特征 ,结合其临床症状实验室用透射电子显微镜检测病毒粒子的典型形态即可做出快速诊断。病毒培养和分离虽有较高的特异性 ,但耗时长 ;因羊痘病毒和副痘病毒有相似的血清型 ,一些血清学的诊断方法如琼脂扩散试验 (AGID)、间接免疫荧光试验、检测抗体的 EL ISA等 ,因会出现抗体交叉反应而无法区分这 2种病毒的感染 ;又因羊痘感染后主要引起细胞介导免疫 ,动物接触病原后仅产生低水平的中和抗体 ,故而病毒中和试验敏感性也不高。近年来 ,用于 EL ISA检测抗原的方法已经建立 ,具有较高的特异性 ;Western印迹试验利用羊痘病毒的 P32抗原与待检血清反应 ,具有较好的敏感性和特异性 ,但价格昂贵、操作难。PCR可用来检查活体或组织培养品中羊痘病毒基因组 ;在此基础上发展了多重 PCR技术 ,不但敏感性和特异性更强 ,且大量节省了时间和精力。治疗羊痘病毒无特效药 ,做好疫苗接种等防制措施很关键 ;目前采用活疫苗和灭活疫苗来控制本病 。
- 康文玉徐自忠高洪花群义周晓黎杨云庆董俊
- 关键词：羊痘病毒山羊痘绵羊痘PCR检测载体疫苗
- 羊痘诊断和预防的研究进展被引量：4
- 2007年
- 羊痘又名羊“天花”,是所有动物痘病最为严重的一种,严重影响国际贸易和养羊业的发展。本文主要从羊痘的诊断和预防疫苗方面做一综述。现在已有了一组针对羊痘的简单而高效检测方法和诊断试剂用于实验室诊断,但各有千秋。目前控制该病最有效的方法还是使用高效疫苗对易感动物进行免疫接种。利用羊痘病毒基因组做载体构建重组疫苗来同时预防小反刍兽的其他疾病,具有很大的潜力。
- 徐维加康文玉徐自忠
- 关键词：羊痘病毒山羊痘绵羊痘疫苗
- 羊痘病毒实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立被引量：26
- 2006年
- 参照羊痘病毒(CaPV)P32的基因序列,设计合成了2套引物和1条探针,建立了实时荧光定量PCR技术,对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果显示,用300 nmol／L引物浓度和200 nmol／L探针浓度,获得的Cr值较小,而△Rn最大;可检测到相当于0．1 TCID50的病毒DNA;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0．999 5以上;组内和组间试验重复性的变异系数分别为2．3％和3．4％;与常规的PCR相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,可同时检测大量样品等优点。表明。荧光TaqMan PCR是一种检测CaPV的良好方法,可对组织病料中低含量的CaPV或持续带毒宿主进行准确检测。
- 康文玉徐自忠花群义杨云庆周晓黎董俊尹尚莲高洪
- 关键词：羊痘病毒PCR
