梁荣
- 作品数：10 被引量：113H指数：7
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 小牛胸腺新胸腺活性因子(TAF-Ⅰ)的纯化和鉴定被引量：1
- 2002年
- 以小牛胸腺为原料 ,通过匀浆、冻融、超滤、SephadexG 15凝胶过滤、DEAE SephadexA 2 5阴离子交换层析和反相高效液相色谱等步骤 ,分离得到了胸腺活性因子Ⅰ (thymusactivityfactorⅠ ,TAF Ⅰ ) .5 0 0g小牛胸腺组织中纯化得到了 0 92mg胸腺活性因子Ⅰ .经ESI MS质谱鉴定 ,结果显示其分子量为 6 18 8.氨基酸组成分析显示它由Ala、Gly、Glu、Gln、Lys、Ser 6种氨基酸残基组成 .体外生物学活性实验证明 ,TAF Ⅰ能显著促进人外周血淋巴细胞的E
- 刘希成刘征马红梁荣张彦明郑昌学段明星
- 关键词：小牛胸腺纯化
- H5N1亚型禽流感病毒HA基因DNA疫苗的构建和活体电击免疫试验初报被引量：8
- 2005年
- 将高致病力禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)的HA基因克隆到质粒pcDNA4/His鄄Max和pRc/CMV上得到真核表达质粒pC4H5和pCMVH5。将pC4H5和pCMVH5经活体电击和肌肉注射接种于3周龄SPF鸡的右腿内侧,并设空白质粒对照。二次免疫后第二周用104.2ELD50的同源病毒进行攻击。结果pC4H5和pCMVH5活体电击免疫SPF鸡能诱导产生持续表达的高水平特异性抗体,可产生100%的保护率,并能有效地阻止H5N1病毒攻击后病毒在泄殖腔的排出,而肌肉注射组和空白对照组在攻毒后全部发病并死亡。结果表明活体电击免疫是一条可以与基因枪免疫相媲美甚至优于基因枪免疫的有效免疫途径。
- 赵晓民张强哲段明星何宏轩秦曦明梁荣
- 关键词：DNA疫苗电击活体试验初报高致病力禽流感注射接种
- DNA疫苗的黏膜免疫被引量：3
- 2002年
- DNA做为一种新型的疫苗在免疫人和动物后可以引起强烈的体液免疫和细胞免疫.目前大多数DNA疫苗都是通过肌肉注射和基因枪肠道外途径免疫.然而通过黏膜途径免疫机体也可以得到有效的保护.现主要就DNA疫苗的黏膜免疫进展作一综述.
- 邓明俊张彦明梁荣
- 关键词：DNA疫苗免疫应答
- 鸡新城疫病毒F基因高效真核表达质粒的构建被引量：10
- 2003年
- 为进一步研究基因疫苗的免疫机制和基因疫苗的免疫效果 ,应用 DNA重组技术 ,根据载体 pc D-NA4 .0 / His Max的多克隆位点设计引物 ,对含有 NDV保护性抗原基因 F的质粒 PCR扩增。将得到的目的片段插入到载体的启动子下游 ,成功得到含有 NDV F基因的真核表达质粒载体 PC4 F的基因疫苗。
- 邓明俊张彦明梁荣段明星
- 关键词：新城疫病毒F基因真核表达质粒基因疫苗免疫机制免疫效果
- 新城疫病毒融合蛋白基因真核表达质粒的构建及动物免疫试验
- 自从1992年Tang等(Tang DC et al,1992)将含人生长激素基因的质粒DNA导入小鼠表皮细胞产生抗人生长激素抗体.并首次提出DNA免疫的概念以来.在短短十年的时间里。DNA疫苗的研究有了迅猛的发展。已知...
- 梁荣邓明骏张强哲秦曦明郑昌学张彦明段明星
- 文献传递
- 西北地区新城疫病毒分离株F基因的克隆与序列分析被引量：7
- 2000年
- 从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RNA ,RT_PCR扩增其融合蛋白 (F)基因N端 90 8bp的片段 ,经回收、鉴定后 ,克隆到pGEM_T载体上进行核苷酸序列测定。对各毒株核苷酸及推导的氨基酸进行序列和同源性的比较 ,结果表明所有毒株在该区段没有缺失和插入 ,但有多处碱基置换。各分离毒株之间同源性很高 (平均 96 .8% ) ,与疫苗毒株同源性较低 (82 .5 %～ 85 .8% ) ,而分离自青海省的 3个毒株与其他毒株的同源性均较低 (平均 88.0 % )。以 389bp核苷酸绘制系统发育树 ,证实西北地区的新城疫是由基因型Ⅶc和一个新发现的基因型Ⅸ引起的。
- 梁荣曹殿军陈杰李健强
- 关键词：NDVF基因克隆测序系统发育树
- 新城疫病毒分离株的蚀斑纯化及影响蚀斑形成的主要因素被引量：34
- 2003年
- 从西北地区 1979～ 1999年发生新城疫的鸡群中分离和收集的 15株新城疫病毒 ( NDV) ,经蚀斑纯化 ,共得到 11个克隆毒株 ;对其进行了蚀斑形成能力的测定 ,证明蚀斑形成能力与毒力成正比 ;探讨了温度对蚀斑形成能力的影响 ,证明 NDV蚀斑形成能力在 4 1℃比 37℃强 ,表现为蚀斑出现早、蚀斑大、蚀斑形成单位 ( PFU)高 ,同时在 4 1℃时细胞生长状况良好 ,不易污染 ,故认为在 4 1℃进行 NDV的蚀斑纯化值得推荐。
- 梁荣曹殿军阎丽辉刘培欣陈杰邓明俊李健强段明星
- 关键词：新城疫病毒分离株致病力融合蛋白基因
- 禽流感病毒HA基因真核表达质粒的构建与表达被引量：24
- 2003年
- 血凝素蛋白 (HA)基因是禽流感病毒 (AIV)重要的保护性抗原基因 .为了研究HA基因疫苗 ,用PCR扩增H5亚型AIVHA基因 ,将其克隆到质粒 pcDNA4/HisMax和pRc/CMV上得到真核表达质粒 pC4H5和pCMVH5 .采用TfxTM 2 0、Superfect转染试剂和电转染法转染HeLa细胞 ,转染后的HeLa细胞经蛋白质印迹和血凝试验检测HA蛋白及其活性 .结果表明 ,Superfect转染和电转染均能正确表达HA蛋白并具有生物学活性 ,蛋白质印迹检测到HA和HA裂解的HA1和HA2 ,与AIV的HA、HA1、HA2蛋白的分子质量一致 .从血凝试验结果看 ,Superfect和电转染表达的HA均具有血凝活性 ,而经Superfect转染的 pC4H5的表达量是pCMVH5的8倍 ,表明
- 张强哲秦曦明梁荣邓明俊何宏轩张彦明郑昌学段明星
- 关键词：禽流感病毒HA基因真核表达质粒构建血凝素蛋白
- 用电穿孔方法研究H5N1禽流感病毒DNA疫苗对动物的免疫保护作用(英文)被引量：7
- 2005年
- 为了研究H5N1DNA疫苗对小鼠和鸡的保护效率,用H5N1禽流感病毒HADNA疫苗免疫BALB/c小鼠和SPF鸡.小鼠和鸡分别经电穿孔和肌肉注射免疫两次,间隔为3周.二次免疫后,用致死量的同源病毒进行攻毒实验.空白对照组在攻毒后全部死亡,而经电穿孔免疫的小鼠和鸡均获得了完全的保护,并能有效地抑制病毒在小鼠肺脏和鸡泄殖腔的繁殖.同时,电穿孔免疫的小鼠和鸡均产生了高水平的特异性抗体.经电穿孔免疫的小鼠攻毒后CTL反应明显加强.这些结果表明,HADNA疫苗能有效地保护小鼠和鸡对禽流感病毒的感染,同时也表明电穿孔免疫是DNA疫苗免疫的有效途径之一.
- 张强哲秦曦明董海丽梁荣何宏轩李希姜北宇刘湘军段明星
- 关键词：H5N1禽流感病毒DNA疫苗
- 中国西北地区新城疫病毒分离株基因型与抗原性的关系被引量：21
- 2001年
- 从我国西北地区分离到 1 0株新城疫病毒 (NDV) ,在蚀斑纯化、致病力和基因型鉴定的基础上 ,以LaSota、F48E9株免疫血清与分离毒株进行中和试验和交叉血凝抑制试验 (HI)。结果表明 ,弱毒株LaSota的免疫血清对分离毒株具有一定的保护力 ,但随毒株的不同有很大差异 ,对分离毒的中和指数远远低于强毒株F48E9免疫血清的中和指数。结合基因型鉴定结果 ,认为这种差别很可能是造成LaSota系疫苗免疫失败的原因之一。
- 梁荣曹殿军陈杰李健强段明星
- 关键词：新城疫病毒基因型抗原性
