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肝素抗凝血对实时荧光定量PCR技术测定HBV DNA结果的影响: 2007年; 沈忠林; 关键词：实时荧光定量抗凝血肝素钠抗凝剂浓度真空采血管

用于乙肝病毒的荧光定量PCR检测试剂盒: 乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法及专用试剂盒，属于生物技术领域。本发明的方法是通过对乙型肝炎病毒表面抗原，核心抗原和E抗原区等三对不同的引物和探针的优化，筛选出了扩增效果最好的一对引物和探针。比较了用不同方法提取的血清...; 鲁艳芹韩金祥王传玺戚鹏沈忠林; 文献传递

初诊慢肝患者血清中乙肝病毒DNA载量与血清标志物的关系: 2006年; 目的探讨初诊慢性乙型肝炎血清标志物与HBV DNA的关系。对象与方法采用酶联免疫方法和荧光定量聚合酶链反应分别对512例不同乙肝病人及202例HBeAg阴性、257例HBeAg阳性慢肝病人进行血清标志物、HBV DNA定量检测并分析结果。结果慢肝组有315例(68.9%)病毒颗粒浓度高于107,肝硬化组7例(13.2%)病毒颗粒浓度高于107;HBeAg阳性慢肝组245例(95.3%)患者病毒颗粒含量高浓度,HBeAg阴性慢肝组68例(33.7%)患者病毒颗粒含量在105-7copy/mL区段。结果慢肝组与肝硬化组相比,高浓度病毒以慢肝组中最明显,病情发展至肝硬化期病毒含量多数不高;慢肝病人中不同乙肝血清标志物模式其病毒含量分布特点不同,与HBeAg阳性慢肝组相比HBeAg阴性组体内病毒复制水平低(p<0.01),传染性较前者弱。最常见前C区突变,导致HBeAg阴性CHB病情加重和病毒复制增加。; 沈忠林杜鹃张慧李翠; 关键词：初诊患者血清乙肝病毒血清标志物模式肝炎血清标志物酶联免疫方法

PEG沉淀结合碱裂解法提取DNA可消除肝素对PCR检测结果的影响被引量：3: 2007年; 沈忠林孟红鲁艳芹岳爱玲; 关键词：HBVDNA定量 PCR 碱裂解法肝素

乙型肝炎病毒基因型、拉米夫定耐药突变的RFLP检测及临床相关性分析被引量：2: 2007年; 目的对乙型肝炎(简称乙肝)肝病毒进行基因分型,检测患者服用拉米夫定后血清中乙肝病毒突变情况,并进行临床相关性分析。方法设计乙肝病毒突变及基因分型特异性引物和酶切位点,系用限制性片断长度多态性(RFLP)分析法检测突变类型并对乙肝病毒进行基因分型。结果在115份被检测的血清标本中,75份(65%)标本为野生型,18份(15.7%)标本为YIDD突变,10份(8.7%)标本为YVDD突变;在混合型突变中,YIDD+YVDD存在于6份(5.2%)标本中,YMDD+YIDD存在于4份(3.5%)标本中,2份(1.7%)标本为YMDD+YVDD混合突变型;未检测到YSDD突变型。在180位点的突变检测中,98份(85%)标本为野生型,5份(4.3%)标本为rtL180M,L180M+M204I存在于8份(6.96%)标本中,另4份(3.5%)标本为L180M+M204V混合突变型。在115份标本中,102份标本为C基因型,13份标本为B基因型,未发现其他基因型。通过χ2检验,乙肝病毒YMDD突变与患者的性别、血清DNA水平、病毒基因型之间没有相关性(P>0.05),而乙肝病毒YMDD变异与患者服用拉米夫定的时间长短有相关性(P<0.05),用药时间越长,发生突变的几率越大。乙肝患者服用拉米夫定后,180位点的突变和204位点突变具有相关性(P<0.05)。结论采用RFLP分析法可以有效地检测乙肝病毒YMDD突变并对乙肝病毒进行基因分型。; 卜范峰鲁艳芹韩金祥王丽娜冯照雷沈忠林高刚; 关键词：乙型肝炎病毒突变基因分型 YMDD

浅析糖尿病并发症患者血清镁测定及临床意义被引量：3: 2007年; 目的探讨血清镁离子(magnesium,Mg2+)水平在糖尿病中的临床意义。方法利用日立7170全自动生化分析仪对69例糖尿病患者(其中无并发症组23例和有并发症组46例)与对照组85例健康者的血清镁离子水平进行测定比较。结果69例糖尿病患者组的血清镁离子水平均不同程度低于正常对照组,尤其以有并发症组镁离子水平更低。结论镁离子缺乏是引起糖尿病代谢紊乱的原因之一,提示糖尿病患者在监测血糖的同时,应加强对血清镁离子水平的监测,以便于指导临床用药和判断预后。; 吴镇沈忠林; 关键词：血清镁离子糖尿病

实时定量PCR检测乙型肝炎病毒拉米夫定耐药突变及其与临床指标的相关性被引量：5: 2008年; 目的采用实时定量PCR检测接受与未接受拉米夫定治疗的乙肝患者血清中乙肝病毒(HBV)突变情况,并将检测结果与临床指标进行相关性分析。方法采用touch-down PCR反应程序,并结合SYBR Green Ⅰ染料进行实时定量PCR,检测115份乙肝患者血清标本(其中50名患者未服用过拉米夫定,65名患者服用过拉米夫定)。随机选择115份标本中的30份用同样的方法提取血清DNA,进行PCR扩增及测序,并与实时定量PCR检测结果进行比较。将乙肝病毒YMDD突变实时定量PCR检测结果与临床各指标之间进行相关性分析。结果115份血清标本中,75份含有野生型HBV(其中49份来自未接受过拉米夫定治疗的患者),40份含有YMDD突变的HBV(其中1份来自未接受过拉米夫定治疗的患者);180位点的突变检测中,98份标本含有野生型HBV,17份标本含有突变型HBV。随机选取的30份标本测序结果与实时定量PCR检测结果完全一致。乙肝病毒拉米夫定耐药突变与患者的性别、血清DNA水平、病毒基因型之间无相关性,而乙肝病毒YMDD变异与患者服用拉米夫定的时间长短有相关性,用药时间越长,发生突变的几率越大。乙肝患者服用拉米夫定后,180和204位点突变具有相关性。结论实时定量PCR可以高效、准确地检测拉米夫定治疗后乙肝病毒的耐药突变。; 卜范峰鲁艳芹韩金祥冯照雷王丽娜沈忠林; 关键词：乙型肝炎病毒突变实时定量PCR

乙肝病毒突变位点的寡核苷酸与肽核酸阵列杂交检测被引量：2: 2007年; 目的:比较利用寡核苷酸阵列和肽核酸阵列检测乙肝病毒突变位点。方法:针对乙肝病毒常见的1762A-T与1764G-A联合突变、1858C-T、1896G-A 3个突变位点,设计寡脱氧核苷酸和肽核酸检测探针,探针经固定后分别与不对称PCR荧光标记的靶DNA杂交,扫描分析荧光信号强度,DNA序列分析3位点的变异情况。结果:对于寡核苷酸芯片,1762与1764联合位点、1858以及1896位点的野生型探针与突变探针荧光强度的比值分别为1.44、1/1.24、1.05。对于肽核酸芯片,相应位点的野生型探针与突变探针荧光强度的比值分别为2.8、1/3.02、1.71。DNA序列分析结果表明该样本中1858位点为突变位点,1896以及1762与1764联合位点不存在突变。结论:与寡脱氧核苷酸探针相比,肽核酸与靶DNA杂交结合能力和识别单碱基错配能力均高于相应的寡脱氧核苷酸,二者杂交结果与测序结果一致。; 鲁艳芹韩金祥沈忠林朱波; 关键词：突变杂交乙肝病毒

乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法及专用试剂盒: 乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法及专用试剂盒，属于生物技术领域。本发明的方法是通过对乙型肝炎病毒表面抗原，核心抗原和E抗原区等三对不同的引物和探针的优化，筛选出了扩增效果最好的一对引物和探针。比较了用不同方法提取的血清...; 鲁艳芹韩金祥王传玺戚鹏沈忠林; 文献传递

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