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高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化被引量：3: 2008年; 通过添加增效剂、正交试验设计优化PCR反应体系、联合采用多种PCR程序等措施,建立并优化了PCR扩增体系,成功地从高GC青枯菌基因组中扩增出了长度为2 434 bp且GC含量高达70.9%的aac基因。PCR反应体系为20μL包括5%DMSO2、.5 mmol/L MgCl2、500μmol/L dNTP、10 pmol/L引物1、.25 UTaq酶、50 ng模板DNA。首先采用热启动PCR:95℃5 min,保持80℃,加入Taq酶;然后采用二步PCR:5个循环包括变性95℃1 min,65℃1 min;最后采用降落PCR:30个循环为95℃1 min,78℃1 min,每个循环降低0.5℃,72℃3 min;补充10个循环为95℃1 min,63℃1 min,72℃3 min;72℃10 min。该试验体系的建立与优化为研究高GC含量生物的基因功能提供了方法。; 张争张杨徐进许景升何礼远冯洁; 关键词：PCR 正交试验

退火温度对牛筋草ISSR-PCR反应体系的影响: 退火温度是PCR反应过程的一个重要的组成部分.本文以牛筋草地上组织DNA为模板,选取适合牛筋草的6个ISSR引物,分别对其退火温度进行温度梯度试验.结果表明,同一引物,对于不同的物种,退火温度不同;同一物种不同引物之间退...; 张杨张朝贤黄红娟王金信魏守辉张少逸陈景超; 关键词：牛筋草聚合酶链式反应退火温度分子标记; 文献传递

青枯菌Ⅱ型分泌系统Gsp蛋白互作分析: ＜正＞细菌通过设计精巧的蛋白传输系统,泌出毒性因子和效应子,与寄主进行分子交流。其中,II型分泌系统广泛存在于革兰氏阴性细菌中。II型分泌系统主要以分泌途径转膜蛋白（GsP）基因簇为中心。植物细菌性青枯病是我国和世界范...; 张杨张争徐进冯洁; 文献传递

用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法: 本发明用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法，适用于检测梨火疫病菌。属于农作物病害防治和植物检疫技术领域。该方法根据梨火疫病菌的pEA29质粒和基因组ams基因序列，设计二对特异性引物，在同一反应体系中同时检测梨火疫病菌...; 冯洁许景升徐进何礼远张争张杨; 文献传递

退火温度对牛筋草ISSR-PCR反应体系的影响: 退火温度是PCR反应过程的一个重要的组成部分。本文以牛筋草地上组织DNA为模板,选取适合牛筋草的6个ISSR引物,分别对其退火温度进行温度梯度试验。结果表明,同一引物,对于不同的物种,退火温度不同;同一物种不同引物之间退...; 张杨张朝贤黄红娟王金信魏守辉张少逸陈景超; 关键词：牛筋草 ISSR 退火温度; 文献传递

用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法: 本发明用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法，适用于检测梨火疫病菌。属于农作物病害防治和植物检疫技术领域。该方法根据梨火疫病菌的pEA29质粒和基因组ams基因序列，设计二对特异性引物，在同一反应体系中同时检测梨火疫病菌...; 冯洁许景升徐进何礼远张争张杨; 文献传递

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张杨