李雪梅
- 作品数：4 被引量：63H指数：2
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 空间细胞电融合关键技术的地基研究——烟草细胞的电融合被引量：6
- 1997年
- 本文针对建立空间细胞电融合技术存在的三个主要问题进行了研究。结果表明,用低温(4℃)、融合介质(0.55 mol/L甘露醇)并添加0.1%纤维素酶保存原生质体,72 h内可以使约94%细胞维持无壁状态,同时并未使细胞丧失再生能力,基本满足从地面制备亲本细胞到在微重力条件下进行电融合,对亲本细胞保持无壁状态的要求。为减少剪切力环境对亲本细胞造成的损伤,一方面用超速离心方法对亲本细胞之一去液泡,另一方面用电泳代替蠕动泵混合亲本细胞。而且,由于原生质体壁生长与其膜电位之间存在负相关性,因此利用电泳方法可以有效地富集和优化亲本细胞。根据地面实验结果推测,空间有/无液泡亲本细胞电融合的较适合参数可能为:交流电场强度90V/cm,频率0.8 MHz,排列时间20 s,直流脉冲1.0—1.3 kV/cm,幅宽40μs,两次脉冲。
- 李雪梅王六发刘承宪
- 关键词：细胞融合电融合烟草
- 小麦幼穗胚性愈伤组织诱导及分化过程中内源激素的作用被引量：57
- 1994年
- 2，4-D的浓度及诱导时间的长短影响出愈率和早期体胚的形成，6－BA0．25mg／L或KT0．5mg/L抑制胚性愈伤组织的诱导及分化。胚性能力较强外植体的内源激素含量较高，同时分化过程中胚性愈伤组织的ABA、IAA含量高于非胚性意伤组织，而GA3含量则低于非胚性愈伤组织。
- 李雪梅刘熔山
- 关键词：小麦幼穗胚性愈伤组织内源激素
- 应用ImageMaster^(TM)图象分析系统计算原生质体活力
- 1996年
- 植物原生质体的活力高低是代表原生质体样品质量的重要指标之一,它也反应了用于游离原生质体的原始植物材料本身的质量高低。原生质体活力高证明所用的原始材料质量高,原生质体活力低说明这种材料质量低。因此估算样品中原生质体的活力,是原生质体培养、原生质体融合、基因转化等涉及原生质体的各项生物工程中的常规工作。可是原生质体的计数却是十分费力。为了克服这一困难,我们试图借用Pharmacia公司的ImageMaster^(TM)图象分析系统来完成这一过程。
- 蔡伟明王六发李雪梅刘承宪
- 关键词：原生质体图象分析
- 胡萝卜与烟草原生质体的低温保存被引量：1
- 1997年
- 在较长的时间内，可保持正常生理状态与细胞活性的原生质体的制备及保存技术是进行空间细胞融合实验的前提条件。本研究以０．７ｍｌ／Ｌ的葡萄糖作渗透压，在６～８℃低温条件下经过７２小时保存后，供试原生质体的存活率仍可达８１％，并保持了其长壁与分裂的特性。
- 赵世民徐金相刘根齐刘承宪李雪梅
- 关键词：胡萝卜烟草原生质体
