目的探讨线粒体分裂因子（MFF）在肝癌中的表达与生物学作用。方法①用实时荧光定量PCR（qPCR）、Western blotting及免疫组织化学方法，检测MFF在肝癌组织与细胞株中的表达。②小干扰RNA（siRNA）干涉MFF表达后，用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）与克隆形成实验检测siCtrl、siMFF#1、siMFF#2组MFF对肝癌细胞增殖的影响。③siRNA干涉MFF表达后，用Annexin ⅤFITC/PI双染法检测MFF对肝癌细胞凋亡的影响。结果①MFF在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织［mRNA水平M（QR）：0.292（0.443）∶0.235（0.333），Z=-4.166，P＜0.001；蛋白水平M（QR）：5.414（4.545）∶3.120（3.955），Z=-3.961，P＜0.001］；MFF在所有被检测肝癌细胞株中的表达均高于正常肝细胞。②干涉MFF可显著抑制肝癌细胞增殖（siCtrl vs. siMFF#1：5.29±0.34∶3.34±0.37，P=0.014；siCtrl vs. siMFF#2：5.29±0.34∶3.09±0.40，P=0.010）；干涉MFF可显著抑制肝癌细胞克隆形成（siCtrl vs. siMFF#1：95.35±21.20∶37.56±10.61，P=0.003；siCtrl vs. siMFF#2：95.35±21.20∶41.23±10.82，P=0.004）。③干涉MFF可明显促进肝癌细胞凋亡（siCtrl vs. siMFF#1：9.56%±1.70%∶20.08%±2.03%，P＜0.001；siCtrl vs. siMFF#2：9.56%±1.70%∶21.14%±1.38%，P＜0.001）。结论MFF在肝癌中高表达，可促进肝癌细胞增殖并抑制凋亡，提示MFF是潜在的癌基因与肿瘤治疗靶标。
目的:探讨节律基因CRY1(cryptochrome circadian clock 1)在肝癌组织中的表达情况及对肝癌细胞生长的作用。方法:利用实时荧光定量PCR、Western blotting及免疫组织化学染色法,检测CRY1在肝癌组织及细胞中的表达;利用肝癌公共数据信息,分析和验证CRY1在肝癌组织中的表达;真核表达质粒将肝癌细胞CRY1过表达后,采用MTS和Annexin V-FITC/PI双染法,分别检测CRY1对细胞增殖和凋亡的影响。结果 CRY1在癌组织中阳性率为57.5%(23/40),癌旁组织中阳性率为87.5%(35/40),癌中CRY1表达低于癌旁的占80%(32/40),与癌旁组织比较,CRY1蛋白在肝癌组织中的表达明显降低,差异有统计学意义(t=7.53,P<0.001)。CRY1在3个肝癌公共数据信息显示,与对应癌旁组织相比,其在癌组织中表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(TCGA:413.62 vs 335.17,P=0.0155;GSE22058:397.67 vs 360.08,P=0.0207;GSE25097:1.627 vs 1.433,P<0.0001)。同时CRY1在被检测的4株肝癌细胞系中表达也显著低于永生化的正常肝细胞。与对照组比,过表达CRY1组细胞增殖能力明显降低,两组间差异有统计学意义(1.100 vs 0.662,P<0.0001);与对照组比,过表达CRY1组细胞凋亡显著增加(凋亡细胞百分比:7.9 vs 17.5,P=0.0014)。结论:节律基因CRY1在肝癌中低表达,同时CRY1抑制肝癌细胞增殖和促进细胞凋亡。
