徐文芹
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金德国洪堡基金更多>>
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- Toll样受体4对氧诱导视网膜新生血管发生的促进作用及其机制被引量：3
- 2016年
- 背景研究发现，Toll样受体（TLRs）在视网膜新生血管的形成中发挥重要作用，但其作用机制尚不清楚。目的探讨TLR4对小鼠氧诱导视网膜病变（OIR）中新生血管生成的作用及其机制。方法将18只7日龄新生C57BL／6J小鼠以随机数字表法按小鼠窝别分为常氧组、OIR组及0IR＋脂多糖（LPS）-EB组，常氧组小鼠在正常氧环境中饲养，OIR组及OIR＋LPS—EB组小鼠于生后第7天（P7）与母鼠置于体积分数（75±2）％高氧氧箱中饲养5d以诱导OIR模型，于P12在正常氧环境中饲养，OIR＋LPS-EB组P12小鼠腹腔内注射LPS-EB，剂量为1mg／kg，OIR组同法注射PBS。各组摘取P17小鼠眼球于质量分数4％多聚甲醛中固定并行视网膜铺片和Lectin染色，计算视网膜无血管区和新生血管区面积占全视网膜的百分比。各组制备P17小鼠眼后节组织冰冻切片并行免疫荧光检测，计数小鼠5mm视网膜全长活化小胶质细胞数目；采用CDllb和TLR4免疫荧光双标记法检测各组小鼠视网膜小胶质细胞中CDllb、TLR4的表达及其分泌血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素1p（IL-1β）和肿瘤坏死因子-a（TNF-a）的水平。结果常氧组P17小鼠视网膜血管分布和形态正常，OIR组和OIR＋LPS—EB组P17小鼠视网膜中央均出现无血管区和新生血管簇，OIR＋LPS-EB组小鼠视网膜无血管区面积比为（18．47±1．32）％，新生血管面积比为（3．29±0．85）％，分别大于OIR组的（15．78±1．44）％和（1．77±0．19）％，差异均有统计学意义（t=3．36，P=0．01；t=4．22，P=0．00）。免疫荧光结果显示，常氧组P17小鼠视网膜中活化小胶质细胞数量极少，OIR组和OIR＋LPS—EB组P17小鼠视网膜中活化小胶质细胞荧光强度增强，活化小胶质细胞数量增加，其中OIR＋LPS-EB组小鼠视网膜中小胶质细胞数明显多于OIR组，差异有统计学意义[（95．50±4．77）／5mm与（74．83±4．
- 徐文芹尹婕王雨生
- 关键词：TOLL样受体4视网膜新生血管
- 脂多糖诱导炎症对大鼠氧诱导视网膜病变的影响被引量：3
- 2015年
- 目的观察不同剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导炎症对大鼠氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)的影响,以探讨炎症在早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)中的作用。方法将新生SD大鼠随机分组,实验组依据LPS注射剂量的不同分为LPS-50、LPS-100和LPS-500组,并分别设立正常对照组(N组)和氧诱导对照组(OIR组)。N组幼鼠喂养于空气中,实验组和OIR组幼鼠饲养于氧气体积分数为80%/21%(24 h交替一次)的氧箱中至出生后14 d(P14),随后移至空气中继续饲养。实验组幼鼠行OIR处理过程中,于P7行LPS腹腔注射,LPS-50、LPS-100和LPS-500组注射剂量分别为50μg·kg-1、100μg·kg-1和500μg·kg-1。检测各组幼鼠在P7(注射前)、P8、P11和P14等不同时间点的体质量变化;并分别于P14和P18制作全视网膜铺片,通过GS-isolectin B4染色观察各组视网膜血管化及病理性新生血管情况。结果在各检测时间点,各实验组和OIR组幼鼠的体质量均低于N组(P<0.05)。P7时,各实验组和OIR组体质量无差别(P>0.05);至P8、P11和P14时,LPS-500组幼鼠体质量明显低于OIR组和其他实验组(P<0.05)。P14时,N组幼鼠的浅层视网膜血管已覆盖整个视网膜;而OIR组和实验组幼鼠的视网膜均存在无血管区,且LPS-500组无血管区面积最大(27.32%±3.58%,P<0.01)。P18时,N组视网膜血管网层次结构清晰;OIR组和实验组幼鼠的视网膜均出现病理性新生血管,且LPS-500组新生血管累及视网膜的范围最广(累及钟点数为6.83±1.72,P<0.01)。结论 LPS诱导炎症可加重大鼠OIR,且在一定范围内呈剂量依赖性,提示炎症可能参与ROP病理过程。
- 李晓琴张自峰王雨生高翔杨湘敏徐文芹
- 关键词：炎症氧诱导视网膜病变视网膜新生血管早产儿视网膜病变
- 米诺环素促进bal/bc小鼠氧诱导视网膜病变新生血管的生成
- 目的 观察米诺环素在bal/bc 小鼠氧诱导视网膜病变模型中对血管发育的影响。方法 新生bal/bc 小鼠随机分为2 组,即 OIR 对照组和OIR+米诺环素P12～P17 天注射组。将小鼠于生后第7天(P7)至P12 ...
- 徐文芹王雨生
- 关键词：米诺环素氧诱导视网膜病变新生血管小胶质细胞小鼠
- IGF-1/IGFBP-3在早产儿视网膜病变中的作用及其应用被引量：5
- 2014年
- 早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)是一种发生于早产、低体质量儿的视网膜血管增生性病变,具体机制尚不明确,目前认为早产、低出生体质量、吸氧、感染和营养不良等诸多因素可能是ROP发生的诱因。近年的研究发现,与生长发育及营养状况相关的胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)与ROP的发生相关。基于新生儿出生后体质量和血浆IGF-1水平变化预测ROP的筛查模式,即WINROP已在多个国家进行了多中心临床试验,可以有效提高ROP的筛查效率,提高新生儿血浆IGF-1/IGFBP-3浓度水平,有望在ROP预防方面发挥作用。
- 徐文芹王雨生
- 关键词：胰岛素样生长因子-1胰岛素样生长因子结合蛋白-3早产儿视网膜病变
- 视网膜小胶质细胞中Toll样受体在炎症性和缺血性视网膜疾病中的作用被引量：4
- 2016年
- Toll样受体家族（TLRs）是天然免疫模式识别系统中的重要组成部分，可以识别多种病原微生物和自身细胞损伤后释放的分子。TLRs可在视网膜的多种细胞中表达，包括小胶质细胞、Miiller细胞、星形胶质细胞、视网膜色素上皮细胞和感光细胞等，与相关配体结合后启动细胞内信号转导通路，诱导特异性基因表达，上调共刺激分子表达水平并促进炎性因子的分泌，发挥抗感染作用。此外，这些激活的炎性因子还可以通过调节相关血管生长因子的水平，影响视网膜的病理性新生血管生成。在复杂的视网膜细胞系统中，小胶质细胞是重要的天然免疫细胞，能够发挥免疫监视及修复等作用。TLRs是小胶质细胞识别受体系统中的重要一类，在调节小胶质细胞参与视网膜感染和炎症反应以及视网膜缺血性疾病等中发挥作用。本文就小胶质细胞中TLRs的作用进行综述。
- 徐文芹王雨生
- 关键词：视网膜小胶质细胞炎症新生血管
- 整合素αvβ3在SDF-1/CXCR4介导的脉络膜新生血管中的作用被引量：2
- 2018年
- 目的探讨内皮细胞表达的整合素αvβ3在基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1,SDF-1)/趋势化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)调控脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)生成过程中的作用。方法 (1)体内动物实验:采用激光诱导C57BL/6J小鼠CNV模型,实验分为4组:单纯CNV组(对照组)、CNV后立即玻璃体内注射SDF-1组(SDF-1组)、CNV后立即玻璃体内注射SDF-1+CXCR4抑制剂AMD3100组(SDF-1+AMD3100组)和CNV后立即玻璃体内注射SDF-1+αvβ3抑制剂SB273005组(SDF-1+SB273005组)。实时定量PCR观察小鼠激光诱发CNV后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d CXCR4和αvβ3的表达;免疫荧光染色观察4组处理后CNV局部及内皮细胞上αvβ3的表达;OCT观察4组处理后CNV中视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层隆起高度。(2)体外细胞实验:Western blot检测正常对照组、Si-CXCR4敲减组和Si-NC模拟敲减组RF/6A细胞中CXCR4蛋白的表达,同时检测对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组、SDF-1+Si-NC组和SDF-1+Si-CXCR4组中整合素αvβ3蛋白的表达。Transwell检测正常对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组的细胞迁移能力。结果 (1)体内动物实验:实时定量PCR显示随着CNV诱导后时间的增加,CXCR4 mRNA和整合素亚基β3 mRNA表达开始增加,CXCR4 mRNA在CNV后3 d表达量最高(4.263±0.464),β3 mRNA在CNV后7 d表达量最高(3.678±0.364),随后开始下降。免疫荧光结果显示:SDF-1组β3荧光强度显著增加,β3/CD31比率也明显增加,显著高于CNV对照组(P<0.01);而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组β3荧光强度和β3/CD31比率显著减弱(P<0.05)。OCT显示SDF-1组RPE层的隆起明显升高(135.503±10.301)μm,显著高于CNV对照组(94.443±12.156)μm(P<0.05);而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组RPE隆起的高度显著降低(95.283±20.062)μm和(99.807±10.403)μm(P<0.05)。(2)体外细胞实验:SDF-1组和SDF-1+Si-NC组整合素亚基β3蛋白的表达均升高(1.301±0.043)、(
- 吕洋王雨生窦国睿李曼红常天芳孙嘉星徐文芹胡至察程子芳
- 关键词：脉络膜新生血管内皮细胞SDF-1/CXCR4整合素ΑVΒ3
- Caspase-1对氧诱导视网膜病变中小胶质细胞参与视网膜新生血管生成的促进作用及其机制被引量：4
- 2018年
- 目的:探讨Caspase-1对小鼠氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)中小胶质细胞参与视网膜新生血管生成的作用及其机制。方法:随机将12只7日龄(P7)C57BL/6J小鼠分为正常组、OIR组和OIR+VX-765组,正常组在正常氧环境中饲养,其余两组构建OIR模型;P12～P16,OIR+VX-765组和OIR组分别每天腹腔注射Caspase-1抑制剂VX-765(4mg/kg)和等量0.4%聚乙二醇(VX-765溶剂);于P17制作视网膜铺片行Lectin染色,比较三组间视网膜无血管区和新生血管区面积的大小;采用免疫荧光染色法观察视网膜组织中Caspase-1的表达和活化小胶质细胞的分布。培养小胶质细胞BV-2细胞分为对照组、缺氧组及抑制剂组,抑制剂组和缺氧组分别经VX-765和0.4%聚乙二醇预处理3h后,缺氧条件下培养24h;对照组常规培养相同时间。通过Western blot检测Caspase-1、p20(Caspase-1活化形式)、IL-1β和VEGF的蛋白表达变化;用各组BV-2细胞培养上清液作为条件培养基,刺激培养血管内皮细胞RF/6A,进行管腔形成和细胞迁移实验,并比较各组间的差异。结果:P17正常组小鼠视网膜血管化完全,未见明显无血管区及视网膜新生血管;OIR组视网膜无血管区和新生血管面积百分比分别为16.58%±1.14%、4.00%±0.41%;OIR+VX-765组两者明显减少,分别为12.23%±1.02%和2.16%±0.52%(P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,Caspase-1在正常小鼠视网膜组织中表达较弱,在OIR小鼠中主要在神经节细胞层和内丛状层有明显的阳性表达,并与活化的小胶质细胞有明确的共定位。Western blot检测结果显示,缺氧处理的培养小胶质细胞BV-2中Caspase-1、p20、IL-1β和VEGF蛋白表达明显提高,而Caspase-1抑制剂则可明显下调p20、IL-1β和VEGF的蛋白表达水平(P<0.05)。管腔形成和细胞迁移实验结果显示,RF/6A细胞经缺氧组BV-2培养上清液处理后,管腔形成长度和细胞迁移数目分别为271±12和347±34个,而加入抑制剂后,二者明显�
- 胡至察王雨生徐文芹张自峰
- 关键词：CASPASE-1小胶质细胞视网膜新生血管氧诱导视网膜病变早产儿视网膜病变
- 小胶质细胞促进视网膜脉络膜血管内皮细胞血管生成
- 目的 缺血缺氧性疾病引发的新生血管严重危害视力。小胶质细胞作为中枢及视网膜特化的巨噬细胞，能感知和传递微环境信号，在血管发育及病理性血管生成中都发挥重要作用。本研究通过体内及体外观察小胶质细胞在新生血管生成过程中的作用，...
- 尹婕徐文芹王雨生
- 关键词：小胶质细胞血管内皮细胞血管生成
- 米诺环素在C57BL/6J小鼠氧诱导视网膜病变中对视网膜炎症的影响
- 目的 检测米诺环素对C57BL/6J 小鼠氧诱导视网膜病变模型中视网膜相关炎症细胞增殖活化及炎症因子表达水平的影响。方法 新生C57BL/6J 小鼠随机分为3 组,即 常氧对照组、OIR 组和OIR+米诺环素P7～P16...
- 徐文芹王雨生
- 关键词：炎症氧诱导视网膜病变米诺环素小鼠小胶质细胞
- 小胶质细胞的特征及其在视网膜疾病中的作用被引量：2
- 2016年
- 小胶质细胞是组织定居的免疫监控细胞,可感知大脑和视网膜的神经微环境,在视网膜神经元变性和凋亡时迅速激活,是许多视网膜疾病的共同标志物。小胶质细胞还参与发育期直至成熟期的神经回路的重塑以及新生血管的生成。本文归纳小胶质细胞的来源和特征,综述其参与视网膜免疫防御以及多种疾病发生机制的研究进展。
- 尹婕徐文芹王雨生
- 关键词：小胶质细胞视网膜免疫发病机制
