李姁君
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：第四军医大学药学系全军基因诊断技术应用研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌细胞毒素相关抗原A的表达纯化及其临床研究被引量：8
- 2002年
- 目的:cagA^+Hp的感染与胃癌的相关性在亚洲有不同报道,本研究应用重组幽门螺杆菌毒素相关抗原A(CagA)建立检测血清中抗CagA抗体的方法,以探讨本地区cagA^+ Hp的感染与胃癌的相关性。 方法:构建表达幽门螺杆菌CagA抗原的表达载体,工程菌经IPTG诱导,表达的CagA包含体经Ni柱纯化,变性、复性、透析并经活性鉴定后,抗原被点在硝酸纤维素膜上或用以包被ELISA板,建立检测正常人及胃癌患者血清抗CagA抗体的DIGFA(斑点金免疫渗滤试验,简称滴金法)和ELISA法。 结果:重组克隆pRSETcagA的工程菌可表达M_r36000的目的蛋白,表达形式为包含体;CagA包含体经纯化后SDS-PAGE显示纯度达98％以上,活性经ELISA证实;正常人64例及胃癌患者血清50例中,cagA^+ Hp的感染率分别为29.7％和62％,胃癌患者cagA^+ Hp的感染率明显高于正常人(P<0.01)。 结论:我们建立的检测血清抗CagA抗体的DIGFA和ELISA均具有良好的可重复性;胃癌患者cagA^+ Hp的感染比例明显高于正常人,CagA阳性幽门螺杆菌的感染与胃癌有关,CagA可作为制备防治cagA^+ Hp感染的疫苗的后备抗原。CagA可作为幽门螺杆菌疫苗制备的候选抗原,检测患者血清幽门螺杆菌CagA抗体,有可能为胃癌的发生提供预警作用。
- 李姁君阎小君刘智广苏成芝
- 关键词：纯化
- MC9204对大鼠心肌肥厚模型的影响被引量：1
- 1998年
- 目的:观察新的二氢吡啶类钙拮抗剂MC9204对大鼠心肌肥厚的影响.方法:建立大鼠腹主动脉狭窄左室肥厚(LVH)模型,并给予新的二氢吡啶类钙拮抗剂MC9204治疗3mo,观察大鼠LVH时心肌重量指数、心室厚度、氧自由基(OFR)、心肌酶释放等的变化.结果:LVH时全心重量指数(HW/BW)、左室重量指数(LVW/BW)和左心室、室间隔厚度均显著增高(P<0.01),表明LVH模型成立;LVH时丙二醛(MDA)明显增高,超氧化物歧化酶(SOD)显著下降(P<0.01);并伴有肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)升高(P<0.01).MC9204可逆转上述LVH时的各种改变(P<0.01).结论:OFR产生增多,清除减少,可能参与心肌肥厚的发展;MC9204具有逆转肥厚心肌的效应,该作用可能与其抑制钙内流、降低心脏负荷以及维持OFR产生-清除系统的平衡有关.
- 李姁君梅其炳赵德化崔毅
- 关键词：心肌肥厚二氢吡啶钙拮抗剂氧自由基
- 幽门螺杆菌毒素相关基因的克隆、测序及表达被引量：4
- 2002年
- 目的 分段扩增、克隆幽门螺杆菌毒素相关基因cag A中间区 cag1,cag2 ,并利用大肠杆菌系统表达 .方法 PCR法扩增 cag A基因 ,双脱氧中止法测序正确后 ,克隆入大肠杆菌表达载体 p BV2 2 0 ,受控于 PRPL 启动子 ,转化大肠杆菌 DH5α,4 2℃进行温度诱导 .结果 PCR分段扩增出 cag A中间区基因 cag1,cag2 ,分别为 975 ,75 5 bp,克隆入 p UC19质粒 ,测序正确 ;在 p BV中构建 cag1,cag2的重组表达载体p BVcag A1,p BVcag A2 ,工程菌诱导后 SDS- PAGE显示新生表达蛋白带 ,Mr:Cag136× 10 3,Cag2 2 7.9× 10 3,均与预期的 cag A蛋白 Mr一致 ,约占菌体总蛋白的 36 %和 2 4 % .结论 成功克隆分段扩增的 cag A中间区基因 ,并可在大肠杆菌DH5α中高效表达 .
- 李姁君韩锋产闫小君苏成芝
- 关键词：基因克隆基因表达幽门螺杆菌毒素
