杜昕波
- 作品数：29 被引量：119H指数：6
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科技资源平台项目国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 产毒素多杀性巴氏杆菌菌落双重PCR检测方法的建立被引量：6
- 2010年
- 为建立快速特异的PCR方法以及同时检测并区分产毒素与非产毒素多杀性巴氏杆菌,本研究根据GenBank登录的多杀性巴氏杆菌KMT1基因和toxA毒素基因序列,设计合成了2对特异引物。特异性试验表明产毒素多杀性巴氏杆菌C51-6扩增出了460bp和1854bp的2条目的片段,而不产毒素多杀性巴氏杆菌、大肠埃希菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌和鸡白痢沙门菌的扩增均为阴性;敏感性试验表明该PCR方法能从含450CFU的菌液中扩增出相应的目的片段。同时用豚鼠皮肤坏死试验和小鼠致死试验对该PCR方法进行了验证。
- 李伟杰赵耘杜昕波康凯陈敏
- 关键词：产毒素多杀性巴氏杆菌双重PCR
- 禽源大肠埃希菌Biolog鉴定和系统发育分析被引量：1
- 2008年
- 采用Biolog和16SrRNA基因序列分析法对中国兽医药品监察所菌种室收集保藏的18株大肠埃希菌(Escherichia coli)进行了鉴定。菌株经纯化培养,用Biolog微生物鉴定系统进行了鉴定,结果表明18株菌株为大肠埃希菌。提取基因组DNA,采用16S rRNA通用引物,用PCR进行16S rRNA基因序列扩增,扩增产物纯化后进行测序。序列经人工校对后用ClustalX1.83软件进行比对分析,采用Mega 3.1软件构建系统发育树,结果表明18株菌株为大肠埃希菌。
- 李伟杰赵耘杜昕波康凯陈敏
- 关键词：大肠埃希菌BIOLOGRRNA系统发育树
- 产毒素多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立
- ＜正＞引言产毒素多杀性巴氏杆菌分泌产生一种由toxA基因编码,约146 ku的皮肤坏死毒素DNT,该毒素由1285个氨基酸组成。目前该菌临床感染的诊断还没有合适的血清学方法。细菌形态观察、生化试验及毒素的豚鼠皮肤坏死试验...
- 李伟杰赵耘杜昕波康凯陈敏
- 关键词：产毒素多杀性巴氏杆菌血清学PCR检测
- 文献传递
- 袋鼠摩根氏菌生物特性鉴定及系统发育分析被引量：16
- 2010年
- 本研究利用Biolog快速鉴定系统、16S rRNA序列分析及传统细菌鉴定方法对3株分离自北京动物园袋鼠肺脏的菌株进行形态学、培养特性、生化特性、小鼠致病性等生物特性的鉴定及系统发育分析。结果表明,3株菌株均为摩根氏菌,对昆明小鼠有强致病性;3株袋鼠摩根氏菌16S rRNA序列与LMG7874模式株同源性均为99.8%,且位于系统发育树的同一分支。
- 赵耘李伟杰杜昕波陈敏康凯陈永林
- 关键词：RRNA系统发育分析
- 多重PCR鉴定不同毒素型的产气荚膜梭菌菌落被引量：6
- 2008年
- 参照文献报道的产气荚膜梭菌α,β,ε,τ毒素基因cpa、cpb、etx及iA序列合成了针对4种毒素基因的4对特异引物,建立了一种简单的产气荚膜梭菌定型的菌落多重PCR方法。结果本所保存的A,B,C,D,E各型产气荚膜梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期条带,而诺维氏梭菌、腐败梭菌和破伤风梭菌的扩增均为阴性;将单个菌落稀释100倍利用此菌落多重PCR仍能扩增到相应的目的片段。并利用此多重PCR对13株不同动物来源的产气荚膜梭菌进行了定型鉴定,并与毒素中和试验鉴定结果进行了比较,结果表明两种方法具有较高的符合率。本方法的建立对于产气荚膜梭菌的快速检测、定型具有十分重要的意义。
- 赵耘杜昕波李伟杰康凯陈敏
- 关键词：产气荚膜梭菌毒素
- 菌种保藏中的细菌鉴定方法被引量：21
- 2009年
- 综述了在菌种保藏工作中目前行业内使用的各种细菌鉴定方法,包括传统方法、仪器的自动化鉴定以及分子生物学方法,并简述了各种方法的原理和优缺点,以期能为行业同仁更好开展菌种保藏、鉴定工作提供帮助。
- 杜昕波赵耘李伟杰
- 关键词：菌种保藏细菌鉴定分子生物学方法
- 猪多杀性巴氏杆菌病防治技术被引量：2
- 2016年
- 传染病传播迅速,影响范围较广,必须从根源了解并提前加以防治,杜绝传染。感染猪多杀性巴氏杆菌病常由于猪场饲养条件太差、气候恶劣加之猪抵抗力较低而引起,会出现最急性、急性、慢性3种常见类型,临床症状多见高温、咳嗽、呼吸困难等,大多因窒息而亡。此病有一定的潜伏期,一般为1~5d,因此要以预防为主,定期注射疫苗,可有效控制猪多杀性巴氏杆菌病的发病率。
- 杜昕波
- 关键词：巴氏杆菌
- 红斑丹毒丝菌SpaA抗原基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测被引量：6
- 2011年
- 参照红斑丹毒丝菌表面抗原A(SpaA)基因的核苷酸序列合成1对引物,对我国生产用红斑丹毒丝菌CVCC43005的SpaA全基因进行了PCR扩增,扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,SpaA基因全长1 881bp,含有1个开放性阅读框,编码626个氨基酸。与已提交的红斑丹毒丝菌血清型1a、1b、2a、2b、5、8、9、12、15、16、17、N型的氨基酸同源性为97.5%～100%,血清型4、6、11、19、21的氨基酸同源性为52.8%～55.2%。与已提交的丹毒丝菌血清型18的氨基酸同源性为57.5%～58.0%。采用Chou-Fasman和Karplus-Schulz方案预测蛋白质的二级结构和柔性区域;运用Kyte-Doolittle方案预测氨基酸的亲水性,按Jame-son-Wolf方案预测抗原指数,利用Emini方案预测蛋白质的表面可及性。对预测结果综合分析,推测最有可能的B细胞表位位于N端的59～64、85～91、174～186、193～201、212～215、221～231、266～275、278～288、291～308、314～327、329～349、356～376、403～456、508～516、528～537、568～576和607～626。
- 李伟杰赵耘康凯岂晓鑫杜昕波陈敏
- 关键词：红斑丹毒丝菌
- 利用菌落多重PCR方法进行不同动物来源多杀性巴氏杆菌鉴定的研究被引量：4
- 2010年
- 参照文献报道的多杀性巴氏杆菌种和荚膜型的特异基因合成6对特异引物,建立多杀性巴氏杆菌鉴定的菌落多重PCR方法,结果5株多杀性巴氏杆菌荚膜型参考菌株均扩增出了相应的预期片段,而支气管败血波氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、大肠埃希菌的扩增均为阴性。利用此多重PCR方法对48株不同动物来源的多杀性巴氏杆菌进行了鉴定和荚膜型分型,同时与间接血凝试验以及Biolog细菌快速鉴定系统进行比对,结果表明,所建立的多重PCR方法与间接血凝试验、Biolog细菌快速鉴定系统的符合率均达到100%。
- 赵耘杜昕波李伟杰陈敏康凯
- 关键词：多杀性巴氏杆菌
- 日本兽用抗菌药耐药性监控系统及风险管理被引量：3
- 2015年
- 介绍日本兽用抗菌药耐药性监控系统并分析日本食品动物源细菌耐药现状和抗菌药使用情况,以期为我国动物源细菌耐药性监控管理提供参考和借鉴。
- 马苏张晶杜昕波
- 关键词：兽用抗菌药耐药性
