方敏
- 作品数:25 被引量:62H指数:5
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小鼠BTLA胞外功能区基因克隆表达及其对DC表面B7分子表达的影响被引量:5
- 2006年
- 目的:研究重组谷胱甘肽S-转移酶(GST)-小鼠B/T细胞弱化因子包外功能区(mBTLAext)融合蛋白(GST-mBT-LAext)对小鼠树突状细胞系DC2.4表面B7分子表达的影响。方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB-TLAcDNA。将其胞外功能区基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组表达质粒pGEX-4T-2/mBTLAext并转化E.coliBL21(DE3),以1mmol/L的IPTG诱导表达。提取包涵体,经变性、负性后,采用GlutathioneSepharose4B柱纯化可溶性的GST-mBTLAext。将不同浓度的GST-mBTLAext加入到DC2.4的培养体系中,采用流式细胞术检测其对DC上B7-1和B7-2表达的影响。结果:成功地克隆了mBTLA基因,并构建了重组原核表达载体。变性、复性,经GlutathioneSepharose4B柱纯化,获得了可溶性的GST-mBTLAext融合蛋白。经SDS-PAGE鉴定表明,融合蛋白的相对分子质量(Mr)为43000,同预期的结果一致。流式细胞术检测显示,GST-mBTLAext可上调DC2.4上B7-1的表达并呈剂量依赖性,这一作用可被抗GST-mBTLAext血清阻断。未检测到GST-mBT-LAextDC2.4上B7-2的表达有影响。结论:BTLA对DC2.4表面B7分子表达的上调可能是BTLA-HVEM途径反向信号对DC作用的结果,对进一步研究其对DC生物学行为的影响及其分子机制具有重要的理论意义。
- 徐军发赵坤黄保军熊平方敏沈关心龚非力
- 关键词:树突状细胞B7分子
- 一种抗肿瘤制剂及其制备方法
- 本发明提供一种抗肿瘤制剂及其制备方法。所述抗肿瘤制剂为由分散有有效成分PD-1阻断抗体和塞来昔布的海藻酸盐水溶液形成的水凝胶形式的抗肿瘤制剂,所述抗肿瘤制剂为注射制剂。本发明提供的抗肿瘤制剂具有良好的体内稳定性和延长的缓...
- 王琳李永奎方敏王征张剑宋煜石洁徐妞妞王健
- HMGB1参与小鼠心脏移植慢性排斥反应/心脏移植物血管病变的研究
- 研究背景:HMGB1(high mobility group box-1 protein)是存在于真核细胞核内的非组蛋白染色体结合蛋白,主要存在于胞核内,其可通过两个途径释放到胞外:损伤或坏死的细胞被动分泌及激活的单核/...
- 邹慧娟汤贤英熊平徐勇方敏谭政龚非力郑芳
- 关键词:HMGB1心脏移植慢性排斥反应CAV
- 文献传递
- 输注表达IDO供者来源树突状细胞上调CD4+CD25+Treg诱导皮肤移植免疫耐受
- 目的:探讨色氨酸代谢酶 IDO(Indoleamine 2,3 dioxygenase,IDO))参与树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导移植免疫耐受的细胞学基础与分子机制。方法:构建 IDO 基因的腺病...
- 方敏于光龚敏刘莉龚非力
- 关键词:树突状细胞IDO免疫耐受
- 文献传递
- 供心体外转染腺病毒介导的CD40Ig融合基因延长小鼠移植心脏存活时间
- 2006年
- 目的探讨体外转染CD40Ig融合基因对小鼠移植心脏存活时间的影响。方法构建携带小鼠CD40胞外段和人IgGFc融合基因的重组腺病毒载体(AdCD40Ig),以BALB/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者,建立小鼠腹部异位心脏移植模型,实验组供心移植前在体外以AdCD40Ig灌注,转染CD40Ig基因,另设空载体转染对照组、非转染对照组和近交系对照组(供、受者均为近交系C57BL/6小鼠)。术后观察移植心的存活及移植物中炎症细胞浸润情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测受者体内CD40Ig融合蛋白表达情况,流式细胞仪检测受者体内产生γ干扰素(IFN-γ)的脾细胞。结果实验组移植心的存活时间达(15.8±0.7)d,明显长于空载体转染对照组和非转染对照组(P<0.01)。术后第2d,实验组受者体内CD40Ig融合蛋白表达最高,1周后明显降低。术后第7d,实验组移植心组织中浸润的炎症细胞明显比未处理对照组和空载体对照组少。实验组产生IFN-γ的CD4+和CD8+T淋巴细胞分别为(2.18±0.16)%和(10.82±0.74)%,与近交系对照组接近,明显低于未处理对照组和空载体对照组(P<0.01)。结论供心体外转染CD40Ig融合基因可有效抑制移植后受者体内同种T淋巴细胞的增殖,并延长移植心的存活时间。
- 黄保军尹辉黄亚非徐军发熊平冯玮郑芳徐勇方敏龚非力
- 关键词:CD40配体腺病毒科转染
- 腹部消化系统手术患者术中低体温风险预测模型的构建与验证被引量:4
- 2023年
- 目的探索腹部消化系统手术患者术中低体温的影响因素,构建预测模型,并对其预测效果进行检验。方法使用方便抽样法,抽取我院2021年12月—2022年7月的395例接受腹部消化系统手术患者,根据手术过程中是否发生低体温分为低体温组(n=242)和非低体温组(n=153)。根据Logistic回归结果确定术中低体温影响因素,建立风险预测模型并绘制列线图,对模型进行区分度、校准度及临床有效性评价检验。结果最终纳入手术间洁净度、手术分级、麻醉时间和手术开始时患者基础体温作为模型构建指标。模型最佳截断值为0.477时,ROC曲线下面积为0.901,灵敏性为0.793,特异性为0.830,约登指数为0.623,预测模型区分度较好;Hosmer-Lemeshow检验结果χ2=3.938,P=0.863,预测模型校准度较好;DCA决策曲线显示,该模型临床有效性较好。结论构建的术中低体温风险预测模型对腹部消化系统手术患者术中低体温的发生具有较高的预测价值,可为手术团队人员对高风险患者及时采取低体温防治措施提供依据。
- 方敏高兴莲柯稳王曾妍梁元元
- 关键词:影响因素手术室护理
- IDO在同种异基因皮肤移植中作用机制初步研究
- 目的:Indoleamine 2,3-dioxygenase(IDO)是一种介导色氨酸分解代谢的限速酶。它可将色氨酸分解为 N-formylkynureine,后者迅速转变为kynureine等下游产物,而色氨酸是细胞增...
- 于光方敏龚敏刘莉龚非力
- 关键词:IDO调节性T细胞
- 文献传递
- 一种抗肿瘤制剂及其制备方法
- 本发明提供一种抗肿瘤制剂及其制备方法。所述抗肿瘤制剂为由分散有有效成分PD‑1阻断抗体和塞来昔布的海藻酸盐水溶液形成的水凝胶形式的抗肿瘤制剂,所述抗肿瘤制剂为注射制剂。本发明提供的抗肿瘤制剂具有良好的体内稳定性和延长的缓...
- 王琳李永奎方敏王征张剑宋煜石洁徐妞妞王健
- 文献传递
- 卡介苗活化的CD1-限制性细胞毒T细胞的抗膀胱癌效应被引量:5
- 2002年
- 为研究卡介苗 (BCG)活化的 T细胞亚群在抗膀胱癌效应中的作用 ,通过细胞因子 (IL- 4与 GM- CSF)体外诱导而获得高表达 CD1分子的抗原提呈细胞 ,然后用 BCG抗原致敏抗原提呈细胞以激活各 T细胞亚群 ,比较 BCG活化的 T细胞亚群对膀胱癌细胞株 T2 4生长抑制效应。结果表明 ,BCG活化的 CD1-限制性 T细胞具有明显的抗瘤活性 ,CD4 + T细胞和γδT也发挥抑制瘤细胞生长的作用。该研究结果提示具有非特异免疫功能的 T细胞亚群在
- 方敏龚非力李卓娅冯玮熊平姜小丹徐勇
- 关键词:卡介苗T细胞亚群免疫治疗膀胱癌
- 供者来源凋亡胸腺细胞输注延长皮肤移植物存活及其机制
- 目的:以异基因小鼠皮肤移植为模型,探讨供者来源凋亡胸腺细胞输注诱导同种异体移植物免疫耐受机制,为设计防治移植排斥反应的新策略提供线索。方法:用地塞米松两导供者小鼠(Balb/c,H-2)胸腺细胞凋亡:Annexin V/...
- 方敏龚敏杜治国熊阿丽段利华刘莉龚权龚非力
- 文献传递