洪宇植
- 作品数:50 被引量:107H指数:8
- 供职机构:安徽大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省优秀青年科技基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 新型栓菌漆酶基因的克隆及其在酵母细胞活性表达
- 漆酶(Laccase,EC 1.10.3.2)是一类含铜的多酚氧化酶,能催化多种酚类和非酚类化合物等发生氧化,并伴随有分子氧还原成水,在木素降解、异生物转化、纺织染料脱色等工业和环境生物技术领域有重要潜在应用价值。栓菌4...
- 洪宇植李剑凤肖亚中
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- 栓菌AH28-2固态发酵生产漆酶的方法
- 一种栓菌AH28-2固态发酵生产漆酶的方法,是将栓菌AH28-2菌株种液接种在经灭菌的固体培养基上于20~28℃条件下发酵培养20~30天。固体培养基由3~5份油料作物秸杆、1~3份粮食麸皮、1~2份花生壳粉和2~6倍质...
- 肖亚中孙芹英房伟洪宇植张敏葛宏华
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- 一种β-葡萄糖苷酶突变体、其重组表达质粒及转化的工程菌株
- 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌,并可在将工程菌诱导表达后,获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础,通过P...
- 肖亚中刘娟娟张学成方泽民房伟洪宇植
- 栓菌420漆酶同工酶B基因克隆及异源表达被引量:3
- 2007年
- 根据铜结合区的保守氨基酸序列设计简并引物,扩增栓菌420(Trametessp.420)基因组,结合长距离反向PCR(LD-IPCR)技术,克隆得到新型漆酶同工酶B基因(lacB),包括结构基因(2255bp)及5′-和3′-非编码序列。lacB含12个内含子,其cDNA序列长1560bp,编码495aa成熟多肽和24aa信号肽。lacB与其它不同来源的真菌漆酶基因具有较高的同源性,而与植物、细菌、昆虫的漆酶基因同源性低于25%。将不含信号序列的lacBcDNA通过质粒pPIC9克隆到表达载体pPIC9K上,电击转化毕赤酵母GS115细胞,经BMM-ABTS平板筛选得到漆酶分泌阳性转化子。
- 李剑凤洪宇植肖亚中
- 关键词:毕赤酵母漆酶基因克隆异源表达
- 栓菌AH28-2漆酶基因lacA在Pichia pastoris中的表达及转化子的N+注入诱变
- 将栓菌AH28-2(Trametes sp.AH28-2)漆酶基因lacA的cDNA序列插入到pPIC9K载体上, 实现在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115菌株中进行异源活性表达。在含有0.3mmol/...
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- 一种真菌漆酶诱导活性化合物及其发酵制备方法与应用
- 本发明属化合物分离纯化技术领域,涉及一种微生物来源的新型真菌漆酶高效诱导化合物的发酵制备、分离纯化工艺,及其在诱导真菌漆酶生产方面的应用。其特征在于包括下述步骤:通过真菌发酵制备含有活性化合物的发酵液,经过萃取获得的活性...
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- 灵芝漆酶转化除草剂2,4-D丁酯的初步研究被引量:2
- 2010年
- 来自灵芝ST(Ganoderma sp.ST)的漆酶在无氧化还原介质存在时能够直接转化苯氧羧酸类除草剂2,4-D丁酯。对酶转化2,4-D丁酯的条件进行了优化,包括pH值、给酶量和反应温度。灵芝ST漆酶在pH值4.0~8.0和15~30℃的范围内均能够有效转化2,4-D丁酯(初始浓度0.5mg/L),在最适的pH值7.0、给酶量25U/L和温度30℃条件下,转化率随着酶作用时间的延长而提高,在24h左右达到最高(>99.5%)。酶活力在作用时间内稳定,并且用自来水代替缓冲液获得的转化率相当。
- 李妍妍洪宇植房伟肖亚中
- 关键词:生物修复灵芝漆酶除草剂2,4-D丁酯
- Trametessp.AH28-2漆酶A的诱导合成及其基因5′-端调控区的克隆与分析被引量:9
- 2005年
- Trametessp.AH28_2漆酶同工酶的合成需要铜离子的存在,较高浓度的Cu2+有利于漆酶合成。在以葡萄糖为碳源补加0·5mmol/LCu2+的培养基中生长时,发酵液漆酶活性为44·3u/L,同时补加4·0mmol/L邻甲苯胺时,漆酶酶活提高到71·0u/L;而在补加Cu2+和邻甲苯胺的纤维二糖培养基中,酶活上升至2584u/L,为葡萄糖培养基的36·4倍。邻甲苯胺和铜离子诱导产生的漆酶同工酶组分,均为漆酶A(LacA)。竞争性RT_PCR分析表明,漆酶A基因(lacA)转录本的累积伴随有发酵液漆酶活性的增加,邻甲苯胺对lacA的调控发生在转录水平。lacA结构基因长2110bp,含有10个内含子;lacA的cDNA序列为1560bp,编码520aa的漆酶蛋白,其氨基酸序列与其它真菌漆酶具有较高的相似性。采用改进的反向PCR技术,扩增得到的lacA5′_端调控区长1881bp,分析表明,该区域上分布有1个TATA框、7个CAAT框和多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括5个MRE元件、9个CreA结合位点、4个XRE元件、2个STRE元件和7个氮因子调控位点等。这些序列位点的存在部分地对应了菌株摇瓶发酵条件下lacA的表达规律。
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- 关键词:真菌漆酶定量RT-PCR顺式作用元件
- 一种细菌漆酶基因及其表达与应用
- 本发明公开了一种细菌漆酶及其表达及其应用,其基因编码序列如SEQ ID No:1所示,该细菌漆酶是具有SEQ ID No:2所示的氨基酸序列的多肽,本发明还公开了含有该细菌漆酶的表达菌株。本发明所述细菌漆酶来自海洋未培养...
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- 一种灵芝漆酶的清洁高效生产方法
- 一种灵芝漆酶的清洁高效生产方法,以申请人自主选育的树舌灵芝ST为出发菌株,将其先接种在发酵培养基中制备种液,再将种液接种到同样的发酵培养基中于22~35℃培养3~8天,分离后得到漆酶制剂。发酵培养基由0.1~5%的玉米粉...
- 洪宇植肖亚中李妍妍王林房伟
- 文献传递