李文毅
- 作品数：28 被引量：43H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市青年科技启明星计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 短期持续高糖输注诱导胰岛β细胞增殖的大鼠模型建立
- 目的 建立持续高糖灌注的胰岛β细胞增殖模型,为研究β细胞增殖的机制提供平台.方法 购买8周龄成年SD大鼠,适应环境一两天后,称量体重,予以3％戊巴比妥钠麻醉.麻醉后分离颈静脉,结扎远心端,插入静脉留置管从皮下穿到背侧,明...
- 李文毅张宏利李凤英龙红梅刘赟吴铃张翠平李果
- TCF7L2基因多态性与中国人群2型糖尿病发病风险的关联研究被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨TCF7L2基因微卫星多态性与中国人群2型糖尿病(2-DM)发病风险的关系。方法:应用ABI3700测序仪对921例2-DM患者和1107名正常人的微卫星(DG10S478)进行测序分型,并进行与2-DM的关联分析。结果:在本研究人群中共发现微卫星(DG10S478)的6种等位基因,分别是-8、-4、0、4、8和12。主要等位基因0在本研究人群中的平均频率为95.63%,非零等位基因X在正常组和2-DM组中的频率分别是3.61%和4.83%,其相对危险度为1.35(95%的可信区间为1.00～1.84,P=0.053)。X/0基因型在2-DM组中的分布频率较正常对照组显著升高(9.55%比7.23%,P=0.058),该基因型的相对危险度为1.34(95%的可信区间为0.98～1.84,P=0.069)。此外,胰岛功能相关指数IGI在携带风险等位基因X人群和非携带人群中有显著差异(1.22±0.31比1.41±0.25,P=0.042)。结论:TCF7L2基因微卫星D10S478的多态性可能与中国人群2-DM发病相关,但考虑到该风险等位基因在中国人群中属低频分布,故其在中国人群2-DM的发病过程中可能不起显著作用。
- 李文毅骆天红张宏利徐佳李果罗敏
- 关键词：2型糖尿病TCF7L2微卫星
- 多种生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞(英文)被引量：1
- 2008年
- 背景：以往研究已证明胚胎干细胞可被诱导分化为胰岛素分泌细胞，但诱导时间较长，大部分需要1个月左右。目的：体外联合应用激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子和烟酰胺4种生长因子，观察能否在较短的时间内将小鼠胚胎干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞。设计：细胞观察实验。单位：上海市内分泌及代谢病研究所，上海交通大学医学院附属瑞金医院。材料：实验于2004—10／2006—02在上海市内分泌研究所完成。清洁级孕12．5—14．5d龄昆明小白鼠2只，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，动物质量合格证号2004A034，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。小鼠胚胎干细胞株由法国里昂CNRSUMR5641实验室张昌贤教授提供。激活索A为R＆D公司产品：全反式维甲酸，烟酰胺由Sigma公司提供；碱性成纤维细胞生长因子由Gibco公司提供。方法：取孕鼠胚胎，除去头部和内脏，将剩余组织剪碎，胰酶消化后制备细胞悬液，取上层离心重悬，按3×10^8L^-1接种培养，传2-3代时作为滋养层细胞。将鼠胚胎干细胞接种到新鲜滋养层上，加入含白血病抑制因子的knockout DMEM培养基，常规培养两三天后按1：3-1：6传代，当细胞与细胞之间分开时加入含血清的培养液终止消化，离心弃上清，制成单细胞悬液按2.5×10^4密度接种，加入不含白血病抑制因子的培养液，24～48h后收集形成的胚胎体，铺于Matrigel铺底的培养皿中。胚胎体贴壁后，在含有100μg／L激活素的10％FBs，DMEM中培养24h，再将培液换为10％FBS／DMEM培养6-8h作为间隔，然后把分化的胚胎体在含10^-6mol／L全反式维甲酸的10％FBS／DMEM中培养24h，在含10μg／L碱性成纤维细胞生长因子的10％FBS／DMEM中培养3-5d，在含N2、B27、1μg/L层粘连蛋白、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子、10mmol／L烟酰胺的DME
- 冯龄张宏利李文毅张芹许丽红赵萸骆天红李果
- 关键词：干细胞胚胎胰岛素分泌细胞
- 脂肪分化相关蛋白基因致2型糖尿病分子机制研究
- 目的在细胞水平上对2型糖尿病家系D9S171附近的脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因外显子中的错义突变Thr394>Ala进行功能研究,以阐明该突变对ADRP基因功能的影响。方法从小鼠脂肪组织中提取mRNA,通过逆转录聚合...
- 骆天红赵萸张宏利李文毅许丽红张芹郑升李杲罗敏
- 文献传递
- 肥胖及2型糖尿病患者内脏脂肪基因差异表达研究被引量：11
- 2007年
- 目的筛查在正常人、单纯性肥胖患者及肥胖伴2型糖尿病患者内脏脂肪组织中差异表达的基因。方法利用自制的高密度cDNA芯片,比较正常人、单纯性肥胖患者及肥胖伴2型糖尿病患者内脏脂肪组织中差异表达的基因,以寻找脂肪组织特异的与肥胖及糖尿病发生有关的基因。结果和正常人相比,在肥胖患者及肥胖伴2型糖尿病患者中上调的基因分别有119个和257个,下调的基因分别有46和58个。这些基因中有77个在两组中均上调,其中包括与代谢有关的基因,如丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)以及窖蛋白、金属硫因蛋白等;8个基因在两组中均下调,其中包括脂肪合成途径中的关键酶,如3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)合成酶、脂肪酸合成酶及硬脂酰辅酶A脱氢酶。另外,酪氨酸-3-单加氧酶-色氨酸-5-单加氧酶活化蛋白θ(YWHAZ)仅在肥胖伴2型糖尿病患者中上调,而在单纯性肥胖患者中不变,该基因所编码的蛋白在胰岛素信号转导途径中起着负调控的作用。结论脂肪组织中脂肪生成下降、脂肪酸氧化增加可能是肥胖及2型糖尿病中胰岛素抵抗发生的共同原因,其它基因功能的改变也可能参与了肥胖及2型糖尿病的发生,而胰岛素信号转导受阻可能是肥胖向糖尿病转化的促进因素。对这些基因的进一步研究将有助于更好地了解肥胖及糖尿病的发生机制。
- 骆天红赵萸李果张宏利李文毅罗敏
- 关键词：肥胖糖尿病脂肪组织
- Cnb1基因多态性与2型糖尿病相关性研究被引量：3
- 2007年
- 目的:研究Cnb1基因的单核苷酸多态性(SNPs)在上海地区人群2型糖尿病(2-DM)患者和正常对照组人群中的基因型频率、等位基因频率分布及其与2-DM的相关性。方法:选取上海地区无亲缘关系的2-DM患者447例及正常对照440名。用稳态模式胰岛素抵抗指数(HOMA-R)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)估测外周组织胰岛素敏感度及胰岛β细胞功能。采用等位基因专一性实时PCR技术,对2-DM患者及正常对照组人群Cnb1基因的5个SNP位点rs12329083、rs12465425、rs13029910、rs2861814及rs11692815进行基因分型;并进行统计学分析,研究这些位点与2-DM的相关性。结果:rs13029910的CC基因型频率在2-DM患者组中的含量较对照组显著升高(2.7%比0.7%,P=0.021),CC基因型个体2-DM发病风险增高,Logistic回归分析显示,其OR值(比值比)为4.266(P=0.035)。rs12329083(A/T)、rs12465425(G/T)、rs2861814(C/T)及rs11692815(A/G)位点的基因型频率、等位基因频率在2-DM组与正常对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:Cnb1基因可能与上海地区人群2-DM的遗传易感性有关,其中rs13029910多态性位点的基因型CC与2-DM发病风险增高相关。
- 张芹骆天红张宏利李文毅许丽红赵萸李果罗敏
- 关键词：基因单核甘酸多态性2型糖尿病
- 多种生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素生成细胞团
- 2007年
- 目的探讨体外联合应用激活素A、全反式维甲酸(ATRA)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和烟酰胺4种生长因子能否将小鼠胚胎干细胞(ESC)诱导分化为胰岛素生成细胞团。方法先后以激活素A、ATRA、bFGF和烟酰胺4种生长因子诱导小鼠ESC 14 d后,应用RT-PCR、DTZ染色和免疫荧光检测分化细胞胰岛素表达。结果分化细胞可检测到胰岛素mRNA表达,DTZ染色和免疫荧光染色阳性。结论体外联合应用激活素A、ATRA、bFGF和烟酰胺4种生长因子能够将小鼠ESC诱导分化为胰岛素生成细胞团。
- 冯龄张宏利李文毅张芹许丽红赵萸骆天红李果
- 关键词：干细胞胚胎小鼠
- 短期持续高糖输注诱导胰岛β细胞增殖的大鼠模型建立被引量：1
- 2010年
- 目的:建立高糖输注诱导胰岛β细胞增殖的大鼠模型,为研究胰岛β细胞增殖的机制提供研究平台。方法:SD大鼠颈静脉插管后用输液泵连续输注72h的50%葡萄糖和0.45%的NaCl,用BrdU掺入和标记增殖蛋白ki67检测大鼠胰岛β细胞增殖情况,并检测增殖相关基因的表达。结果:输注50%葡萄糖组的大鼠与NaCl组比较胰岛β细胞BrdU和ki67阳性细胞明显增多,增殖相关基因ccnd2,c-myc表达增高,P27降低。结论:通过持续的高糖输注72h可建立胰岛β细胞增殖的大鼠模型。
- 张宏利李文毅李凤英龙红梅刘赟吴铃张翠平李果罗敏
- 关键词：胰岛Β细胞增殖葡萄糖
- 肥胖及2型糖尿病患者内脏脂肪差异表达基因与脂肪细胞分化关系的研究
- 目的应用自制的高密度cDNA芯片,对正常人、肥胖及肥胖伴2型糖尿病患者的内脏脂肪组织基因表达谱进行比较研究,并对在肥胖及糖尿病患者中差异表达的基因与脂肪细胞分化的关系进行研究,以阐明脂肪细胞分化与肥胖及2型糖尿病的关系。...
- 赵萸骆天红张宏利李文毅许丽红张芹郑升李杲罗敏
- 文献传递
- 候选基因多态性与2型糖尿病相关性研究
- 本文研究了候选基因多态性与2型糖尿病相关性。
2型糖尿病是一种极具异质性的内分泌代谢性疾病，主要是由于胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌胰岛素的功能受损引起。同时2型糖尿病又是一种多基因病，具有明显的遗传易感性，环境因...
- 李文毅
- 关键词：2型糖尿病易感基因单核苷酸多态基因筛选
- 文献传递
