温世勇
- 作品数：13 被引量：18H指数：3
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项内蒙古自治区科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 人β-防御素3在体外对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响被引量：1
- 2014年
- 为了更充分地阐明人β-防御素3(HBD3)对淋巴细胞增殖反应的影响,试验先用CCK-8对不同浓度的刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖反应进行检测,进而筛选出最适ConA浓度,然后再用CCK-8检测不同浓度(1,10,100,500,1 000 ng/mL)的HBD3协同最适ConA浓度诱导淋巴细胞增殖反应。结果表明:ConA的最适浓度为2μg/mL;浓度为1,10,100 ng/mL的HBD3可以显著促进2μg/mL ConA诱导的淋巴细胞增殖反应,但是伴随着HBD3浓度的不断升高这一作用逐渐降低,当浓度为500 ng/mL和1 000 ng/mL时表现出一定程度的抑制作用。说明HBD3在一定浓度范围内对ConA诱导的淋巴细胞增殖反应具有促进作用,而超出这一浓度范围就会出现抑制作用。
- 孟庆刚李琦赵鹏伟温世勇菅瑞珍曹贵方
- 关键词：CCK体外
- 荷斯坦奶牛乳腺β-防御素的差异表达被引量：1
- 2012年
- 本研究为证明荷斯坦奶牛乳腺β-防御素的表达,扩增出6种β-防御素序列进行氨基酸分析,结果发现,扩增的6个保守的半胱氨酸,其核酸序列与NCBI数据库序列进行BLAST比对,结果LAP、BNBD4同源性100%,BNBD5为99.6%,EBD为99.5%,BNBD7、TAP为98.5%;实时荧光定量PCR检测6种防御素的mRNA水平的表达,它们之间的表达量都有显著性差异(BNBD4与BNBD5除外),其中LAP表达量最多,BNBD7,EBD,BNBD5,BNBD4次之,TAP的表达量最低。
- 程兰玲曹贵方温世勇赵鹏伟关洪敏菅瑞珍
- 关键词：Β-防御素荷斯坦奶牛乳腺炎
- 17-β雌二醇调控绵羊输卵管上皮细胞β-防御素1基因表达过程中NF-κB信号通路的研究
- 动物在自然界生存中会受到各种病菌侵染的威胁，因此动物在长期进化的过程中形成的先天性免疫系统可有效的对抗病原菌的侵染。防御素是一类富含半胱氨酸并广泛分布于各种动物组织和细胞的内源性阳离子抗菌肽(AMPs)，是先天性免疫系统...
- 温世勇
- 关键词：绵羊输卵管上皮细胞NF-ΚB信号通路
- 蒙古绵羊Ghrelin基因的克隆和原核表达被引量：2
- 2011年
- 为了克隆蒙古绵羊Ghrelin基因,构建其原核表达载体,并检测其在大肠杆菌中的表达情况。本研究用RT-PCR方法从蒙古绵羊胃组织mRNA扩增获得Ghrelin基因的cDNA序列,克隆到pMD-19T载体后进行序列分析。将测序正确的cDNA序列与原核表达载体pET-32a(+)连接,并转化BL21(DE3)大肠杆菌。经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明克隆的蒙古绵羊Ghrelin基因序列与已发表基因序列有2个碱基的差异,该碱基的变化并不影响氨基酸序列,目的蛋白主要以可溶性形式存在,Western-blot初步证实了所获得的融合蛋白是特异的。本研究成功构建了蒙古绵羊Ghrelin基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达,为进一步研究蒙古绵羊Ghrelin基因的功能提供参考。
- 梁建荣曹贵方赵鹏伟温世勇程兰玲凃勇
- 关键词：GHRELIN基因克隆原核表达蒙古绵羊
- FSH、LH及E_2对绵羊卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响被引量：4
- 2013年
- 为了进一步研究激素对颗粒细胞分泌孕酮的影响,试验采用体外培养绵羊卵巢壁颗粒细胞后,经单独、联合添加2.5 IU/mL卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)和1μg/mL雌二醇(E2),并于0,24,48,72,96小时时收集培养液,通过ELISA方法检测孕酮含量。结果表明:联合添加激素组在24小时时有促进孕酮分泌的作用(P<0.05),但随着时间的延长,其孕酮分泌总体呈下降趋势;单独添加FSH和LH均未见有效刺激孕酮分泌。
- 菅瑞珍杨燕燕温世勇孟庆刚程兰玲李文佼阿娜李海军杜晨光曹贵方
- 关键词：颗粒细胞体外培养孕酮
- 防御素的免疫相关作用被引量：2
- 2014年
- 防御素是一类广泛存在于黏膜上皮细胞和中性粒细胞中的阳离子多肽。作为先天性免疫反应的一部分,防御素对细菌、真菌、病毒和寄生虫均表现出抗菌活性。防御素除了作为先天性免疫的直接效应分子具有广谱的抗菌作用外,在获得性免疫反应中还具有作为配体的免疫调节作用和趋化作用,也可以增强针对肿瘤抗原、蛋白质抗原的体液和细胞免疫应答。文章通过探讨防御素的免疫相关作用,揭示防御素在先天性免疫反应和特异性免疫反应中的作用。
- 孟庆刚李琦赵鹏伟温世勇菅瑞珍曹贵方
- 关键词：防御素多肽抗菌活性免疫
- 马羊膜上皮细胞分离、培养及影响因素的研究
- 2014年
- 为了建立马羊膜上皮细胞(equine amniotic epithelial cells,e AECs)的分离、培养方法,并对其影响因素进行研究,试验从胎盘剥离羊膜,采用Trypsin-乙二胺四乙酸(EDTA)或Tryp LE消化法分离获得上皮细胞,然后进行上皮细胞培养传代研究。结果表明:通过0.25%Trypsin-EDTA消化,每克羊膜平均获得2.2×106个细胞,其3代传代倍增时间平均为(1.32±0.21)d;通过0.25%Tryp LE消化,每克羊膜平均获得1.9×106个细胞,其3代传代倍增时间平均为(1.26±0.17)d,两者间差异显著(P<0.05)。Tryp LE消化结果比较稳定,更适合从马羊膜层消化、分离上皮细胞。
- 张福全温世勇丛姗郭继彤曹贵方
- 食欲素A对绵羊黄体化颗粒细胞食欲素受体1(OX1R)表达的影响
- 2013年
- 为了观察不同剂量食欲素A在不同时间对绵羊黄体化颗粒细胞OX1R表达的影响,在绵羊黄体化颗粒细胞中添加不同剂量(0.05,0.2,0.5,1μg/mL)食欲素A,分别于刺激后0,2,6,12 h提取细胞总RNA,运用RT-qPCR方法检测了OX1R mRNA相对表达量变化。结果表明,OX1R mRNA分布于绵羊黄体化颗粒细胞中;添加高剂量(1μg/mL)食欲素A在2 h显著性促进OX1R mRNA表达(P<0.01),随后这种作用会逐渐减弱;添加低剂量(0.05,0.2,0.5μg/mL)食欲素A后12 h时会显著促进OX1R mRNA表达(P<0.01),且0.2μg/mL剂量组促进作用更为显著。食欲素A诱导并上调OX1R mRNA的表达,高剂量(1μg/mL)食欲素A可以迅速诱导其表达,而低剂量(0.05,0.2,0.5μg/mL)食欲素A诱导作用较为缓慢,且高剂量(1μg/mL)组食欲素A同低剂量(0.05,0.2,0.5μg/mL)组相比,上调作用更加迅速。
- 李文佼杜晨光菅瑞珍温世勇王伟平孙博徐晓静刘永志
- 关键词：食欲素A绵羊
- 不同浓度脂多糖刺激奶牛乳腺上皮细胞对NF-κB及LAP表达的影响被引量：4
- 2012年
- 为了观察不同浓度脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞NF-κB及LAP基因表达的影响,设置不同浓度(0、50、100、200、400和800ng/mL)的脂多糖(LPS)刺激奶牛乳腺上皮细胞,分别于刺激2、4、8、16、24、48和72h后提取细胞总RNA,经反转录反应后,运用荧光定量PCR方法检测NF-κB P65亚单位和LAP的表达水平。结果,与空白对照组相比,脂多糖浓度达到400ng/mL并培养72h后,奶牛乳腺上皮细胞NF-κB P65亚单位和LAP的表达量最高,且与对照组有极显著差异(P<0.01)。结果表明,在脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性效应中,NF-κB的表达活性增强,调控着防御基因LAP表达,呈现一定的剂量和时间效应关系。
- 程兰玲曹贵方温世勇赵鹏伟凃勇菅瑞珍李琦
- 关键词：Β-防御素NF-ΚB乳腺上皮细胞脂多糖
- 利用RT-PCR技术扩增绵羊输卵管上皮细胞Ghrelin基因被引量：1
- 2014年
- 提取绵羊输卵管上皮细胞总RNA,采用Primer 5.0软件设计引物,运用RT-PCR技术扩增Ghrelin基因。结果显示,经测序和序列比对鉴定,该方法成功地扩增到了大小为200 bp的目的基因,表明RT-PCR技术是检测绵羊输卵管上皮细胞中Ghrelin基因的有效手段,可为今后研究不同激素水平下绵羊输卵管组织中Ghrelin基因的表达量变化及进一步体外试验奠定基础。
- 高甜温世勇钱英红丛珊李琦宋锦曹贵方
- 关键词：输卵管上皮细胞GHRELIN基因
