涂燕
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:浙江大学金华医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 干扰CD147表达对SHI-1细胞体内外增殖及浸润能力的影响及可能机制被引量:1
- 2014年
- 目的 探讨干扰CD147表达对白血病细胞系SHI-1细胞增殖、侵袭、转移能力的影响及其可能的机制.方法 用慢病毒干扰载体及阴性对照载体转染SHI-1细胞,半定量RT-PCR法检测CD147、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,Western blot法检测CD147蛋白水平;MTT法检测细胞增殖能力,用Millicell小室法将SHI-1细胞与骨髓基质细胞共培养检测SHI-1细胞体外侵袭能力的改变,将不同处理的SHI-1细胞经皮下或经尾静脉接种于裸鼠,观察SHI-1细胞在裸鼠体内增殖及浸润情况.结果 慢病毒干扰载体转染的SHI-1细胞(SHI-1/CD147i细胞)CD147 mRNA表达水平较阴性对照病毒转染细胞(SHI-1/NC细胞)下调85%,CD147蛋白表达下降91%,SHI-1/CD147i细胞MMP-2及MMP-9mRNA表达较SHI-1/NC细胞分别下降72%及63%.SHI-1/CD 147i细胞体外增殖能力较SHI-1/NC及SHI-1细胞明显下降;与骨髓基质细胞共培养24 h后,SHI-1、SHI-1/NC、SHI-1/CD147i细胞移行至Millicell下层的细胞占接种细胞数的比例分别为(18.2±2.5)%、(16.5±2.7)%和(4.5±1.2)%,SHI-1/CD147i细胞移行能力显著低于SHI-1和SHI-1/NC细胞.接种于裸鼠皮下的SHI-1/CD147i细胞形成的肿瘤体积显著低于SHI-1及SHI-1/NC细胞.而经尾静脉接种SHI-1/CD147i细胞的裸鼠生存期较接种SHI-1、SHI-1/NC细胞的裸鼠显著延长,并且在脏器浸润能力下降.结论 干扰SHI-1细胞CD147表达可抑制SHI-1细胞体内外增殖及浸润能力,其途径可能是通过下调MMP表达实现的.
- 涂燕李振江汤爱平费妍李慧慧吴琼贺文凤
- 关键词:基质金属蛋白酶
- CD147在肿瘤发展中的研究进展
- 2012年
- CD147属于免疫球蛋白超家族的跨膜糖蛋白,在多种细胞表面均有表达,在生殖、机体发育、免疫功能中发挥重要作用,还参与了肿瘤浸润转移等多种病理过程,由于其在多种肿瘤细胞表面高表达,而且与肿瘤的恶性程度相关,目前已成为研究肿瘤浸润与复发的热点。
- 涂燕李振江汤爱萍
- 关键词:CD147肿瘤
- 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子RNAi慢病毒载体的构建被引量:3
- 2011年
- 目的构建人细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)RNA干扰(RNAi)慢病毒载体。方法参照文献设计RNAi靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生RNAi慢病毒载体pGC-LV。PCR鉴定阳性克隆并测序,将测序正确的pGC-LV、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒经脂质体2000共转染293T细胞,获得重组慢病毒,用逐孔稀释法测定病毒滴度。结果合成的含EMMPRIN vshRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确;病毒包装后滴度为1×109 TU/ml。结论应用基因工程技术成功构建了可供感染的EMMPRIN基因RNAi慢病毒载体,此为进一步研究EMMPRIN在急性白血病中的作用奠定了实验基础。
- 涂燕李振江汤爱萍李慧慧贺文凤李洁张冉
- 关键词:细胞外基质金属蛋白酶诱导因子RNA干扰慢病毒载体
- 干扰CD147表达抑制白血病细胞SHI-1增殖及移行
- 2014年
- 目的构建针对细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)的慢病毒干扰载体,探讨干扰CD147表达后对白血病细胞系SHI-1细胞体外增殖、侵袭、转移能力的影响。方法设计针对CD147的干扰序列片段,构建于慢病毒载体pGCSIL-GFP上,重组慢病毒载体与包装载体共转染293T细胞,收集病毒上清,测定病毒滴度。病毒上清感染SHI-1细胞,RT-PCR法检测CD147、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,Western blotting法检测CD147蛋白水平;MTT法检测细胞体外增殖能力,体外SHI-1细胞与骨髓基质细胞共培养跨Matrigel基质胶检测SHI-1细胞的体外侵袭能力。结果成功构建慢病毒干扰载体,获得重组慢病毒,滴度达1×109TU/mL。病毒感染SHI-1细胞后,SHI-1/CD147i细胞的CD147 mRNA较感染阴性对照病毒的SHI-1/NC细胞下调86.7%,CD147蛋白表达下降91%,SHI-1/CD147i细胞MMP-2及MMP-9 mRNA表达较SHI-1/NC细胞分别下降78.3%和70.6%。SHI-1/CD147i细胞体外增殖能力较SHI-1/NC及SHI-1细胞明显下降;与骨髓基质细胞共培养24 h后,SHI-1、SHI-1/NC、SHI-1/CD147i细胞移行至Transwell下层的细胞占接种细胞数比例分别为(18.2±2.5)%、(16.5±2.7)%、(4.5±1.2)%,SHI-1/CD147细胞移行能力显著低于SHI-1和SHI-1/NC细胞。结论干扰SHI-1细胞的CD147表达后,通过下调MMPs表达抑制SHI-1细胞体内外增殖及移行能力,CD147可能成为治疗急性白血病的靶点。
- 涂燕李振江汤爱平费妍李慧慧李剑贺文凤
- 关键词:细胞外基质金属蛋白酶诱导因子基质金属蛋白酶细胞移行
- 肠系膜炎性恶性纤维组织细胞瘤1例报道
- 2011年
- 0引言
炎性恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma,MFH)是一种含有大量良性和恶性黄瘤细胞、非典型性梭形细胞和急慢性炎症细胞的恶性肿瘤。目前WHO把本病归入恶性纤维组织细胞瘤炎性亚型。
- 涂燕汤爱萍李慧慧余莉杨碧云
- 关键词:恶性纤维组织细胞瘤炎症性肠系膜慢性中性粒细胞白血病