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李凌凌: 作品数：32 被引量：90H指数：6; 供职机构：武汉科技大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学化学工程冶金工程更多>>

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重组葡萄糖脱氢酶的表达及辅酶再生应用研究: 2017年; 为解决异源表达酮还原酶域EryKR1的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(pET28a-eryKR1)催化环己酮还原时消耗的氢供体NADPH再生的问题,构建了克隆枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因gdh的重组菌E.coli BL21(pET28a-gdh),其中的gdh基因经Nucleotide BLAST功能分析显示与枯草芽孢杆菌9902的gdh基因序列(登录号为EF626962.1)的一致性达到100%。SDS-PAGE检测显示该重组菌经IPTG诱导后可以高效表达出葡萄糖脱氢酶(GDH),其表达量占全菌可溶性蛋白质的64%。GDH粗酶液的比酶活为137.90U/mg。通过气相色谱检测添加了E.coli BL21(pET28a-gdh)的E.coli BL21(pET28a-eryKR1)环己酮还原反应体系中的环己醇含量,结果显示加入重组GDH的双重组菌耦合反应体系中环己醇的产率为82.21%,是未添加GDH的反应体系对应值的3.23倍,表明重组GDH可以为EryKR1还原环己酮系统解决辅酶再生问题。; 李凌凌刘曜宁吕早生杨忠华左振宇宋采薇; 关键词：葡萄糖脱氢酶重组菌异源表达辅酶再生生物催化环己酮

一种含蜂胶醇提液的酒及其生产方法: 本发明涉及保健滋补酒领域，特别涉及一种含蜂胶醇提液的酒及其生产方法，提供一种对多种疾病都有防治效果的保健酒。本发明提供的含蜂胶醇提液的蜂胶酒制法包括以下步骤：S1：将蜂胶在‑80ºC下预冷3h，通过粉碎机粉碎，并过40目...; 杨忠华钟武坤田淑芳霍娇侯亚利左振宇李凌凌; 文献传递

二苯并噻吩降解菌的筛选鉴定及煤脱硫的研究被引量：9: 2010年; 从某石油化工厂的气浮池附近的土壤中,分离得到1株能降解二苯并噻吩的菌株DBZT,经菌株的形态特征、生理生化指标和16S rDNA序列分析,鉴定属于苍白杆菌属(Ochrobactrum sp.)。GC-MS分析菌株的发酵液,表明该菌株能将二苯并噻吩还原生成联苯。应用正交实验的方法研究了苍白杆菌DBZT在煤炭脱硫过程中煤粒度、菌液接种量和浸滤时间3个因素的组合对其脱硫效果的影响,并筛选出各因素的最佳实验条件。实验结果表明,浸滤时间对煤脱硫效率的影响最为显著。在浸滤时间为24 h,煤粒度小于0.094 mm,接种的细菌数量为3×106cfu/g煤样的条件下,菌株DBZT脱去全硫的效果最佳,达到16.28%。; 李凌凌吕早生吴敏袁向利; 关键词：煤生物脱硫二苯并噻吩正交实验

以魔芋多糖为碳源的产聚羟基丁酸酯菌的筛选、鉴定及发酵研究被引量：2: 2018年; 为充分利用发酵魔芋低聚糖所产生的菌体废弃物,降低微生物发酵法生产聚羟基丁酸酯(PHB)的成本,从云南省种植魔芋的土壤中分离得到一株以魔芋多糖为唯一碳源生长的菌株LKH,该菌可以分泌β-甘露聚糖酶水解魔芋多糖生长,并在胞内积累PHB。经形态学、生理生化特征及16S rDNA序列分析表明,菌株LKH归属于依利诺斯类芽孢杆菌。红外光谱和气相色谱分析结果显示,以魔芋多糖为碳源培养的细菌胞内提取的白色薄膜物质中含有PHB。当氮源(NH_4Cl)浓度为0.2g/L时,菌体以魔芋多糖为碳源合成的PHB质量最高可达0.85g/L,其含量达到69.55%,提取率为93.29%。; 李凌凌李凌凌张家铭黄皓左振宇杨忠华; 关键词：聚羟基丁酸酯魔芋多糖碳源 Β-甘露聚糖酶

一株高效解磷菌的筛选鉴定及溶磷性能被引量：14: 2022年; 【背景】土壤中大部分磷元素是以难溶性磷酸盐的形式存在,不能被农作物有效利用,而传统化学肥料会带来环境污染等问题。【目的】解决土壤磷缺失现状,开发新型、安全、高效的微生物菌肥。【方法】取武汉科技大学图书馆后土壤为试验材料,筛选出一株高效解磷菌。通过个体形态鉴定、生理生化鉴定、16S rRNA基因序列分析鉴定菌株,以NBRIP为基础培养基进行条件优化,借助高效液相色谱进行细菌解磷机理探究。【结果】所筛选的高效解磷菌株为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)。在20种氨基酸中,D-蛋氨酸对菌株的生长和溶磷促进作用最好,促进效果达到19.09%和16.16%,甲酸钠对菌株的生长和溶磷有抑制效果,抑制效果达到39.08%和10.66%。该菌株通过分泌葡萄糖醛酸、D-L-苹果酸等有机酸溶解环境中的磷酸盐,将菌株制作成菌肥对辣椒幼苗有明显的促生长作用。【结论】利用唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)分泌有机酸溶解土壤中的磷酸盐,可为生物肥料的制备和应用提供一定的理论参考。; 高威左振宇李凌凌李凌凌聂静雨陈慧雯; 关键词：解磷菌解磷微生物菌肥

糖多孢红霉菌酮还原酶域在羰基还原中的应用被引量：4: 2011年; 为研究糖多孢红霉菌聚酮合成酶模块1的酮还原酶域,催化羰基还原的底物特异性和立体选择性,PCR扩增了该酶域的编码基因(eryKR1),并将其克隆到表达载体pET-28a,得到重组质粒pET-eryKR1,转化到Escherichia coli BL21(DE3)后,获得了重组菌株E.coli BL21(pET-eryKR1).将E.coli BL21(pET-eryKR1)和异源表达枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的重组大肠杆菌E.coli BL21(pET-gdh1)进行双重组菌耦合,对4-氯乙酰乙酸乙酯、苯乙酮、2-辛酮和环己酮4种底物进行转化还原,利用气相色谱分析转化液,结果显示E.coli BL21(pET-eryKR1)对环己酮的还原效果较好,产物环己醇的得率最高可达93.24%,而对其他3种底物几乎没有还原能力.利用E.coli BL21(pET-eryKR1)2催化2-甲基环己酮不对称还原,产物主要为顺式-2-甲基环己醇,产率可达41.87%,产物的对映体过量值为74.81%.; 李凌凌吕早生关海燕贾伟伟; 关键词：聚酮合成酶糖多孢红霉菌生物催化

异源表达酮还原酶的重组菌单羰基还原1,2-环己二酮被引量：1: 2016年; 利用表达糖多孢红霉菌聚酮合成酶模块1的酮还原酶的重组大肠杆菌细胞Escherichia coli BL21(p ET-ery KR1)2对1,2-环己二酮进行了催化还原反应,该还原反应为单羰基还原而非双羰基还原,生成的产物为2-羟基环己酮。对重组细胞催化1,2-环己二酮还原的反应条件进行了优化,发现最优的反应条件为底物浓度20 mmol/L,细胞密度80 g/L,p H 6.0,转速120 r/min,温度37℃,且需要添加10 g/L E.coli BL21(p ET-gdh1)辅酶再生系统和0.2 mmol/L NADPH。在该反应条件下,重组菌催化反应10 h后,底物的转化率可高达84.2%。; 李尧益李凌凌吕早生左振宇; 关键词：聚酮合成酶生物催化

蚕蛹超声辅助常温脱脂工艺条件优化被引量：5: 2016年; 脱脂是蚕蛹精制过程中的重要环节,脱脂过程中保持蚕蛹蛋白的活性十分必要。旨在对蚕蛹超声辅助常温脱脂工艺进行研究,采用响应面分析法对工艺条件进行优化,并建立相应的预测模型。单因素实验和响应面法优化得到蚕蛹超声辅助常温最佳脱脂工艺为:石油醚-丙酮(3∶7)为溶剂,液料比11 m L/g,超声功率125 W、超声时间27 min,温度40℃左右;在该脱脂条件下,蚕蛹脱脂率为(96.8±0.8)%。各因素对蚕蛹脱脂率的影响程度由强至弱依次为:液固比>超声时间>超声功率。溶剂类型和液固比是影响蚕蛹脱脂效率的决定性因素,超声辅助脱脂具有脱脂温度低,脱脂时间短,物质活性不易破坏,脱脂率高的优点。; 左振宇喻放黄艳鸿王家怡李凌凌; 关键词：蚕蛹超声波辅助响应面法

2,4-二硝基苯肼显色法测定环己酮含量被引量：4: 2010年; 为简化定向进化筛选环己酮还原能力提高的突变型糖多孢红霉菌聚酮合成酶酮还原酶域的繁琐工作,建立了利用环己酮和2,4-二硝基苯肼的显色反应来检测环己酮含量的方法。环己酮浓度在0～5mg·mL-1范围内与吸光度线性关系良好,线性相关系数为0.9973。在10mL转化液的实验条件下,方法的检测限为188μg.L-1,相对标准差为1.52%。该方法操作简便、灵敏度较高、结果可靠,能满足筛选突变体的要求。; 李凌凌吕早生黄乐繁侯亚利庹保华刘郭飞; 关键词：2,4-二硝基苯肼分光光度法环己酮

一株高浸磷嗜酸氧化硫硫杆菌的分离与鉴定被引量：7: 2011年; 从矿山土样中分离到一株嗜酸的浸磷矿细菌HY-01,观察其形态并研究其培养特征.结果显示,该菌株为革兰氏阴性、短杆状运动细菌,菌体长1～2μm,宽0.5～0.7μm,能在pH 1.5～8.0的范围内生长,最适生长温度为37℃,最适pH为1.5～3.0.该菌株可以KNO3、NH4NO3、（NH4）2CO3、NH4H2PO4、（NH4）2SO4以及蛋白胨为氮源,以元素硫和黄铁矿中的硫为能源,不能利用有机物质以及硫代硫酸钠、硫酸亚铁等无机物为能源生长.形态、生理生化特性研究以及16SrDNA序列分析表明,该菌株为嗜酸氧化硫硫杆菌.浸矿实验结果表明其具有很高的磷矿浸出能力.; 吕早生关海燕李凌凌贾伟伟; 关键词：菌种筛选 RDNA 黄铁矿

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