张宇宏
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
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- 昆虫乙酰胆碱酯酶基因的结构与功能
- 昆虫AChE是有机磷杀虫剂和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标,AChE基因突变可导致AChE对杀虫剂不敏感而使昆虫产生抗药性。黑腹果蝇和家蝇等昆虫只有一个AChE基因,但冈比亚按蚊等昆虫AChE基因有两个或多个拷贝。基于此，...
- 林同李奕震张宇宏常润磊
- 关键词：基因点突变
- 文献传递
- 棉卷叶野螟泛素基因的克隆、序列分析及原核表达被引量：5
- 2008年
- 本研究用RT-PCR方法,克隆了棉卷叶野螟Haritalodes derogata(Fabricius)泛素基因编码区,GenBank登录号为 EU580145。序列分析表明,该编码区长228 bp,编码76个氨基酸,推测的编码蛋白的相对分子质量和等电点分别为 8.53 kD和5.83。同源性比较发现,棉卷叶野螟泛素基因与其他10种昆虫泛素基因在氨基酸水平上具有93 %以上的相似性。系统发育树显示棉卷叶野螟与斜纹夜蛾Spodopteralitura(Fabricius)遗传距离较近,通过同源建模获得了该棉卷叶野螟基因编码蛋白的理论三维结构。将棉卷叶野螟泛素基因与pET-32a(+)连接,构建原核表达载体 pET-32a-ub,经IPTG诱导,棉卷叶野螟泛素基因在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。本研究成功克隆了棉卷叶野螟泛素基因的编码区,并经Western blotting分析证明实现了该基因的原核表达,为进一步研究其在该昆虫体内的作用机理奠定了基础。
- 张宇宏林同张琪常润磊温秀军
- 关键词：泛素基因克隆基因序列分析原核表达
- 松褐天牛、棉卷叶野螟泛素基因的克隆与表达
- 松褐天牛属于鞘翅目天牛科，不仅为害松树，且是传播松材线虫病的病原。棉卷叶野螟属鳞翅目螟蛾科，是20世纪80年代后危害木槿的主要害虫。泛素(Ub)在真核细胞中具有重要的功能意义，泛素参与的泛素—蛋白酶水解途径是真核细胞中蛋...
- 张宇宏
- 关键词：松褐天牛基因克隆聚合酶链式反应泛素基因
- 橄榄星室木虱18S rRNA基因片段的克隆与序列分析
- 参照已知昆虫18S rRNA基因序列设计PCR引物,用RT-PCR方法克隆出了橄榄星室木虱18S rRNA基因cDNA片段,基因测序结果表明,该片段包含70个碱基对(bp),在23~49bp区间与其他16种昆虫的18Sr...
- 李立娜林同张宇宏常润磊
- 关键词：橄榄星室木虱基因克隆
- 文献传递
- 同安钮夜蛾核型多角体病毒pst I-G片段克隆及序列分析
- 2009年
- 【目的】测定同安钮夜蛾核型多角体病毒(OpdiNPV)pst I-G片断的序列,了解OpdiNPV的遗传结构和与其它昆虫病毒的进化关系。【方法】用pstⅠ酶切病毒基因组,电泳分离并回收pst I-G片段,连接到PUC18,转化入E.coli DH 5α,挑取阳性菌落测序。【结果】该片段长度为5056bp,有4个ORF,分别编码ODV-E66的C末端(EU 623602),P87/VP80的C末端(EU 732665),ODV-Ec43(EU 617337)和Ac108(EU 732666)。ac108基因和odv-ec43起始密码子上游都有1个晚期启动子结构域TAAG,odv-ec43基因起始密码子上游有2个早期转录起始元件CAGT;由odv-ec43推导的蛋白有2个跨膜螺旋、3个N-糖基化位点、1个N端酰基化位点、7个PKC磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个CKⅡ磷酸化位点;p87/vp80基因终止密码子下游有polyA信号。【结论】氨基酸序列同源分析和相似性分析显示Ac108、ODV-E66和P87/VP80与其它昆虫病毒差异较大,ODV-Ec43的保守性较高。
- 常润磊林同张宇宏张琪温秀军
- 橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2007年
- 利用RT-PCR法和PCR法克隆到橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因(Ace)的2个片段,其中cDNA片段长66bp,翻译获得的氨基酸1～11位与家蝇等13种昆虫相应的序列相同或仅相差1个氨基酸,该序列在GenBank数据库中的接受号为DQ417582;基因组DNA片段长499bp,2个外显子连在一起与意大利蜜蜂等13种昆虫相应基因的氨基酸同源性均高于88%,该序列在GenBank数据库中的接受号为DQ425028。此结果为进一步研究橄榄星室木虱对杀虫剂抗性的分子机理奠定了基础。
- 林同李立娜常润磊张宇宏
- 关键词：橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因基因克隆
- 松褐天牛泛素基因的克隆及表达被引量：4
- 2009年
- 设计一对简并引物,应用RT-PCR技术,从松褐天牛细胞中克隆泛素基因的编码区,GenBank登录号EU433567。序列分析表明:该编码区的长度为228bp,编码76个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为8.49ku,理论等电点为5.83。同源性比较发现,松褐天牛泛素基因与其他10种昆虫泛素基因在氨基酸水平上具有94%～98%的相似性。基于核苷酸水平上的系统发育树显示松褐天牛与斜纹夜蛾、草地贪夜蛾遗传距离较近;通过同源建模获得了松褐天牛泛素基因编码蛋白的理论三维结构。将泛素基因与pET-32a(+)连接,构建原核表达载体pET-32a-ub,经IPTG诱导,松褐天牛泛素基因在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并经Westernblotting分析验证该表达,为研究泛素在松褐天牛体内的功能奠定基础。
- 林同张宇宏常润磊张琪温秀军
- 关键词：松褐天牛泛素基因克隆原核表达
