易绍萱
- 作品数:141 被引量:451H指数:12
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学交通运输工程更多>>
- 一种从培养上清获得高滴度腺病毒的方法被引量:1
- 2003年
- 目的 寻找一种有效的提高腺病毒滴度而又不损害其活性的方法。方法 腺病毒原液升华冻干后溶解稀释,通过斑点形成实验和免疫组化方法检验其感染活性。结果 升华冻干后稀释的腺病毒液感染滴度达到4.4×10^(12)pfu。结论 冻干、稀释是一种提高腺病毒滴度的有效方法。
- 杨世昕吴军罗高兴易绍萱贺伟峰黄赤兵周立新李彦张宁陈希炜张小蓉
- 关键词:滴度腺病毒冻干免疫组化法
- CTLA4Ig基因表达对鼠皮肤移植免疫抑制作用的研究被引量:12
- 2001年
- 目的 探讨静脉注射CTLA4Ig腺病毒后在大鼠体内的表达和对同种异体移植皮肤存活的影响 ,以及该载体应用的安全性 ,为该基因治疗方法在抑制器官移植排斥反应的临床应用奠定基础。方法 供体SD大鼠皮肤移植前 1周 ,用腺病毒作载体将CTLA4Ig导入Wistar大鼠体内 ,用蛋白质斑点印迹实验检测血清中CTLA4Ig的表达 ,用腺病毒荧光抗体检测腺病毒在脏器的分布。同时还观测了各脏器的病理改变及移植物生存时间。结果 CTLA4Ig腺病毒在肝、脾、心、肺、肾均有明显分布 ,但实质细胞均未见严重损伤性改变。CTLA4Ig基因能在血清中的表达高峰时间一般在 7d左右 ,移植皮肤的生存显著长于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 从静脉注射导入的CTLA4Ig基因能在大鼠体内表达并对同种移植的排斥反应有明显的抑制作用。
- 杨世昕吴军卞修武易绍萱罗高兴贺伟峰黄赤兵周立新
- 关键词:腺病毒CTLA4IG皮肤移植
- 反义及正义α-SMA的表达影响成纤维细胞与平滑肌细胞的实验研究
- 目的利用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因,重组反义和正义逆转录病毒载体,评价α-SMA逆转录病毒对NIH3T3细胞和血管平滑肌的影响。方法用含全长α-平滑肌肌动蛋白(α -SMA)cDNA的质粒DNA的酶切、连接,重...
- 王珍祥李世荣吴军易绍萱
- 文献传递
- CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植的体外实验研究被引量:15
- 2001年
- 目的 探索重组腺病毒载体 (Recombinantadenovirus ,rAdv)介导CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植免疫耐受的分子机制。方法 构建CTLA4Ig重组腺病毒载体 ,转染猪树突状细胞 (DendriticCell,DC) ,以猪表皮细胞匀浆液为刺激原 ,观察DC递呈猪表皮抗原刺激人T细胞增殖、活化及信号转导的影响 ;同时 ,以CTLA4Ig rAdv转染小鼠DC细胞 ,观察该DC膜表面分子CD40、CD80表达。结果 CTLA4Ig转染DC能显著抑制人外周血T淋巴细胞增殖能力 (P <0 .0 1)和T细胞肌醇磷脂信号系统转导活性 ,IL 2分泌亦受到明显抑制 (P <0 .0 5 ) ;转染CTLA4Ig的小鼠DC膜表面分子CD80表达降低 (P <0 .0 5 )。结论 腺病毒介导CTLA4Ig基因转染猪皮能诱导人外周血T淋巴细胞免疫耐受。
- 郑峻松吴军马兵罗高兴易绍萱贺伟峰陈希炜
- 关键词:CTLA4IG异种移植免疫耐受皮肤移植
- 小鼠股骨临界骨缺损模型的构建及评估被引量:7
- 2011年
- 目的建立一种骨组织工程研究中简便易行的标准化小鼠股骨临界骨缺损模型。方法测量小鼠股骨的解剖参数。将30只2~3月龄FVB/N品系的小鼠分成3组,每组10只,用我们自行设计的内固定物固定后分别制备长度为1、2 mm和2.5 mm的股骨干中段骨和骨膜缺损模型,通过影像学和组织学的方法来观察骨缺损的愈合进程。结果术后3个月通过X线片和组织学检查证实1 mm的缺损可以通过自身修复机制完成骨缺损的愈合,而2、2.5 mm的缺损则无法自行愈合,建模成功率为89.7%。结论通过自行设计的内固定物构建的小鼠股骨缺损模型,在不填充植骨材料的情况下,2 mm以上的骨缺损不能自行愈合,符合临界骨缺损的标准。
- 靳慧勇侯天勇罗飞李志强易绍萱常正奇边巴罗布许建中
- 关键词:股骨动物模型小鼠
- 重组腺病毒介导的CTLA4Ig基因在哺乳动物体内表达的研究
- 目的:了解 CTLA4Ig 腺病毒在不同哺乳动物体内的转染能力及表达情况。方法:将所构建的 CTLA4Ig 腺病毒通过静脉或腹腔注射到 Balb/c 小鼠、Wistar 大鼠、兔、小香猪、羊体内,应用蛋白腩斑点印记检测 ...
- 杨世昕吴军易绍萱罗高兴贺伟峰黄赤兵周立新马兵张宁陈希伟
- 文献传递
- 利用免疫共沉淀验证HT036与P311间的相互作用被引量:5
- 2006年
- 目的利用免疫共沉淀技术验证未知蛋白HT036(hypotheticalprotein,HT036)和P311间的相互作用。方法构建能在哺乳动物细胞中表达带HA标签的HT036融合蛋白(HA-HT036)的重组载体pCMV-HA-HT036,经酶切鉴定正确后,和表达带Myc标签的P311融合蛋白(Myc-P311)的重组真核表达载体pCMV-Myc-p311,单独或者共转染人293细胞,利用免疫共沉淀技术验证HT036与P311间的相互作用。结果构建的重组表达载体pCMV-HA-HT036经双酶切鉴定正确,转染293细胞,抗Myc单克隆抗体沉淀Myc-P311相互作用蛋白复合物后,用抗HA单克隆抗体进行Westernblot检测,可以检测到HA-HT036的表达。结论成功构建了HA-HT036融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中表达后利用免疫共沉淀技术证实HT036与P311之间存在着相互作用。
- 袁顺宗彭旭马兵王庆红易绍萱贺伟峰陈希炜胡晓红张小容周丽娜罗高兴吴军
- 关键词:免疫共沉淀相互作用
- 人CTLA4胞外区cDNA毕赤酵母表达载体的构建及高拷贝稳定整合菌株的筛选
- 目的:构建人 CTIA4胞外区蛋白毕赤酵母表达载体,获得高拷贝稳定整合菌株,为大量获得人 CTIA4胞外区蛋白,进行功能研究及其临床应用奠定基础。方法:从活化人外周血淋巴细胞总 Rm 中,扩增人 CTLA4基因胞外区 c...
- 易绍萱吴军贺伟峰朱谨罗高兴陈希炜代飞张小容
- 文献传递
- 共刺激信号阻断剂基因局部转染对大鼠移植肾存活的影响被引量:4
- 2003年
- 目的 观察CTLA 4Ig基因局部转染延长移植肾存活的效能。 方法 以CTLA 4Ig基因重组腺病毒为载体 ,将CTLA 4Ig基因转入BN大鼠肾脏。以BN大鼠为供者 ,Lewis大鼠为受者 ,行同种肾移植术。用经CTLA 4Ig基因转染的供肾移植给受者为转染组 ;用未转染CTLA 4Ig基因的供肾移植给受者为对照组。观察移植肾存活时间和术后肾功能变化。结果 转染组移植肾存活 (32± 8.0 )d ,对照组移植肾存活 (8.5± 1.4 )d ,转染组存活时间明显延长 ;转染组术后血清肌酐较同期对照组明显为低。结论 CTLA 4Ig基因局部转染供肾可明显延长移植肾的存活时间。
- 黄赤兵吴军方玉华张银甫罗高兴易绍萱陈希炜张宁周立新
- 关键词:移植肾
- 核糖体失活蛋白LuffinP1的构建*被引量:3
- 2005年
- 目的: 构建免疫毒素LuffinP1的基因原核表达载体,获得免疫毒素LuffinP1,并对其进行鉴定及纯化。方法:设计寡聚核苷酸片段连接延长合成全长LuffinP1, PCR扩增后将其克隆入表达载体pET20b( +)中,经酶切及DNA序列测定鉴定正确,转化表达宿主菌Origami(DE3 )pLysS中,经IPTG诱导表达蛋白LuffinP1,Westernblot鉴定。结果:成功构建了免疫毒素表达载体pET20b( +) -LuffinP1,获得纯化的免疫毒素,并经Westernblot鉴定正确。结论:通过基因工程成功表达免疫毒素LuffinP1,简化了其制备过程,有利于对其进一步研究应用。
- 王儒鹏吴军袁军解志杰贺伟峰易绍萱张小容
- 关键词:免疫毒素类P1WESTERNBLOT