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信号转导抑制剂对TNFβ诱导L929细胞凋亡的研究被引量：2: 2001年; 本文采用 FDA- PI荧光染色 ,DNA电泳和流式细胞仪等实验手段研究了本实验室自行重组并纯化的人 TNFβ对 L92 9细胞的细胞毒效应 ,结果表明 TNFβ主要是诱导 L92 9细胞以凋亡的形式死亡 .实验还采用 8种信号转导抑制剂 ,观察它们对 TNFβ杀伤 L92 9细胞的影响 ,以探讨细胞凋亡的信号转导途径 .初步研究表明 :磷脂酶 A2 ,Ca2 + 通道、丝氨酸蛋白酶的抑制剂能抑制 TNFβ对 L92 9细胞的杀伤 ,而且抑制剂的持续存在能更有效地发挥这一抑制作用 ;相反地 ,蛋白激酶 C和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂可促进凋亡 ;而环加氧酶、磷脂酰肌醇 -; 李芳芳杨帆周晴马志章丁仁瑞邱莲女周永列; 关键词：L929细胞细胞凋亡细胞毒效应抑制率

罗氏沼虾MSG蛋白对精子明胶水解活性影响的功能被引量：1: 2013年; 雄性生殖系统中的蛋白酶被认为在生殖过程中起着十分关键的作用.不同于哺乳动物生殖系统的蛋白酶,甲壳类精子酶类的研究相对较少.在先前的研究中,我们鉴定了一种新型的罗氏沼虾精子明胶酶(MSG),发现它可以特意地被MRPINK抑制.然而,MSG参与到生殖过程的功能仍未阐明.本研究Western blotting的结果显示,MSG蛋白分布在雄性生殖系统的输精管和壶腹中,在精巢中没有分布;免疫组化和免疫荧光技术结果表明,MSG只分布在输精管和壶腹的内壁表皮细胞核精子的基部.为进一步研究MSG在罗氏沼虾体内的生理功能,采用RNA干涉的方法使MSG基因沉默,通过半定量PCR和Western blotting检测发现,干涉后个体内MSG核酸水平和蛋白水平与对照组相比均下降了80%以上.利用明胶SDS-PAGE和明胶薄层分析方法发现,干涉后精子的蛋白水解活力明显降低.以上结果表明,MSG在罗氏沼虾精子的水解蛋白活性方面起着重要作用.; 杨帆钱叶青马文明李晔杨劲树杨卫军; 关键词：受精雄性生殖系统

硫氧还蛋白的结构及在生物抗氧化中的功能被引量：8: 2011年; 硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)是广泛存在于原核与真核生物体内的氧化还原调节蛋白。Trx通过对目标蛋白质进行还原,从而调节机体的氧化还原平衡。Trx与硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)及NADPH共同组成硫氧还蛋白系统参与众多生理过程。细胞中的活性氧是导致生物氧化胁迫的一个主要方面。Trx可以通过对细胞内被氧化的二硫键的还原来修复机体的氧化损伤,并通过这种方式防止机体衰老。同时,Trx系统可以与其它氧化还原系统如谷胱甘肽(GSH)系统协调配合,并消除体内过多的活性氧。; 马宇光杨帆杨卫军; 关键词：硫氧还蛋白氧化胁迫活性氧

基于通识教育理念的合成生物学课程设计与实践被引量：1: 2022年; 合成生物学作为生物学中新的分支学科,发展迅速,理论研究和应用潜力巨大,在带来了很多新的研究理念和研究方法的同时,给高校教学也带来了新的挑战。目前就合成生物学课程而言,国内可供参考的教学经验不多。文中以浙江大学“博雅技艺”类通识课程—“合成生物学”为例,从课程背景、课程设计、课程实施情况、课程成果与存在问题等方面,全方位地阐述和讨论了基于通识教育理念的合成生物学课程的构建和实施。希望在为课程自身进一步地优化做好分析总结的同时,抛砖引玉,为国内其他高校的类似课程提供有益的借鉴和参考。; 杨帆杨帆; 关键词：通识课程合成生物学

“双一流”背景下非生物专业生命科学实践类系列特色通识课程的建设与探索被引量：3: 2021年; 生命科学是与人类关系最密切的学科,也是众多科学领域中发展迅速且交叉性强的实验性学科。"双一流"建设背景下,人才培养以全面发展为导向,这对大学生生命科学素养和综合能力的培养提出了迫切需求。以通识课程体系改革为契机,积极探索并成功建设面向非生物专业学生的8门生命科学实践类系列通识课程,课程内容涵盖生命科学的各个分支学科或方向,培养具有生命科学知识和素养并具有一定实践能力和创新能力的复合型人才,可为高校实验教学中心通识课程开设和实验教学改革提供参考和借鉴的经验。; 霍颖异黄爱军杨志坚杨志坚徐程杨帆杨帆史影吴敏; 关键词：生命科学

IFNγ-LTα与LTα诱导L929细胞凋亡信号转导的初步研究被引量：1: 2002年; 目的　研究融合蛋白IFNγ LTα诱导L92 9细胞凋亡的信号转导机制 ,并与LTα相比较。方法　用结晶紫染色法观察细胞毒效应 ;用检测试剂盒检测caspase 8和 3活性的变化 ;观察 3种信号转导分子的抑制剂对IFNγ LTα和LTα诱导的细胞毒效应的影响。结果　IFNγ LTα能诱导L92 9细胞凋亡及胞内caspase 8和 3的活性变化 ,但两种caspase产生的时间和幅度有所不同。PKC的抑制剂可促进IFNγ LTα和LTα对L92 9细胞的杀伤 ;而PLA2及Ca2 +通道的抑制剂对杀伤则有明显的阻断作用 ,但对LTα的阻断强于对IFNγ LTα的阻断。结论　IFNγ LTα融合蛋白的抗肿瘤活性强于LTα ,其信号转导特征有别于LTα。信号分子caspase与PKC、PLA2、Ca2; 梁赤周丁鸣余建法杨帆马志章; 关键词：L929细胞信号转导结晶紫染色法

三疣梭子蟹卵黄磷蛋白纯化及其ELISA测定方法被引量：6: 2011年; 采用凝胶过滤层析法纯化了三疣梭子蟹成熟卵巢的卵黄磷蛋白(vitellin,Vn),采用变性凝胶电泳(SDS-PAGE)确定了Vn亚基数量和分子量,以纯化的Vn为抗原,制备了三疣梭子蟹Vn多克隆抗血清,纯化后得到Vn抗体,在此基础上比较和优化了三疣梭子蟹Vn测定的酶联免疫吸附法(ELISA)参数,建立了稳定的三疣梭子蟹Vn含量测定的ELISA方法。结果表明:(1)SDS-PAGE显示三疣梭子蟹成熟卵巢中的Vn含有分子量为100、75和66 ku的3个亚基,Western-blotting检测表明,这3个亚基均具有较强的免疫特异性;(2)样品直接包被法比双抗体夹心法具有更高的线性相关性,Vn抗体最佳稀释倍数为1∶90 000,最佳包被时间为8 h,一抗和二抗反应时间分别为2 h和1 h,显色时间为20 min;(3)该方法定性检测的灵敏度为14.9 ng/mL左右,标准曲线方程为y=0.000 9x++0.399 1(R2=0.986 1),其中x和y分别代表Vn浓度和OD450值,工作范围为200～900 ng/mL;(4)应用该方法测定三疣梭子蟹卵巢中Vn含量,结果表明,批次内和批次间平均变异系数分别为3.59%和3.10%,重复性良好。; 张艳吴旭干杨帆刘智俊成永旭; 关键词：三疣梭子蟹卵黄磷蛋白纯化酶联免疫吸附法

γTNF-β与TNF-β对L929细胞的细胞毒作用及其信号转导的初步研究: ＜正＞本文检测了由本实验室自行重组并纯化的2种细胞因子-γTNF-β（IFN-γ和TNF-β的融合蛋白）及TNF-β对L929靶细胞的细胞毒效应,用结晶紫染色法试验的结果表明,在相同剂量（100U/ml）的条件下,TN...; 梁赤周马志章丁鸣杨帆丁仁瑞; 文献传递

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杨帆