张小荣
- 作品数：145 被引量：700H指数：14
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 无抗性表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌构建被引量：3
- 2005年
- 利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550。经过质粒酶切分析和表达产物的SDSPAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目的蛋白仍与谷胱甘肽转移酶相融合,得到有效表达,重组融合蛋白的分子质量约为80ku。经体外连续传代试验,重组菌X4550(pFSFaeG)均能在无抗生素压力下大量扩增并稳定传代,质粒稳定性和蛋白表达稳定性良好。无抗性重组菌的成功构建解决了基因工程疫苗抗性基因潜在危险问题,并有望通过沙门氏菌载体的递送作用,为研制口服疫苗奠定了基础。
- 杨健美张小荣高崧韦栋平刘秀梵
- 关键词：基因敲除蛋白表达
- 一株超强马立克病病毒的分离鉴定与致病性试验被引量：4
- 2020年
- 从接种过马立克病CVI988/Rispens疫苗仍发生肿瘤性疾病的鸡群中分离到1株马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV),经琼脂扩散试验、病毒分离、间接免疫荧光试验、PCR鉴定和致病性试验鉴定为血清Ⅰ型MDV,命名为MDV JS201801株。该毒株基因组含2个拷贝的132 bp重复序列;meq基因的第115、139、176和217位氨基酸发生突变,与MDV强毒株的特性相符。与MDV参考毒株进行meq基因序列比对分析,发现MDV JS201801株与超强毒株ZC2014和GX0101的同源性高达99.7%。用MDV JS201801株对SPF鸡进行攻毒试验,肿瘤发生率为85%;而接种过CVI988/Rispens疫苗的SPF鸡在MDV JS201801株攻毒后的肿瘤发生率为20%。研究证明,MDV JS201801株为MDV超强毒株,并且CVI988/Rispens疫苗对该毒株不能提供足够的免疫保护。
- 白雪雁张小荣张成成郭梦娇李梦娇钱炳旭吴艳涛
- 关键词：马立克病病毒致病相关基因动物试验
- 鸡传染性支气管炎的防控技术
- ＜正＞～～
- 张小荣
- 检测鸭呼肠孤病毒抗体间接ELISA方法的建立被引量：5
- 2014年
- RT-PCR扩增鸭呼肠孤病毒(Duck reovirus,DRV)的σB基因,克隆到pET-32a(+)表达载体,再转化大肠杆菌Transetta(DE3);含有重组质粒pET-σB的大肠杆菌经IPTG诱导,获得大小为55 000的以包涵体形式表达的σB重组蛋白。Western blotting显示,σB重组蛋白能够与兔抗DRV多抗血清特异性结合。以高亲和NI-NTA树脂在变性条件下纯化、梯度尿素复性的σB重组蛋白为包被抗原,建立了检测DRV抗体的间接ELSIA方法。分别以间接ELSIA方法和血清中和试验对DRV感染鸭血清和SPF鸭血清进行检测,两者的符合率为100%。该间接ELSIA方法对鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒和禽流感病毒阳性血清均无交叉反应。
- 孙陈莉杨瑞王义敏赵娜张小荣彭大新吴艳涛
- 关键词：原核表达间接ELISA
- 猪肺炎支原体特异性蛋白P36基因的克隆与表达
- 本试验试图通过对P36蛋白基因的克隆、表达,为进一步探讨其在临床诊断方面的应用价值和在致病过程中的作用奠定基础.
- 胡茂志焦新安张小荣潘志明黄金林殷月兰张晓明邵国青刘文博刘秀梵
- 关键词：猪肺炎支原体基因克隆基因表达
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒CK/CH/JS/06Ⅱ株全基因组序列测定分析
- 引言 传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染性疾病,目前该病已成为养禽业中...
- 马莲代珊余丽萍季文彬韦洪晨张林张小荣吴艳涛
- 1株含H9N2内部基因的H5N1亚型基因重配禽流感病毒的全基因测序及遗传进化分析被引量：6
- 2010年
- 在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况的流行病学监测过程中,从表观健康家鸭体内分离到一株H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/009/2008(简称Dk/SD/009/08)。为了解该毒株的基因组构成,对该分离株进行全基因测序。测序结果显示:该毒株HA裂解位点处的氨基酸序列为PLRERRRK-R/GL,符合高致病性禽流感病毒的分子特征,且参照H5N1国际统一命名准则,Dk/SD/009/08的HA基因属于2.3.4进化支。BLAST结果显示,HA、NA、NP及NS基因均与H5N1亚型病毒的核苷酸一致性最高,而RNA聚合酶基因(PB2、PB1、PA)及M基因则与H9N2亚型病毒的亲缘关系最近,故推测该分离株可能是一株天然重组病毒;遗传进化分析进一步表明,流行于华南地区鹌鹑中的G1-like H9N2亚型病毒可能为该分离株提供部分的内部基因。
- 顾敏刘文博曹军平曹永忠张小荣彭大新刘秀梵
- 关键词：H5N1H9N2禽流感病毒
- 表达H9亚型禽流感病毒血凝素的重组HVT活疫苗免疫效力评价
- 2018年
- 为在SPF鸡和商品蛋鸡上评价一株表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素基因的重组HVT(r HVT-H9)活疫苗的免疫保护效力,试验将1日龄SPF鸡分为r HVT-H9疫苗组、灭活疫苗组和空白对照组,共3组(n=60,每组20只);1日龄商品蛋鸡除上述三组外另增加r HVT-H9疫苗与禽流感灭活疫苗(H9亚型,F株)联合免疫组,共4组(n=80,每组20只)。免疫后,通过血凝抑制试验检测血清中针对H9亚型AIV的抗体效价;并于免疫后28 d,将全部试验组及空白对照组以H9亚型AIV F株进行静脉注射攻毒。攻毒后第3、5天分别采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况;并于攻毒后第10天将全部试验鸡进行剖检。结果显示:SPF鸡r HVT-H9疫苗组能达到100%免疫保护,而灭活疫苗组仅能达到80%保护;商品蛋鸡r HVT-H9疫苗组保护率为40%,灭活疫苗组保护率为70%,但联合免疫组能达到100%的免疫保护。因此,该重组病毒r HVT-H9疫苗可作为H9亚型禽流感的有效疫苗候选株,与现有商品化禽流感H9亚型灭活疫苗联合使用,效果更佳,为其防控提供一定的技术支持。
- 楚电峰张小荣张小荣蒋叶林侯玉超蒋叶林范根成杜元钊吴艳涛
- 关键词：H9亚型禽流感血凝素疫苗免疫效力
- H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立
- 选择一株鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成其全基因组序列测定基础上,设计合成11对引物,分11段扩增病毒的8个基因。通过与线性化的转录载体PHW20...
- 龙进学吴艳涛张小荣王曲直刘秀梵
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒病毒拯救重组病毒
- 利用反向遗传操作技术产生ZJI株鹅源新城疫病毒被引量：17
- 2005年
- 利用反向遗传操作技术,将ZJI株鹅源新城疫病毒全基因组cNDA克隆(NDV3GM122)和含该毒株NP、P及L基因的3个表达载体(pCI-NP、pCI-P与pCI-L)共转染BSR-T7/5细胞;同时,将NDV3GM122与含新城疫病毒La Sota毒株NP、P及L基因的3个表达载体(pCIneoNP、pCIneoP与pCIneoL)进行共转染。通过间接免疫荧光实验(Indiectimmunofluorescence assay,IFA)以及接种鸡胚后进行血凝(Hemagglutinin,HA)与血凝抑制(Hemagglutinininhibition,HI)试验、RT-PCR扩增和电镜观察,结果均证实全基因组cDNA克隆NDV3GM122与La Sota毒株表达载体共转染组产生了有血凝性的鹅源新城疫病毒,而NDV3GM122与ZJI株表达载体共转染组暂未检测到有血凝性的病毒。ZJI株鹅源新城疫病毒的拯救成功为对该病毒进行功能基因组研究和疫苗的研制等后续工作打下了基础。
- 刘玉良张艳梅胡顺林吴艳涛刘秀梵龙进学石火英张小荣张如宽
- 关键词：反向遗传操作技术鹅源新城疫病毒病毒拯救
