李秀华
- 作品数：19 被引量：42H指数：3
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- 慢性乙型肝炎病毒基因型与血清病毒载量的关系被引量：3
- 2007年
- 目的探讨徐州地区慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型与病毒载量的关系。方法采用型特异性引物多重PCR方法对徐州地区160例CHB患者的HBV进行基因分型,用荧光定量PCR方法检测HBV DNA水平。结果B型14例(8.7%),C型88例(55.0%),BC混合型51例(31.9%),未分型7例(4.4%),未发现A、D、E、F型。不同基因型之间HBV DNA载量无明显差别。结论徐州地区CHB患者中HBV基因型主要是C型和BC混合型,感染的HBV基因型与血清病毒载量之间无明显相关。
- 汪莉萍陈明封波张言超李秀华
- 关键词：慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒基因型
- CD28基因启动子-372G／A多态性与慢性乙型肝炎的关系被引量：2
- 2006年
- 共刺激分子CD28在机体抗乙型肝炎病毒（HBV）免疫应答中起重要作用,CD28基因多态性可能会影响HBV感染结局并可能与乙型肝炎慢性化有关.我们采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术分析CD28基因单核苷酸多态性（SNP）与乙型肝炎慢性化的关系,为探索慢性乙型肝炎的易感基因和抗性基因提供资料.
- 陈涛陈明汪莉萍封波李秀华
- 关键词：CD28遗传易感性
- 阳离子磷酸胆碱聚合物负载siRNA进行细胞转染的可行性被引量：1
- 2010年
- 目的探讨新型阳离子磷酸胆碱聚合物(MPC30DEA70)负载短片断干扰RNA(siRNA)进行细胞转染的可行性以及生物学效应。方法 MTT法分析MPC30DEA70对HepG2.2.15细胞的毒性;设计特异性siRNA,以MPC30DEA70负载红色荧光标记的siRNA转染HepG2.2.15细胞,在荧光显微镜下观察该载体携带siRNA能否进入细胞中及在该细胞中的转染效率。在此基础之上,观察对荧光素酶基因表达的抑制效应。结果在MPC30DEA70的浓度为0.5、1、3、5μl时,未发现对HepG2.2.15细胞产生明显的毒性,细胞存活率均在80%以上,并且能够携带siRNA进入细胞内,在48h的转染效率达(52.33±1.97)%,转染后能够有效地抑制荧光素酶质粒在HepG2.2.15细胞内的表达。结论 MPC30DEA70携带的siRNA在HepG2.2.15细胞中有着较高的转染效率,并发挥一定的生物效应,有望成为有效的siRNA载体。
- 孙莉莉张卓琦曹希传杨帆李秀华潘修成
- 关键词：细胞转染
- 白细胞介素2培育的淋巴细胞治疗前后慢性乙型肝炎患者IFN-γ及IL-10的含量变化
- 2004年
- 目的 进一步探讨白细胞介素 (IL) -2培育的淋巴细胞治疗慢性乙型肝炎 (慢乙肝 )的治疗机制。方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测 2 0例慢乙肝患者自体IL -2培育的淋巴细胞治疗前后外周血单个核细胞 (PBMC)培养上清液中细胞因子γ -干扰素 (IFN -γ)及IL -10的含量。结果 慢乙肝患者经自体IL -2培育的淋巴细胞回输治疗后 ,PBMC培养上清液中IFN -γ的含量较治疗前明显升高 ,IL -10含量较治疗前明显下降。结论 IL -2培育的淋巴细胞回输疗法能够使慢乙肝患者PBMC产生IFN -γ的含量增加 ,IL -10含量降低。
- 韩方正李秀华
- 关键词：白细胞介素-2淋巴细胞Γ-干扰素白细胞介素-10
- IL-2培育自体淋巴细胞回输治疗慢乙肝患者NK细胞活性及IL-2R阳性细胞数的变化及意义
- 1999年
- 为进一步探讨该疗法的作用机制及意义,我们观察了该疗法治疗慢乙肝患者前、后自然杀伤细胞(NK细胞)活性及白细胞介素Ⅱ受体(IL-2R)阳性细胞数,报道如下。1 材料与方法1.1 对象 慢乙肝患者29例,按1995年第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准,均为慢性中度活动患者。1年内未使用过免疫制剂,全部为男性,年龄21～51岁,平均35岁,对照组14例,男8例,女6例,年龄19～52岁,平均28岁,乙肝病毒血清标志物均阴性。
- 韩方正张言超吴文漪李秀华
- 关键词：NK细胞活性IL-2R
- LAK细胞治疗慢性活动型乙型肝炎的疗效与机理研究被引量：4
- 1997年
- 应用自体LAK细胞回输治疗40例慢性活动型乙型肝炎患者。疗程结束时，LAK治疗组HBeAg和HBVDNA转阴率分别为22·5％和40％，与对照组相比差异显著（P均＜0.001）。12个月复查HBeAg、HBVDNA转阴率分别达到4O％和68.57％。LAK治疗后患者CD4+细胞数及CD4+／CD8+比，IL－2水平及mIL－2R表达，NK细胞及LAK细胞活性等各项指标均较治疗前明显升高（P均＜0．01）。其中HBeAg转阴的患者，IL－2升高更为显著（P＜0．005）。
- 吴文漪陈明韩方正张言超李秀华
- 关键词：LAK细胞乙型肝炎疗效
- LAK细胞治疗CAH的疗效与IL—2及其受体的变化
- 1998年
- 自体LAK细胞回输治疗慢性活动型乙型肝炎(CAH)40例,疗程结束时,治疗组HBeAg和HBVDNA转阴率分别为22.5%和40%,与对照组相比差异显著(P均<0.001)。疗程结束12个月复查HBeAg、HBV DNA转阴率分别达到40%和68.57%。LAK治疗后患者IL—2水平及IL—2R表达均较治疗前明显升高(P均<0.01)。尤以HBeAg转阴者,IL—2升高更显著(P<0.005)。作者据此对治疗机制进行了探讨。
- 吴文漪陈明张言超李秀华
- 关键词：CAHLAK细胞受体
- 原发性肝癌和乙型肝炎肝硬化患者胸腺近期输出功能初步探讨被引量：3
- 2007年
- 郭海燕陈明汪莉萍葛国洪潘修成李丽李秀华
- 关键词：肝肿瘤肝硬化胸腺
- 实时荧光定量PCR测定胸腺近期输出功能方法的建立和应用被引量：2
- 2007年
- 目的 建立一种准确、快速的检测胸腺输出功能的方法。方法 根据TCRδ基因序列，设计引物和探针，建立实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的方法；并用于检测正常人及慢乙肝PBMCs中TRECs的含量。结果 建立了测定TRECs含量的实时荧光定量PCR方法，产物与预计长度相符，序列正确；最低可扩增出5 copies的模板；重复五次，Ct值的变异系数为1．06％。正常人21-45岁组的TRECs含量为（7767．4±2369．5）copies／10^6 PBMCs，16-20岁组为（28374．4±7820．4）copies／10^6 PBMCs，21-45岁慢乙肝组（6480．9±2031．2）copies／10^6 PBMCs，正常人21-45岁组分别与16-20岁组、同龄慢乙肝组比较差异均有统计学意义，P〈0．05。结论 实时荧光定量PCR检测TRECs的方法特异性强，灵敏度高，重复性好。正常人21-45岁组的胸腺输出功能低于16-21岁组，慢乙肝组低于同龄正常人。
- 李红兵陈明汪莉萍朱学文葛国洪李秀华
- 关键词：胸腺
- 荧光定量PCR检测TRECs的标准品质粒和标准曲线的构建被引量：1
- 2008年
- 目的构建荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的标准品质粒和标准曲线。方法对TCRδ基因进行序列分析，设计一对引物和探针。提取正常人外周血单个核细胞中的DNA，经普通PCR扩增，产物纯化后与pUCM-T载体连接并转化入大肠杆菌DH5α，筛选得到重组成功的质粒。结果重组质粒测序后显示目的片段序列正确，表明TRECs基因片段成功克隆。以10^3～10^7copies／ml不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后，统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系（r=-0．998，P＜0．01）。结论所构建的TRECs标准品特异性和线性关系较好。
- 李红兵陈明朱学文汪莉萍葛国洪李秀华
- 关键词：聚合酶链反应质粒
