李有全
- 作品数：282 被引量：366H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家肉牛牦牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 环形泰勒虫DnaJ蛋白C末端(128aa-458aa)多克隆抗体的制备与反应原性分析被引量：2
- 2021年
- 为获取DnaJ蛋白多克隆抗体,将截短的环形泰勒虫DnaJ蛋白C末端核酸序列构建在pET-30a(+)质粒并转化至Rosetta(DE3)感受态细胞,经终浓度1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达,蛋白可溶性分析结果显示,该重组蛋白主要以包涵体的形式存在。SDS-PAGE结果显示,纯化后的蛋白分为2条,其中一条蛋白大小约为41.65 ku,与预期结果相符,另外一条蛋白可能因为翻译提前终止比预期条带位置偏低。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化后,皮下分点注射BALB/c小鼠,制备小鼠源DnaJ蛋白多克隆抗体。通过Western-blot验证,发现截短后的环形泰勒虫DnaJ蛋白与抗His单克隆抗体、环形泰勒虫阳性血清和抗DnaJ多克隆抗体均能反应,表明该蛋白产物具有良好的反应原性。获得的多克隆抗体可用于研究环形泰勒虫DnaJ蛋白的功能。
- 曹天行李志史康妍石苗刘爱红马全英关贵全李有全殷宏罗建勋罗建勋
- 关键词：环形泰勒虫原核表达多克隆抗体
- 以18S rRNA和ITS为靶基因的牛环形泰勒虫LAMP检测方法的建立
- 牛环形泰勒虫病又称热带泰勒虫病(Tropical theileriosis),是一种严重威胁热带和亚热带地区经济发展的重要寄生虫病。笔者以牛环形泰勒虫核糖体18S rRNA和ITs为靶基因,建立牛环形泰勒虫的LAMP检测...
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- 文献传递
- 牛结节皮肤病病原传播媒介及传播特征分析被引量：7
- 2022年
- 牛结节皮肤病是一种病毒性跨界流行疾病,该病可导致患畜皮肤及器官广泛性结节、淋巴肿大、精神沉郁、食欲不振、高热等。研究显示,该病可短时间内在局部区域或者跨区域长距离传播,这其中媒介和非媒介因素起着关键作用。因此,厘清牛结节皮肤病的生物媒介或者非生物媒介对于该病的防控和流行病学调查有着重要的指导意义。本研究着重就牛结节皮肤病的生物媒介和非生物载体做一综述,为后期该病流行特征的研究以及防控措施的制定提供参考。
- 罗金阿娜古丽·牙生张高峰罗文蔚刘佩雯刁沛文曹润来任巧云刘文阁李有全殷宏刘光远
- 关键词：媒介流行病学
- 甘南藏族自治州部分地区牦牛泰勒虫病的血清学调查被引量：4
- 2018年
- 为了解甘肃省甘南藏族自治州牦牛泰勒虫的感染状况,采用可同时检测3种牛泰勒虫感染的重组MPSP蛋白间接ELISA方法,对采自甘南藏族自治州合作市、夏河县、碌曲县和玛曲县的320份牦牛血清样品进行了检测。结果显示,血清抗体阳性率为71.56%（229/320）,表明该地区牛泰勒虫感染严重。SPSS22.0.0.0软件卡方检验分析结果表明,甘南藏族自治州这4个县（市）之间牦牛血清抗体阳性率无显著性差异（P=0.11,x2=2.39,df=3）,不同年龄段及不同性别牦牛之间阳性率也无显著性差异（P=0.09,x2=2.13,df=2;P=0.07,x2=0.02,df=1）。本研究为该地区牦牛泰勒虫病的防控工作提供了流行病学参考数据。
- 陈银银赵帅阳关贵全李有全刘爱红石红梅殷宏刘军龙罗建勋
- 关键词：牦牛泰勒虫病ELISA血清学调查
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒HN-HW株的分离与鉴定被引量：2
- 2010年
- 用细胞传代的方法从湖南省宁乡县发病猪所采病料中分离到一株猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株。该毒株能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变,RT-PCR检测可扩增出670bp的特异性的ORF5基因片段,经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈阳性反应,电镜观察其超微结构显示,病毒粒子大小为50～60nm。命名该分离毒株为HN-HW株。
- 马米玲郝雪峰关贵全李有全刘志杰刘爱红任巧云牛庆丽刘军龙殷宏罗建勋
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 与吕氏泰勒虫TlSP蛋白互作的绵羊淋巴细胞蛋白酵母双杂交系统的筛选
- 2016年
- 为研究吕氏泰勒虫入侵绵羊淋巴细胞的机理,用绵羊外周血淋巴细胞构建酵母双杂交文库,筛选与TlSP蛋白互作的蛋白。以密度梯度离心法分离出未感染泰勒虫的绵羊淋巴细胞,TRIzol法提取总RNA,建立酵母双杂交cDNA文库。结果显示,对文库进行评定,细胞密度为1.075×109/mL,插入片段长度在250~3 000bp之间,文库滴度为1.088×108 CFU,重组率为92%。利用诱饵质粒pGBKT7-TlSP对文库进行筛选,结果筛选到9种蛋白。生物信息学分析结果显示,这些蛋白主要参与调控基因转录、mRNA翻译、细胞的增殖、分化和凋亡等过程。上述结果表明,通过酵母双杂交技术筛选出与TlSP互作的蛋白,据此推测TlSP蛋白可能与吕氏泰勒虫在绵羊淋巴细胞内的增殖相关。
- 秦鸽鸽韩元李有全殷宏罗建勋蔡葵蒸
- 关键词：酵母双杂交CDNA文库
- 羊巴贝斯虫SBP3基因序列分析和诊断标识潜力评价被引量：1
- 2021年
- 以GenBank中公布的巴贝斯虫球状体蛋白3(spherical body protein3,SBP3)基因序列为模板,设计合成特异性引物,从我国分离的6株羊巴贝斯虫基因组DNA和cDNA中扩增SBP3基因全长序列;利用生物信息学分析软件,进行基因序列比对、结构特征分析和遗传进化分析,以阐明我国羊巴贝斯虫SBP3基因特性和各虫株间的分类关系;以SBP3基因作为靶标基因,建立巢式PCR检测方法,评价其作为诊断标识基因的潜力。结果显示,羊巴贝斯虫SBP3基因无内含子,其中羊巴贝斯虫未定种新疆株/敦煌株、莫氏巴贝斯虫宁县株/河北株和莫氏巴贝斯虫临潭株/天祝株的SBP3基因全长分别为3195 bp、3351 bp和3348 bp;遗传进化分析结果显示,我国分离的6株羊巴贝斯虫可分为2个种,其中莫氏巴贝斯虫可能存在2个亚种;以SBP3为靶标分子建立的巢式PCR可特异性鉴别检测羊巴贝斯虫未定种和莫氏巴贝斯虫,且与吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊无浆体无交叉反应,检测羊巴贝斯虫未定种最低检测限为5 pg,检测莫氏巴贝斯虫最低检测限为0.5 pg。本试验将为进一步探究羊巴贝斯虫SBP3蛋白功能及羊巴贝斯虫流行病学调查提供数据和技术支持。
- 吕照勇王锦明王晓星孙浩李余彬刘军龙刘爱红李有全殷宏罗建勋罗建勋
- 关键词：巢式PCR
- 用不同白僵菌中国分离株对青海血蜱饱血雌蜱进行生物防控
- 采用浸渍法测定了七株白僵菌对青海血蜱饱血雌蜱的致死率。经过14天的观察,发现菌株B.bAT1,B.bAT5,and B.bAT7在10孢子/mL时致死率达到100%。结果显示此三株菌对青海血蜱饱血雌蜱具高致病性,可作为青...
- 任巧云孙明关贵全李有全刘志杰刘爱红马米玲牛庆丽刘军龙殷宏罗建勋
- 文献传递
- 边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2008年
- 将边缘无浆体MSP5基因在大肠杆菌DH5α中表达,获得45 ku的融合蛋白。Western-blot检测证实该表达蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原,建立了边缘无浆体MSP5的间接ELISA检测方法。该方法对边缘无浆体阴性、阳性血清(各100份)的阳性检出率和阴性符合率分别为100%和98%,与双芽巴贝虫、大巴贝虫、环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫、衣原体、血吸虫和羊肝片吸虫的阳性血清无交叉反应,与羊无浆体阳性血清有交叉反应。结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和敏感性。
- 马米玲殷宏关贵全李有全高金亮刘志杰刘爱红刘军龙任巧云罗建勋
- 关键词：边缘无浆体间接ELISA
- 环形泰勒虫TaSDP基因的原核表达及TaSDP蛋白多克隆抗体的制备被引量：4
- 2015年
- 利用PCR技术从环形泰勒虫裂殖体cDNA中扩增TaSDP(Theileria annulata schizont-derived protein)基因,用获得的基因片段构建原核表达载体pET-30a(+)-TaSDP,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达,蛋白以包涵体的形式存在;融合蛋白经纯化后免疫家兔,制备多克隆抗体,并分别用ELISA和Western-blot测定抗体的效价及特异性。结果显示,获得的TaSDP基因的长度为552bp,制备的多克隆抗体不仅可与重组蛋白His-TaSDP发生反应,而且可以识别天然的虫体蛋白,效价高于1∶215。上述研究结果为开展TaSDP在细胞调控方面的研究奠定了基础。
- 杨聪山刘军龙李有全田占成赵洪喜刘娟刘爱红任巧云牛庆丽杨吉飞谢俊仁罗金陈泽张林刘志杰刘光远殷宏关贵全罗建勋
- 关键词：环形泰勒虫裂殖体多克隆抗体
