梁梦凡
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市科委科研计划项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 谷氨酰胺对脓毒血症大鼠肠淋巴液抑制RAW264.7细胞分泌功能作用的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究静脉注射谷氨酰胺(Gln)对脓毒血症大鼠肠淋巴液抑制RAW264.7细胞分泌功能作用的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、脓毒血症组(CLP)和Gln组,每组10只。取CLP组和Gln组大鼠,以盲肠结扎穿孔法制备脓毒血症模型,术后10 min内Gln组经尾静脉注射Gln 0.75 g/kg,Sham组和CLP组注射等量生理盐水。各组分别取5只大鼠引流肠淋巴液,另5只于术后6 h时采集血样。将各组淋巴液分别与RAW264.7细胞共孵育4 h,收集培养上清液。ELISA法测定肠淋巴液和细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的浓度,比色法检测肠淋巴液Gln及血浆D-乳酸浓度。结果 CLP组和Gln组肠淋巴液中TNF-α和IL-6的含量均明显高于Sham组(P<0.05);CLP组细胞培养上清液中TNF-α和IL-6的浓度显著低于Sham组(P<0.05),而Gln组细胞培养上清液中TNF-α浓度显著高于CLP组(P<0.05)。三组肠淋巴液中Gln浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。Gln组血浆中D-乳酸浓度明显低于CLP组(P<0.05)。结论脓毒血症大鼠肠淋巴液对LPS激活后的RAW264.7细胞分泌功能有明显抑制作用,Gln能部分减轻该抑制作用。
- 梁梦凡王学敏薛瑛江伟
- 关键词：谷氨酰胺脓毒血症肠淋巴液白介素6
- 谷氨酰胺对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子分泌的影响被引量：8
- 2008年
- 目的研究谷氨酰胺(Gln)体内作用对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子分泌的影响。方法昆明小鼠60只,随机分为假手术组(Sham组,n=20)、手术对照组(Con组,n=20)、术后Gln处理组(Gln组,n=20)。Gln组和Con组小鼠采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型,建模后即刻经尾静脉分别注射Gln 0.75 g/kg和等量生理盐水;Sham组小鼠仅开腹翻动盲肠,术后处理同Con组。三组均于6 h后采血收集血清,腹腔灌洗分离巨噬细胞;ELISA法测定巨噬细胞裂解液及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10的水平;RT-PCR测定巨噬细胞TNF-αmRNA表达;Western blotting检测巨噬细胞热休克蛋白72(HSP72)表达。结果Gln组腹腔巨噬细胞裂解液中TNF-α和IL-6水平明显低于Con组(P<0.01或0.05),而与Sham组相比无显著差异(P>0.05)。Gln组血清中TNF-α水平明显低于Con组(P<0.05),但两组TNF-α、IL-6和IL-10水平均高于Sham组。Gln组小鼠腹腔巨噬细胞HSP 72表达较Con组和Sham组显著升高(P<0.01)。Con与Gln组巨噬细胞TNF-αmRNA表达无显著差异,但均明显高于Sham组(P<0.01)。结论Gln体内作用可以抑制脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-α和IL-6,同时增加其HSP 72的表达。
- 袁媛王学敏梁梦凡江伟
- 关键词：谷氨酰胺巨噬细胞细胞因子热休克蛋白
- 谷氨酰胺对脓毒症大鼠血清免疫刺激性的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察脓毒症大鼠血清对RAW264．7细胞的免疫刺激作用及谷氨酰胺（Gin）的影响，并探讨其保护作用的机制。方法SD大鼠18只，随机分为假手术组（sham组）、脓毒症组、Gin处理组（GLN组）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备大鼠脓毒症模型，术后即刻从尾静脉注射Gln0．75g／kg（GLN组）或等量生理盐水（sham和脓毒症组）。3组均于术后6h采血并取肺组织，并将血清与RAW264．7细胞孵育4h后收集上清液。鲎试剂法定量测定血浆内毒素浓度；比色法检测血浆D-乳酸和血清Gin水平；酶联免疫吸附法（ELISA）测定肺组织及血清作用于RAW264．7细胞后上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果3组血清Gln浓度无明显差异。GLN组血浆D-乳酸和内毒素水平明显低于脓毒症组[D-乳酸：（2．04±0．13）mg／L比（5．08±0．47）mg／L；内毒素：（0．011±0．003）mg／L比（5．085±1．647）mg／L，P均〈0．01]。脓毒症组血清刺激内毒素激活的RAW264．7细胞释放炎症因子明显高于sham组，GLN组明显低于脓毒症组（P〈0．05或P〈0．01），而GLN组与sham组比较差异无统计学意义。GLN组肺组织匀浆中TNF—α浓度明显低于脓毒症组[（31．01±14．23）μg／L比（80．18±26．27）μg／L，P〈0．01]。结论脓毒症大鼠血清对巨噬细胞释放炎症因子有明显的促进作用，而Gin可抑制脓毒症血清的该作用，这可能与Gin改变肠道通透性有关。
- 薛瑛王学敏梁梦凡黄炎哲江伟周明
- 关键词：谷氨酰胺脓毒症血清巨噬细胞
- 球囊导管血管阻断术的临床应用被引量：3
- 2009年
- 黄焱哲梁梦凡王学敏
- 关键词：球囊导管严重腹部创伤HUGHES骨盆骨折手术治疗供血动脉
- 谷氨酰胺诱导热休克蛋白对急性肺损伤的保护作用被引量：8
- 2007年
- 热休克蛋白的表达对急性肺损伤(ALI)有保护作用,而以往的诱导药物大多有毒有害,限制了其临床应用。谷氨酰胺能够诱导热休克蛋白表达,对ALI和脓毒症产生保护作用,具有潜在的临床应用价值。
- 梁梦凡王学敏江伟
- 关键词：热休克蛋白急性肺损伤谷氨酰胺
- 谷氨酰胺在脓毒症中保护作用的机制研究
- 目的：①探讨不同浓度谷氨酰胺(Gln)给予不同预处理后对小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7热休克蛋白(HSP)72表达和细胞因子释放功能的影响。②观察静脉注射Gln后，脓毒症大鼠肠淋巴液对RAW264.7细胞细胞因子释放...
- 梁梦凡
- 关键词：脓毒症治疗巨噬细胞谷氨酰胺实验药理
- 文献传递
- 谷氨酰胺在体内／外对巨噬细胞炎症因子分泌的影响被引量：2
- 2008年
- 目的观察谷氨酰胺（Gln）在体内／外条件下对巨噬细胞炎症反应及热休克蛋白（HsP）表达的影响，探讨G1n在脓毒症时抑制体内炎症反应的机制。方法实验1：将培养的腹腔巨噬细胞株RAw264．7分为Gln0、0．5和8mmol／I。3组，分别于内毒素脂多糖（LPS）刺激后0、1、4、12和24h收集细胞及上清液。实验2：45只昆明小鼠被随机均分为假手术（Sham）组、模型组、Gln组；采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备小鼠脓毒症模型，术后即刻从尾静脉注射Gln0．75g／kg（Gln组）或等量生理盐水（Sham组和模型组）。6h后采血，腹腔灌洗分离巨噬细胞。用酶联免疫吸附法（ELIsA）检测细胞上清液、血清、巨噬细胞裂解液中肿瘤坏死因子-a（TNF—a）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-10浓度；用蛋白质免疫印迹法检测巨噬细胞HSP72蛋白表达。结果体外条件下G1n可显著促进RAw264．7细胞释放TNF—a、IL-6和IL-10，呈剂量和时间依赖性（P〈O．05或P〈0．01）；LPS刺激4h后，Gln8mmol／L组RAW264．7细胞HSP72表达显著增加（P均〈0．01）。体内条件下，Gln组腹腔巨噬细胞TNF—a、IL-6含量均明显低于模型组（P〈0．01和P〈0．05），3组间IL—10含量比较差异无统计学意义；Gln组血清TNF—a浓度明显低于模型组（P〈0．05），两组血清IL-6、IL-10浓度差异无统计学意义；GIn组巨噬细胞HSP72表达较模型组和Sham组均显著升高（P均〈0．01）。结论G1n体外作用时可显著促进巨噬细胞释放TNF—a和IL-6，且该作用不能被HSP72表达所抑制。体内作用条件下Gln抑制腹腔巨噬细胞合成TNF—a和IL-6。体外和体内条件下Gln都可诱导巨噬细胞表达HSP72，提示HSP72表达可能不是G1n在脓毒症时抑制机体炎症反应的主要机制。
- 王学敏梁梦凡袁媛江伟
- 关键词：谷氨酰胺巨噬细胞炎症因子热休克蛋白
- 谷氨酰胺对RAW264.7细胞HSP 72表达和TNF-α释放的影响
- 2009年
- 目的探讨不同条件下谷氨酰胺(Gln)对小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7热休克蛋白(HSP)72表达和肿瘤坏死因子(TNF)-α释放的影响。方法将RAW264.7细胞与含Gln(0、0.5和8 mmol/L)的培养液分别进行下列处理:①共同培养165 min后,加入脂多糖(LPS)刺激0、1、4、12和24 h;②共同培养的同时行热应激预处理45 min,37℃培养2 h后加入LPS刺激4 h;③共同培养的同时行DON预处理,165 min后加入LPS刺激4 h;④两者与含LPS的培养液共同培养1 h,改用含0.5 mmol/L Gln和LPS的培养液继续培养4 h。ELISA法检测细胞上清液TNF-α的浓度,Western blotting检测细胞HSP72蛋白表达。结果①LPS刺激后4 h,RAW264.7细胞均有HSP 72表达,经8 mmol/L Gln培养者较经0和0.5 mmol/L Gln培养者HSP 72表达显著增加(P<0.01),而24 h时三者HSP 72表达差异无统计学意义(P>0.05);Gln促进TNF-α释放,与Gln呈时间和浓度依赖关系。②热应激显著促进Gln诱导的HSP 72表达(P<0.01),抑制Gln诱导的TNF-α释放,但TNF-α释放仍随Gln浓度增加而增加。③DON预处理不影响HSP 72的表达,但显著抑制TNF-α释放(P<0.01)。④短时间不同浓度Gln处理,与0.5和8 mmol/L Gln共同培养者较与0 mmol/L Gln共同培养者HSP 72表达显著增加(P<0.01);TNF-α的释放随Gln浓度增加有升高趋势,但三者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论Gln可诱导RAW264.7细胞表达HSP 72,但并不足以抑制其TNF-α释放。除诱导HSP 72表达外,Gln在脓毒症时调节机体炎症反应还可能存在其他机制。
- 梁梦凡王学敏袁媛薛瑛江伟
- 关键词：谷氨酰胺热休克蛋白72肿瘤坏死因子-Α
