李芳芳
- 作品数：14 被引量：20H指数：4
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家科技攻关计划广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生理学更多>>
- 广西巴马小型猪肥胖基因(leptin)成熟肽序列的cDNA克隆、序列分析
- 以广西巴马小型猪的脂肪组织总RNA为模板，通过RT-PCR扩增出巴马小型猪的leptin基因成熟肽序列。经纯化回收后连接到pMD18-T载体上，经鉴定后测序.
本研究的结果表明，本试验克隆到leptin基因成熟...
- 兰干球李芳芳黄雄军郭亚芬王爱德李柏
- 关键词：成熟肽碱基突变小型猪
- 文献传递
- 协变量个数趋于无穷的对数线性Poisson模型的渐近性质
- 1986年Liang和Zeger从广义线性模型推广(GLM)而得到广义估计方程(Generalized estimating equations，GEE)，GEE是对纵向数据进行回归分析的一类重要方法，其主要特点是引入了...
- 李芳芳
- 关键词：高维数据渐近性质广义估计方程
- 文献传递
- 水牛HSP70蛋白的原核表达及其对精液抗冻性的初步验证
- 引言/目的热休克蛋白(HSP)是一组多肽类蛋白家族,因其高度保守,在不同生物种属间的同源性高达70%以上,因而具有广泛的生物学意义。其中HSP70家族为HSPs中最保守和最重要的一族,在大多数生物中含量最多,在应激反应中...
- 龙开旭李芳芳蒋钦扬江明生
- 广西巴马小型猪肥胖基因(leptin)成熟肽序列的cDNA克隆、序列分析
- 以广西巴马小型猪的脂肪组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增出巴马小型猪的leptin基因成熟肽序列,经纯化回收后连接到pMD18-T载体上,经鉴定后测序。本研究的结果表明,本试验克隆到leptin基因成熟肽cDNA序...
- 兰干球李芳芳黄雄军郭亚芬王爱德李柏
- 关键词：广西巴马小型猪LEPTIN基因肥胖基因基因克隆
- 文献传递
- 河流型水牛热休克蛋白70的原核表达及其对精液抗冻性的影响被引量：4
- 2018年
- 试验旨在克隆河流型水牛热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因的CDS区序列,构建HSP70原核表达载体,诱导表达HSP70融合蛋白,进一步研究HSP70蛋白对水牛精液抗冻性的影响。以摩拉水牛精子基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增HSP70基因CDS区序列,将PCR产物与pET30a质粒连接构建重组原核表达质粒,诱导表达HSP70融合蛋白,将获得的表达蛋白作为稀释液组分添加到水牛精液中制作冷冻精液并评定其活力。结果显示,试验成功扩增获得HSP70基因CDS区长为2 155bp的片段;SDS-PAGE及Western blotting分析显示,在70ku处出现一条明显条带,且表达产物可与相应的抗体发生反应;对添加有HSP70蛋白的水牛冷冻精液活力评定结果显示,终浓度为2、4、8mg/mL的HSP70能提高冷冻精液活力,且8mg/mL HSP70组冻精活力最高,但各组间差异均不显著(P>0.05)。综上所述,本试验成功表达了水牛HSP70蛋白,获得了高纯度、有活性的HSP70融合蛋白,外源添加HSP70蛋白可提高水牛冷冻精液的活力,为进一步研究水牛HSP70蛋白的抗冻性保护机理奠定了理论基础。
- 李芳芳李芳芳俸祥仁黄项生潘堂峰江明生江明生邓祝新蒋钦扬蒋钦扬
- 关键词：河流型水牛原核表达精子活力
- 广西巴马小型猪肥胖基因(leptin)成熟肽序列的cDNA克隆、序列分析被引量：6
- 2008年
- 以广西巴马小型猪的脂肪组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增出巴马小型猪的leptin基因成熟肽序列,经纯化回收后连接到pMD18-T载体上,经鉴定后测序。研究结果表明,本试验克隆到leptin基因成熟肽cDNA序列,其长度为441 bp,与GenBank中报道的猪leptin成熟肽cDNA序列同源性高达99.06%,与奶牛、家鼠、马等物种的成熟肽cDNA序列间同源性可达到84.5%以上,证明leptin基因具有较高的保守性。同时发现,与普通猪相比,巴马小型猪leptin基因成熟肽cDNA序列有四处存在碱基突变,均为无义突变。
- 兰干球李芳芳黄雄军郭亚芬王爱德李柏
- 关键词：广西巴马小型猪LEPTIN基因克隆
- 广西巴马小型猪活化素β_A/β_B基因cDNA克隆与序列分析被引量：2
- 2007年
- 目的通过克隆广西巴马小型猪活化素(activin)βA/βB基因cDNA,分析其序列,为研究活化素的生物学功能打下基础。方法提取广西巴马小型猪发情母猪的卵巢总RNA,并以其为模板,以下游特异性引物为反转录引物,在AMV酶作用下合成cDNA;用LA-Taq进行PCR扩增出包括成熟肽在内的activinβA及βB基因的部分序列,把两个序列分别连接到PMD-18载体进行克隆和序列分析。结果包括成熟肽在内的activinβA及βB基因的部分序列长度分别为964 bp和791 bp,两个亚基的序列比较保守,与GenBank上发表的猪activin两个亚基同源性达到99.79%和99.62%。activinβA基因有两个碱基发生突变,其中一个在成熟肽序列上,一个在非编码序列上;βB基因信号肽序列上有三个碱基发生突变,其中一个是同义突变。
- 兰干球黄雄军郭亚芬李芳芳王爱德蒋和生
- 关键词：巴马小型猪
- 广西巴马小型猪促生长激素释放激素成熟肽的克隆及序列分析被引量：4
- 2007年
- 目的扩增广西巴马小型猪促生长激素释放激素(GHRH),分析其序列结构特点。方法以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,用特异性引物扩增GHRH外显子3,再用引物延伸悬挂PCR法扩增GHRH成熟肽,纯化后,连接、转化到大肠杆菌,筛选阳性克隆,测序。结果经测序证实广西巴马小型猪GHRH外显子3及其成熟肽的基因序列与相关文献报道一致。克隆得到的广西巴马小型猪GHRH序列全长为132 bp,其中外显子3基因序列长105bp。同源性比较发现,广西巴马小型猪GHRH外显子3基因序列与GenBank(NCBI)中报到的猪GHRH外显子3相比,同源性为97.14%,有3处发生碱基变化。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列。
- 郭亚芬李芳芳兰干球黄雄军王爱德秦小娥
- 关键词：广西巴马小型猪克隆
- 河流型水牛热休克蛋白表达量及其基因多态性对精液品质的影响
- 2023年
- 为了研究热休克蛋白对河流型水牛精液品质的影响,试验选取年龄相近的摩拉、尼里/拉菲种公牛各8头,采集鲜精检测精子活力,各分为高活力组(≥0.65)和低活力组(<0.65),每组4头。分别提取试验牛的鲜精总蛋白进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印记(Western bolt)、蛋白灰度分析并计算热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白70(HSP70)的相对表达量,对HSP70基因CDS区多态性位点与精液品质性状进行相关性分析。结果:(1)HSP60、HSP70蛋白在2个品种牛的精液中均有表达;高活力组与低活力组的HSP60蛋白相对表达量无显著差异(P>0.05),高活力组HSP70蛋白相对表达量显著高于低活力组(P<0.05)。(2)HSP70基因CDS区多态性位点与精液品质性状存在相关性。在C602T位点,摩拉CC基因型采精量最多(P<0.05),活精子数最多(P<0.05),CT基因型精子抗冻性最强(P<0.05);尼里/拉菲CC基因型精子活力最高(P<0.05),活精子数最多(P<0.05),精子抗冻性最强(P<0.05)。在A1284T位点,摩拉AA基因型活精子数最多(P<0.05)。结论:研究结果进一步验证了活力高的精子HSP70基因表达量高;摩拉、尼里/拉菲公牛HSP70基因CDS区有3个碱基对出现核苷酸多态性,核苷酸多态性产生的不同基因型对其采精量、活精子数、精子抗冻性等性状有影响。初步推断HSP70基因多态性位点可作为选择河流型水牛精液品质性状的辅助遗传标记。
- 李芳芳李芳芳潘堂峰李美珍方奕雄何复明刘瑞鑫刘德玉许鹏江明生
- 关键词：河流型水牛精液品质
- 广西巴马小型猪促生长激素释放激素成熟肽基因克隆及其真核表达质粒对小鼠生长效应的研究
- 促生长激素释放激素(Growth Hormone Releasing Hormone，GHRH)是一种蛋白类激素，由下丘脑合成并分泌。它能特异的诱导垂体生长激素(Growth Hromone，GH)的合成与分泌，对脊椎动...
- 李芳芳
- 关键词：广西巴马小型猪基因克隆真核表达代谢调控
- 文献传递
