张学贤
- 作品数:12 被引量:44H指数:4
- 供职机构:华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国际科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 紫云英根瘤菌与豌豆根瘤菌共生质粒间的相互作用被引量:4
- 1992年
- 将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI功能的表达。同时pJB5JI的导入使7653R接合子在其正常宿主紫云英上的结瘤固氮能力较亲本7653R显著提高。试验同时考察了pJB5JI导入紫云英根瘤菌后的稳定性。
- 张学贤周俊初张忠明李阜棣陈华癸
- 关键词:紫云英根瘤菌豌豆
- 紫云英根瘤菌结瘤因子的生物学功能被引量:2
- 1996年
- 利用紫云英(AstragalussinicusL.)种子浸提物诱导紫云英根瘤菌(Rhizobiumhuakuii)野生型菌株7653R产生结瘤因子(NodRh)。根毛卷曲试验表明,NodRh能诱导产生各种形式的根毛变形、卷曲和分枝,并且能诱导形成典型的“牧羊拐”状卷曲,与菌体正常侵染所引起的变化相同。同时发现,相对较高浓度的结瘤因子NodRh能抑制根的生长,形成粗短根。在制备紫云英根瘤菌接种剂的过程中,利用种子浸提物诱导产生结瘤因子,能显著提高根瘤菌的侵染结瘤能力。
- 张学贤张忠明周俊初李阜棣
- 关键词:紫云英根瘤菌结瘤因子寡糖素生物学功能
- 外源共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌(Rhizobium huakuii)中的稳定性被引量:4
- 1994年
- 将碗豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌7653R及其消除了共生质粒的突变株7653R+1。两种类型转移接合子在人工合成培养基上繁殖时,pJB5JI能稳定存在,但从它们在碗豆或紫云英上所结根瘤的分离物中,只有部分检测到pJB5JI。以转座子Tn5及首蓿根瘤菌nod基因为探针,对未检测到pJB5JI质粒的根瘤分离物7653RA9及7653R+1Pa,进行DNA同源性分析,结果表明pJB5JI质粒并没有全部丢失,很可能全部或部分整合到了受体紫云英根瘤菌的染色体中。
- 张学贤周俊初李阜棣
- 关键词:紫云英根瘤菌稳定性
- 紫云英根瘤菌分子遗传学研究进展被引量:9
- 2003年
- 总结了紫云英根瘤菌分子遗传学研究进展。这类根瘤菌的寄主范围较窄 ,早先根据互接种族概念将其定名为Rhizobiumastragali,后来定名为Rhizobiumhuakuii,最近并入Mesorhizobium属。对大量菌株进行的 16S和2 3SrDNAPCR RFLP分析和代表菌株的部分 16SrDNA碱基测序 ,揭示了 7个不同基因型 ,表明这类菌具有遗传多样性 ,可以认为存在不同的种。它们都有质粒 ,数量 1~ 5个 ,因菌株而异 ,可分为不同质粒型 ,共生基因常定位在最大的一个质粒上 ,即共生质粒。它们的结瘤基因具有独特结构。采用包括nodA ,nodB ,nodC ,nodD的苜蓿根瘤菌突变株进行基因互补 ,从紫云英根瘤菌基因文库中获得了相应的转移接合子。这类根瘤菌的nodA与nodBC分隔约 2 2kb距离 ,不同于多数根瘤菌nodABC为一个操纵元的结构。紫云英根瘤菌结瘤基因的这种结构在 7个基因型的菌株中都是一致的 ,说明结瘤基因的保守性。
- 张学贤李阜棣曹燕珍陈华癸
- 关键词:紫云英根瘤菌分子遗传学
- 快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)3.7Kb增效片段的亚克被引量:1
- 1996年
- 利用柯氏质粒pLAFR1为载体构建了快生型大豆根瘤菌B52菌株的基因文库,并通过植物结瘤试验筛选到一个3.7Kb增效片段,将其导入慢生型大豆根瘤菌2210,能提高其共生固氮效率。所得高效菌株HN32在黑龙江、四川和广西大面积应用,平均增产11.4%(5)。本文测定了3.7Kb片段的核苷酸序列,计算机分析发现含有两个开放阅读框架(ORFs)。ORF1编码含190个氨基酸的多肽,与已报道基因和多肽的同源性很低,但其N端19个氨基酸与发根农杆菌的乳糖转移酶高度同源。ORF2编码含235个氨基酸的多肽,与碗豆根瘤菌的hupE及苜蓿根瘤菌的糖基转移酶基因显示54%的同源性。
- 张学贤马立新周俊初陈华癸
- 关键词:大豆根瘤菌亚克隆
- 根瘤菌与豆科植物之间的“分子对话”被引量:9
- 1995年
- 根瘤菌是一类格兰氏阴性好气的异养型土壤细菌,它们能侵染豆科植物形成一种特殊的结构—根瘤,将大气中的氮气转化为植物可以直接利用的氨,即共生固氮作用。其在农业上的潜在应用价值推动了全世界范周内的科学家进行了一个多世纪的持续研究。目前,根瘤菌与豆种植物共生固氮体系是所有微生物与植物相互作用中了解得最为清楚的一个系统。 宿主专一性(host specificity)是这一共生固氦体系的一个非常重要的特征,即每一种根瘤菌(或菌株)都有一定的宿主范围,只能在一定数量的豆科植物上结瘤。研究表明,在共生体系形成的过程中,
- 张学贤农广张忠明
- 关键词:根瘤菌结瘤因子豆科植物慢生型大豆根瘤菌苜蓿根瘤菌宿主范围
- 紫云英根瘤分离菌株质粒多样性的研究被引量:3
- 1999年
- 从广东、广西、湖南、湖北、江西、浙江、江苏7省紫云英(AstragalussinicusL.)主要分布区46个采集点的紫云英根瘤中分离到101个菌株.检测发现有16种不同质粒类型,所含质粒1~4个不等,含两个质粒的菌株占绝大部分,质粒Mr为36×106~364×106.用克隆M.huakui7653R的nodDBC4.2kb片段为探针(α32pdCTP)进行的分子杂交结果表明,所有这些菌株均含有共生质粒,通常为第一大质粒,但C、L、M、N和O型为第二大质粒,共生质粒Mr在131×106~364×106之间.比较质粒类型与16S23SrDNAIGS(pHr,p23SR01)PCRRFLP分析结果表明,IGS类型不同,即使在同一植株分离所得的根瘤其质粒类型常不同,但在同一植株上分离菌株的质粒类型相同,则其IGS常表现相同.
- 郭先武张学贤张忠明王平曹燕珍李阜棣
- 关键词:多样性共生固氮
- 异源根瘤菌共生基因间的相互作用
- 张学贤
- 高固氮基因工程大豆根瘤菌的研制及其增氮效应被引量:7
- 1996年
- 通过构建快生型大豆根瘤菌B52的基因文库和三亲本杂交,将增效因子DNA片段导入优良的慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得携带来自快生菌增效因子DNA片段的工程菌株HN32,经盆栽和小区试验,证明基因工程菌株HN32比出发菌株22-10平均增产6%,比对照平均增产13.2%~16.9%,相当于每公顷施75~150kg尿素.1992~1995年,在广西推广应用基因工程大豆根瘤菌HN322.16万hm2,每公顷平均增产19%,投入产出比1:30。增加经济效益1409.8万元。
- 刘涛周俊初柏学亮沈辉张学贤马庆生
- 关键词:基因文库基因工程大豆根瘤菌
- R-prime质粒pMN53在不同根瘤菌中的稳定性被引量:3
- 1994年
- pMN53是以pMN2为载体克隆有菜豆根瘤菌(Rhizobiumlegumilosarumbv.phaseoli)共生基因的R-prime质粒,将pMN53接合转移到快生型大豆根瘤菌(Rhizobiumfredii)B52,慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobiumjaponicum)2210以及紫云英根瘤菌(Rhizobiumhuakuii)7653R后,分别考察了pMN53在3种转移接合子中的稳定性。结果表明由pMN53携带的卡那霉素抗性(Kmr)在3种供试菌株中都能稳定传代,但电泳分析都只能检测到载体质粒pMN2,载体上所携带的外源基因脱落。用Tn5为探针进行的斑点杂交,结果证明转移接合子2210P仍带有转座子Tn5。
- 张学贤周俊初莫才清李阜棣
- 关键词:根瘤菌质粒稳定性