林勇
- 作品数：25 被引量：168H指数：7
- 供职机构：上海市静安区中心医院更多>>
- 发文基金：复旦大学附属华山医院教学改革研究项目上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程文化科学更多>>
- 微小RNA-141对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响被引量：7
- 2017年
- 目的探讨上调微小RNA-141模拟物（miR-141mimics）表达对肝癌细胞（HepG2）增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测正常肝上皮细胞（L02）和肝癌细胞（HepG2）中miR-141的差异表达。以合成的miR-141模拟物转染HepG2细胞作为实验组（miR-141组），以空白对照（CON组）和阴性对照（miR—NC组）作为对照组。采用qPCR检测各组细胞中miR-141表达情况，CCK-8法检测细胞的增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果qPCR结果显示，HepG2中miR-141相对表达（0．64±0．13）明显低于L02（1．00±0．18），差异有统计学意义（P〈0．05）。转染后，miR-141组细胞中miR-141相对表达（3．33±0．66）明显高于CON组（1．00±0．17，P〈0．05）和miR—NC组（1．08±0．14，P〈0．05）。CCK8结果显示，miR-141组在转染后48、72、96h相对吸光度值分别为（0．67±0．07）、（1．17±0．05）、（1．36±0．03），均明显低于CON组[（0．81±0．02）、（1．42±0．03）、（1．73±0．05）]和miR—NC组[（0．78±0．01）、（1．38±0．02）、（1．69±0．01），均P〈0．05]。细胞凋亡检测结果显示，miR-141组细胞凋亡率[（11．81±0．23）％]明显高于CON组[（4．18±0．18）％]和miR—NC组[（4．04±0．08）％]，差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞周期检测结果显示，miR-141组S期细胞[（19．89±2．78）％]明显少于CON组[（31．87±1．00）％]和miR—NC组[（30．49±1．73）％]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；而miR-141组GO／G1期细胞[（74．74±2．03）％]明显多于CON组[（60．85±1．69）％]和miR．NC组[（60．93±1．95）％]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论HepG2细胞中miR-141低表达。上调miR-141表达能明显抑制HepG2细胞增殖，促进细胞凋亡及改变细胞周期的分布。
- 陈淑英张敬军林勇
- 关键词：肝癌细胞增殖凋亡细胞周期
- 2017年上海市细菌耐药性监测被引量：19
- 2019年
- 目的了解2017年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市49所医院的临床分离菌进行药敏试验。包括30所三级医院(含3所儿童医院)和19所二级医院。采用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2017年版标准判断结果。结果共获134078株临床分离菌,其中革兰阳性菌40243株,占30.0%;革兰阴性菌93835株,占70.0%。二级医院和三级医院菌株分别占29.0%和71.0%。在二、三级医院中革兰阳性菌和革兰阴性菌各为25.4%和74.6%、31.9%和68.1%。MRSA和MRCNS在各自菌种中的检出率分别为49.1%和79.7%。二级医院、三级医院的MRSA和MRCNS检出率分别为53.2%和72.1%、47.7%和82.2%。葡萄球菌属中未发现万古霉素耐药株。1041株儿童非脑膜炎肺炎链球菌分离株中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药株(PRSP)分别占84.3%、7.8%和7.9%;330株成人分离株PSSP、PISP和PRSP分别为89.4%、4.2%和6.4%。检出5株(0.1%)万古霉素耐药粪肠球菌、64株(1.2%)万古霉素耐药屎肠球菌,经过PCR测序确认的菌株中主要为vanA基因型。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为54.9%、35.1%和47.6%。上述产ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为53.7%、31.5%、44.0%和55.5%、37.0%、50.0%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为11.1%和11.0%,二级医院、三级医院分别为9.0%和9.2%、12.2%和11.9%,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的检出率为11.9%,其中73.4%是肺炎克雷伯菌。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中出现对大多数测试药物耐药而仅对1～2种抗菌药物敏感的广泛耐药株,二级医院和三级医院分别为64株、357株、7株、25株和412株、1129株、38株、45株。结论目前主要临床分离菌对于常用抗菌药物的耐药性仍甚为严重,尤其是多重耐药的
- 杨洋郭燕朱德妹胡付品汪复蒋晓飞刘云王靖王敏周军王传清王爱敏应春妹高晶方毅张景皓袁轶群王峰沈芳胡娟喻靓张菁李华茵黄声雷胡海清刘耀婷汤瑾吴琼刘庆中汤荣张泓王春孙康德虞中敏钟政荣瞿跃红潘秋辉黄卫春孙景勇韩立中李丽周敏李敏张灏旻
- 关键词：细菌耐药性监测碳青霉烯类耐药
- 华山医院临床实验室员工履职能力评估体系的建立被引量：2
- 2016年
- 美国病理学院(CAP)对临床实验室员工履职能力的评估要求体现在CAP检查单的相关条款中。复旦大学附属华山医院检验医学科依据CAP的要求从岗位设置、岗位职责描述、履职能力培训与评估、员工档案建立4个方面建立起员工履职能力评估体系。经过15年的临床实践,证明该体系对于提升检验科管理水平、保证检验全程质量有实际意义。
- 林勇田月如康志华
- 焦磷酸测序法快速检测胰腺癌K-ras基因点突变被引量：1
- 2008年
- 目的建立基于焦磷酸测序技术的胰腺癌K-ras基因点突变的检测方法，并与Sanger测序法作一比较。方法用焦磷酸测序法（Pyrosequencing）和Sanger测序法（Sanger sequencing）分别在10名正常胰腺组织、49例胰腺癌、11例慢性胰腺炎、18例胰腺良性囊肿、7例胰岛素癌、9例壶腹癌、7例胆管癌及7例十二指肠乳头癌石蜡包埋组织的DNA中检测K-ras基因12密码子点突变。结果采用上述两种方法在所有正常胰腺组织、慢性胰腺炎、胰腺良性囊肿、胰岛素癌、壶腹癌、胆管癌及十二指肠乳头癌均未见K-ras基因点突变，而采用焦磷酸测序法发现胰腺癌石蜡包埋组织K-ras基因点突变率为71．4％（35／49），显著高于采用Sanger测序法发现胰腺癌石蜡包埋组织K-ras基因点突变率（61．2％，30／49）。结论焦磷酸测序法较Sanger测序法更为敏感，且焦磷酸测序法准确、快速、高通量，适合临床标本的批量测定。
- 林勇关明王蓓吕元
- 关键词：胰腺肿瘤点突变
- 2016年上海市细菌耐药性监测被引量：19
- 2017年
- 目的了解2016年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市47所医院的临床分离菌进行药敏试验。包括28所三级医院(床位数31 373张)和19所二级医院(床位数16 311张)。采用CLSI 2016年版标准判断结果。结果 12 2 548株临床分离菌,革兰阳性菌35 522株,占29.0%;革兰阴性菌87 026株,占71.0%。分离菌二级医院和三级医院分别占28.9%和71.1%;其中革兰阳性菌和革兰阴性菌在二、三级医院中分别占25.8%和74.2%、30.3%和69.7%。MRSA和MRCNS的检出率分别为48.7%和77.2%。MRSA、MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为55.9%、73.3%和45.9%、78.6%。葡萄球菌属中未发现万古霉素耐药株。1 111株儿童非脑膜炎肺炎链球菌中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药株(PRSP)的检出率分别为77.4%、13.2%和9.4%;上述细菌在二级医院中分别占97.8%、2.2%、0;在三级医院中分别占76.5%、13.7%、9.8%。285株成人分离肺炎链球菌PSSP、PISP和PRSP分别为94.0%、4.2%和1.8%;上述细菌在二级医院中分别占93.7%、5.3%、1.0%;在三级医院中分别占94.2%、3.7%、2.1%。发现37株屎肠球菌(二级医院14株,三级医院23株)和25株粪肠球菌(均分离自三级医院)耐万古霉素。根据PCR测序,多数万古霉素耐药肠球菌(VRE)为van A基因型。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为52.2%、30.9%和29.8%。上述产ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为55.1%、33.6%、34.0%和51.0%、29.7%、28.0%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南、美罗培南的总耐药率分别为8.9%、9.1%,二级医院和三级医院中耐药率分别为6.6%、7.1%和9.9%、10.0%。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中出现对所有测试抗菌药物耐药的广泛耐药株,在二级医院和三级医院分别为223株、63株、10株、4株和224株、20
- 郭燕朱德妹胡付品汪复蒋晓飞王靖李虎王敏周军王传清王爱敏应春妹高晶方毅张景皓袁轶群王峰沈芳刘亚隽喻靓张菁李华茵黄声雷胡海清刘耀婷汤瑾吴琼刘庆中汤荣张泓王春孙康德虞中敏钟政荣瞿跃红潘秋辉黄卫春孙景勇韩立中李丽周敏李敏张灏旻卫颖珏杨海慧
- 关键词：细菌耐药性监测
- 巢式聚合酶链反应检测A组轮状病毒基因型的研究被引量：2
- 2007年
- 目的用巢式聚合酶链反应(PCR)对A组轮状病毒常见G、P基因型进行检测。方法根据A组轮状病毒不同型别共有的VP4、VP7基因设计的引物分别用于G、P分型的第1次PCR扩增,然后用可以区分不同G型和P型的A组轮状病毒的引物进行第2次PCR扩增。对不同型别A组轮状病毒标准毒株和68例A组轮状病毒腹泻的粪便标本进行了G、P型别的检测。结果不同型别A组轮状病毒标准毒株分别扩增出不同长度片段的条带。68例被检测的A组轮状病毒腹泻粪便标本中G分型以G3为主,P分型以P8为主,其余型别少见。结论巢式PCR检测A组轮状病毒基因型的分型具有较高的灵敏度,操作简便快速,适用于临床检测。
- 林勇李敏马慧丽蒋晓飞
- 关键词：轮状病毒巢式聚合酶链反应基因型
- 微小RNA在胶质瘤中的作用及机制研究进展被引量：1
- 2016年
- 胶质瘤是中枢神经系统中最常见的高致死率恶性肿瘤。微小RNA(mi RNA)通过相关靶点调节下游信号通路,在胶质瘤中起着重要作用。因此,深入了解mi RNA在胶质瘤中的作用及机制将为mi RNA今后作为临床诊疗指标提供了新的思路和理论依据。
- 陈秋丹林勇
- 关键词：微小RNA胶质瘤生物标志物
- BD FACSCanto Ⅱ流式细胞仪方法学性能验证被引量：5
- 2016年
- 目的对BD FACSCantoⅡ流式细胞仪的主要分析性能进行方法学验证。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关参考资料所提供的方案,在BD FACSCantoⅡ流式细胞仪上对科室常用的流式检测项目(外周血淋巴细胞亚群:CD3^+T细胞、CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、B细胞和NK细胞)的精密度、准确度、线性范围和参考区间进行验证,将其结果与生产商声明的性能指标进行比较。结果 BD FACSCantoⅡ流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群的精密度、准确度、线性范围和参考区间均与生产商所示的性能参数相符。结论 BD FACSCantoⅡ流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群的方法学性能良好,测量结果准确、可靠且重复性好,能够满足临床的需要。
- 陈淑英陈健林勇时朝辉
- 关键词：流式细胞仪外周血淋巴细胞亚群
- 血清胃蛋白酶原和胃泌素-17对萎缩性胃炎及胃癌患者诊断价值被引量：50
- 2016年
- 目的探索血清胃蛋白酶原（pepsinogen，PG）Ⅰ，PGⅡ和胃泌素-17（gastrin-17，G-17）对萎缩性胃炎及胃癌患者的早期临床诊断价值。方法研究采用观察性病例-对照研究，共430例受检者纳入研究。血清测试前，受检者经活检组织病理学检查证实。根据病理结果将受检者分为非萎缩性胃炎160例、萎缩性胃炎118例、胃癌152例，用酶联免疫吸附试验方法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清 PGⅠ，PGⅡ和 G-17含量，并计算 PGⅠ／PGⅡ比值。结果与非萎缩性胃炎组相比，萎缩性胃炎组血清PGⅠ和 G-17均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05），胃癌组血清 PGⅠ， PGⅡ，PGⅠ／PGⅡ及 G-17均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；与萎缩性胃炎组相比，胃癌组血清 PGⅠ和 G-17均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。根据受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC），PGⅠ，PGⅡ，PGⅠ／PGⅡ及G-17诊断萎缩性胃炎的最佳临界值为84.706μg／L，10.873μg／L，11.008和8.265 pg／L，诊断胃癌的最佳临界值为65.145μg／L，10.089μg／L，6.375和4.971 pg／L。结论血清 PGⅠ，PGⅡ，PGⅠ／PGⅡ及 G-17水平低下是萎缩性胃炎及胃癌生物学标志，对胃癌早期诊断具有重要的临床意义。
- 杨建华王炳华林勇
- 关键词：胃蛋白酶原胃泌素-17萎缩性胃炎胃癌GASTRIN-17
- MS—HRM检测结直肠癌患者外周血AKAP12基因及其临床意义被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨MS-HRM法定量检测结直肠癌患者外周血中AKAP12基因甲基化程度及其临床意义.方法 采用MS-HRM法定量检测80例结直肠癌患者和20名健康人外周血中AKAP12基因的甲基化水平,并分析评价其与病理分期分级的关系.同时对MS-HRM法的重复性和与传统MSP法检测的灵敏度和检出率进行比较.结果 MS-HRM法从80例结直肠癌患者中检测到38例（47.5%）AKAP12基因启动子区域不同程度的甲基化患者（甲基化1%～20%的24例,20%～60%的12例,60%～100%的2例）,20名健康人中仅检测到甲基化〈10%的2名.MS-HRM法检测AKAP12基因甲基化的灵敏度（1%）优于传统的MSP法（10%）.AKAP12基因甲基化水平与结直肠癌患者的年龄、性别的差异无统计学意义（x2分别为3.13、1.70,P均〉0.05）,但与结直肠癌的Dukes分期和分化程度的差异均有统计学意义（x2分别为5.93、8.41,P均=0.01）.结论 外周血MS-HRM定量检测AKAP12基因甲基化程度的方法比传统MSP法灵敏度更高,AKAP12基因甲基化有望成为结直肠癌进展评估的分子指标.
- 刘维薇关明李骥胡婷婷李敏刘春芳林勇魏取好吕元
- 关键词：甲基化结直肠肿瘤
