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王丽娟: 作品数：27 被引量：29H指数：3; 供职机构：中国科学院海洋研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家海洋公益性行业科研专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程天文地球更多>>

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一种鲆鲽鱼类温度急性胁迫评估的方法及应用: 本发明属于海水鱼类养殖及育种技术领域，具体涉及一种鲆鲽鱼类温度急性胁迫评估的方法及应用。将鲆鲽鱼放入养殖区中，设置实验水流流速，对水体逐渐升温或降温，待鲆鲽鱼无法平伏水底，被水流带入检测位时，记录该时刻对应温度或时间，即...; 吴志昊王丽娟尤锋宋宗诚

牙鲆芳香化酶Cyp19a多克隆抗体制备及其应用: 2022年; 芳香化酶Cyp19a在鱼类性别决定和性别分化中起关键作用,通过调控体内雌、雄激素的转化来影响鱼类性别表型形成。为深入研究Cyp19a在牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺分化和发育过程中的表达规律及作用机制,本文从牙鲆cDNA中克隆获得1557 bp的cyp19a基因编码序列,并成功构建了原核重组表达质粒。经体外重组与纯化获得较高纯度的重组Cyp19a蛋白;以此作为抗原免疫兔子,制备多克隆抗体。用间接酶联免疫吸附剂测定(ELISA)技术检测抗血清效价,评估其免疫原性。结果表明免疫结束后得到的抗体血清效价超过了1∶50000,且纯化后抗体具有较好活性。Western Blot(WB)检测结果表明Cyp19a兔多抗可以特异性识别牙鲆重组Cyp19a蛋白和内源性Cyp19a蛋白。蛋白水平的雌雄性腺差异表达分析显示,牙鲆Cyp19a蛋白在卵巢中高表达,在精巢中微量表达。利用Foxl2和Dmrt1重组蛋白处理牙鲆性腺分化期幼鱼可分别显著上调和下调Cyp19a的表达(P<0.05)。综上所述,本研究成功制备了牙鲆Cyp19a多克隆抗体并进行了应用,为深入研究牙鲆等鱼类性别分化机制提供有力工具。; 舒畅王丽娟邹聪聪邹玉霞邹玉霞吴志昊李泽吴志昊; 关键词：重组蛋白多克隆抗体蛋白表达

基于CR及Cytb基因序列的大泷六线鱼野生群体遗传多样性分析被引量：4: 2019年; 为进一步了解山东省内大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)群体遗传背景和分化情况,合理保护与开发利用渔业资源,选取线粒体控制区(CR)和细胞色素b基因(Cytb)对分布于山东省近海沿岸的3个大泷六线鱼野生群体以及北黄海1个离岸大泷六线鱼野生群体的线粒体基因序列进行对比,分析它们的序列特征、遗传多样性和种群历史动态情况。经PCR扩增得到大泷六线鱼野生群体的CR和Cytb基因序列,全长分别为485bp和651bp。基于CR基因序列共检测到40个多态位点,单倍型多样性平均值为0.908,核苷酸多样性平均值为0.006,定义了53种单倍型。基于Cytb基因序列检测到56个多态位点,转换颠换比值为19.04,种内单倍型多样性平均值为0.934,核苷酸多样性平均值为0.005,定义了38种单倍型。对比分析表明,4个大泷六线鱼野生群体均具有高单倍型多样性和低核苷酸多样性。NJ系统进化树、群体间/内平均遗传距离、Fst值、基因流及AMOVA分析结果显示:山东省内近海沿岸大泷六线鱼野生群体和北黄海离岸野生群体遗传差异不显著,群体间存在频繁的基因交流,未形成显著的遗传分化。种群动态结果表明大泷六线鱼于更新世晚期经历了快速扩张,并形成了现有遗传格局。山东省内近海沿岸大泷六线鱼野生群体和北黄海离岸野生群体遗传结构之间不存在显著的地理隔离,这可能与人为增殖放流和秋冬季节黄海沿岸流及暖流有关,从而使得群体之间基因交流广泛。; 赵文溪刘莹于超勇王丽娟宋爱环刘洪军张树东官曙光; 关键词：大泷六线鱼细胞色素B基因群体遗传结构

牙鲆耐寒相关基因CIRP、HMGB1的克隆及表达特征分析被引量：7: 2015年; 为鲆鲽鱼耐低温标记辅助育种研究和应用提供候选基因，并了解耐寒相关基因在低温下的表达图示，作者通过同源克隆以及5￠/3￠RACE 的方法扩增得到了牙鲆（Paralichthys olivaceus）CIRP 和HMGB1基因。组织表达谱分析显示，这两个基因在脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏、肠等组织均有表达，但HMGB1基因在鳃中表达较弱。低温胁迫后，两基因随着胁迫时间的延长其表达量在肌肉中都出现先上升后下降的趋势：在0~12 h逐渐上升并达到最大值，然后下降恢复至最初水平。但在肝脏和脑组织中的变化趋势却不同，低温胁迫后0~2 h HMGB1基因在脑中的表达量上升至最高，然后下降至最初水平，在肝脏中变化不大。而CIRP基因在低温胁迫后0~2 h在肝脏中表达量处于上升趋势，然后下降至初始水平，在脑中变化不大。由此推测，这两个基因在低温条件下都参与了机体对外界的抵抗，特别是在抵抗外界寒冷的主要组织—肌肉中发挥作用，可能共同参与了机体的免疫反应，对低温胁迫环境下的鱼体进行保护，可以作为鱼类耐低温标记筛选的候选基因。; 胡金伟尤锋王倩王丽娟翁申达辛梦娇; 关键词：低温胁迫 RT-PCR

黄渤海近岸表层海水及地下水中Fe分布特征分析被引量：1: 2014年; 采用菲咯嗪法对黄渤海沿岸部分地点2009年表层水样以及山东荣成湾内的天鹅湖、近岸和远海部分站点2009~2011年采集的表层水样进行了Fe含量的测定,此外还检测了天津、荣成及日照采集的地下水水样。结果显示渤海沿岸除河北秦皇岛东山浴场,营口、秦皇岛西浴场、天津、东营支脉河口和昌邑沿岸表层水样的Fe（Ⅲ）以及Fe（t）浓度明显高于山东省黄海沿岸,而黄渤海沿岸各水样中Fe（Ⅱ）浓度均较低且差异不明显。荣成湾近岸和远海以及其内的天鹅湖站点水样的Fe（Ⅱ）、Fe（Ⅲ）和Fe（t）浓度周年变化不明显,Fe（t）浓度总体上为天鹅湖〉近岸〉远海。地下水中Fe（Ⅲ）浓度高于Fe（Ⅱ）,但一些地下水中Fe（Ⅱ）浓度仍处于较高水平。; 吴志昊尤锋王丽娟段德麟邵展茹刘梦侠; 关键词：黄渤海地下水 FE

动物全基因组关联分析的混合模型方法被引量：1: 2017年; 在动物全基因组关联分析(Genome-Wide Association Studies,GWAS)中,线性混合模型通过校正群体分层、个体间亲缘关系和微效多基因对标记关联检验的影响有效地控制了数量性状基因座(Quantitative Trait Locus,QTL)检测的假阳性率。文章综述了混合模型之于GWAS基因定位的求解策略和方法,包括逐个标记的GWAS方法和联合多标记的GWAS方法。评论了这些方法在计算效率、QTL检测效率和模型拟合度方面的优缺点。指出了完善的全基因组关联分析方法不仅能够高效率地检测QTL,还能够最优地拟合性状表型值和预测基因组育种值。; 韩丹丹赵敬丽王丽娟杨润清; 关键词：线性混合模型主效基因

一种快速建立大泷六线鱼近交系的方法: 本发明涉及染色体操作技术，具体地说是一种高效快速建立大泷六线鱼近交系的方法。收集大泷六线鱼精液灭活，利用遗传灭活的精子与分离成单粒的卵进行人工授精，再通过静水压力抑制第二极体排放，而后诱导雌核发育获得大泷六线鱼近交系。采...; 吴志昊尤锋宋宗诚王丽娟谭训刚王凌; 文献传递

牙鲆gnrh基因的表达分析: 2021年; 本文通过qPCR方法,研究了我国重要海水鱼类--牙鲆(Paralichthys olivaceus)雌、雄成体组织以及性腺分化期的脑、性腺中gnrh1、gnrh2和gnrh3的表达水平。结果显示,gnrh1分布于所有检测的组织:在脑、垂体、肾脏和肝脏中高表达,在性腺中表达相对较低;gnrh2则在雌、雄性的肝脏以及雄性的肠、肾脏、眼睛和头肾中;而gnrh3只在雄性的肾脏、眼睛和肌肉中检测到微弱表达。人工诱导的牙鲆雌核发育鱼苗分别用17β-雌二醇(E_(2))和17α-甲基睾酮(MT)处理,使其分化为雌性或雄性个体表型。在性腺分化期的脑中,gnrh1的表达呈现上升趋势,在全长(total length,TL)4 cm鱼苗中,E_(2)组的表达显著高于MT组(P<0.05);gnrh2在2 cm TL时E_(2)组显著高于MT组(P<0.05),随后在E_(2)和对照组的表达水平均出现下降趋势;gnrh3在2 cm TL时E_(2)和对照组的表达均显著高于MT组(P<0.05),自6 cm TL时MT和E_(2)组的表达开始下降。在性腺中,三种gnrh在性腺分化前2 cm TL表达量都相对较高,随后呈现下降趋势。综上,推测牙鲆gnrh1可能参与了性腺分化的启动、分化过程及性腺发育,gnrh2主要参与了性腺分化的启动,gnrh3主要参与了性腺分化的启动和分化过程。; 彭壮壮邹玉霞刘琰梁少帅王雯祥王丽娟邹聪聪周顺尤锋; 关键词：GNRH 性腺性腺分化基因表达

一种通过调控光环境提高牙鲆鱼苗生长的方法: 本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种通过调控光环境提高牙鲆鱼苗生长的方法。对孵化后50天的牙鲆鱼苗通过调控光源的照射环境，提高鱼苗的生长。本发明根据鱼类对光谱的特定喜好，进行光环境调控，以满足牙鲆对光谱的需要，提高牙...; 邹玉霞尤锋吴志昊王丽娟彭壮壮王雯祥梁少帅吴巧婉邹聪聪; 文献传递

一种大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法: 本发明涉及染色体操作技术，具体地说是一种利用遗传灭活的精子人工授精，通过静水压力抑制受精卵卵裂的原理，诱导大菱鲆同质雌核发育鱼苗的方法。选择性成熟的大菱鲆亲鱼，分别收集精液和卵，取上述精液与卵子按体积比1:100‑200...; 吴志昊尤锋宋宗诚王丽娟范兆飞曹元水; 文献传递

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