王华芹
- 作品数：53 被引量：177H指数：6
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- 相关领域：医药卫生文化科学交通运输工程更多>>
- γ-干扰素对TRAIL诱导人甲状腺癌细胞凋亡影响的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)对TRAIL诱导人甲状腺癌细胞凋亡作用的影响。方法:流式细胞术、蛋白质印迹法、蛋白质羰基测定法和共聚焦显微镜分别用于检测细胞凋亡、GAPDH蛋白表达、氧化损伤程度和细胞核内GAPDH免疫染色表达。运用微小RNA干扰技术下调GAP-DH表达。结果:与耐药细胞系相比,TRAIL敏感的FRO和KTC2细胞核提取液中可见不同程度的GAPDH蛋白表达、细胞内羰基蛋白显著集聚。IFN-γ可增加耐药ARO细胞核中GAPDH水平。IFN-γ或TRAIL单药组细胞凋亡率均<5%,而IFN-γ/TRAIL联合组细胞凋亡率达28.5%。siGAPDH组与siRNA对照组间细胞凋亡率差异有统计学意义(t=4.909,P=0.08),使对照组细胞凋亡率下降11%。结论:IFN-γ加强TRAIL诱导人甲状腺癌细胞凋亡可能是通过上调细胞核内GAP-DH表达实现的。
- 张海燕邓娓娓都镇先王华芹
- 关键词：甲状腺肿瘤细胞凋亡
- 微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2抑制蛋白酶体抑制剂对甲状腺癌细胞凋亡诱导作用的研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2(BAG2)对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用的影响。方法:选取人甲状腺未分化癌细胞系FRO,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、特异性siBAG2组和随机序列核酸siRNA组;利用微小RNA干扰技术降低BAG2的表达;采用RT-PCR法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞BAG2mR-NA及蛋白表达;采用分光光度法测定Caspases-3活性;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:与空白对照组相比,MG132显著增加FRO细胞系中BAG2基因表达水平(P<0.01),并呈时间依赖效应;与空白对照组和随机序列核酸siR-NA组相比,siBAG2处理组中BAG2mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其凋亡率及Caspases-3活性显著降低,P<0.01。结论:蛋白酶体抑制剂能够上调甲状腺未分化癌细胞系FRO中BAG2基因的表达水平,siBAG2具有特异性降低BAG2基因表达的作用,同时抑制蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用。
- 都镇先张海燕邓娓娓王华芹
- 关键词：甲状腺肿瘤蛋白酶体抑制剂
- PKCō-mediated phosphorylation of BAG3 at Ser187 site induces epithelialmesenchymal transition(EMT)and enhances invasiveness in thyroid cancer FRO cells
- Protein kinase C delta(PKCδ) is a Ser/Thr kinase which regulates numerous cellular pro-cesses,including prolif...
- 李宁刘宝琴李超张强王华芹
- BAG3阳性的胰腺星状细胞促进胰腺导管癌的迁移和侵袭
- 目的 BAG3 在多种类型的癌细胞中组成性表达，其在肿瘤细胞中的高表达与胰腺导管癌的恶性进展及不良预后密切相关。不过，有关BAG3 调节胰腺导管癌基质微环境的报道很少。本研究拟探讨BAG3 是否在胰腺导管癌基质微环境的重...
- 姜静宜王华芹
- 关键词：胰腺星状细胞胰腺导管癌肿瘤微环境
- 蛋白酶体抑制剂对肝癌HepG2细胞BAG3表达影响及其机制探讨被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨4种蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezome,BZ)、环氧甲酮四肽(epoxomycin,Epox)、乳孢素(lactacystin,Lacta)和MG132单独作用或者联合JNK特异性抑制剂SP600125,对肝癌HepG2细胞内BAG3蛋白表达的影响及分子机制。方法:空白对照、100nmol/L BZ、100nmol/L Epox、500nmol/L Lacta和2μmol/L MG132单独或联合50μmol/L SP600125处理HepG2细胞;实时定量RT-PCR检测蛋白酶体抑制剂对肝癌HepG2细胞内BAG3基因mRNA表达水平影响,蛋白质印迹法检测蛋白酶体抑制剂单独或者联合JNK激酶特异性抑制剂对BAG3蛋白表达水平的影响;利用MTT试剂盒检测蛋白酶体抑制剂细胞存活率,Hoechest33258染色检测细胞凋亡率。结果:蛋白酶体抑制剂BZ、Epox、Lacta和MG132均不同程度上调BAG3基因的mRNA和蛋白表达水平,而SP600125显著抑制蛋白酶体抑制剂引起的BAG3表达上调。MTT结果显示,SP600125显著抑制HepG2细胞对蛋白酶体抑制剂的敏感性;进一步Hoechst33258染色结果显示,4种蛋白酶体抑制剂联合SP600125作用引起HepG2细胞的凋亡率分别为(49.2±3.2)%、(58.7±3.5)%、(56.8±3.4)%和(53.4±3.3)%,明显高于蛋白酶体抑制剂单独作用组的(7.2±2.8)%、(16.7±3.2)%、(12.3±2.9)%和(11.4±3.0)%,P<0.05。结论:蛋白酶体抑制剂通过JNK信号通路上调BAG3的表达,抑制JNK活性增加了HepG2细胞对蛋白酶体抑制剂的敏感性。
- 刘宝琴宗志红李超孔德慧李思王华芹
- 关键词：蛋白酶体抑制剂硼替佐米JNKSP600125印迹法
- PKCō-mediated phosphorylation of BAG3 at Ser187 site induces epithelialmesenchymal transition(EMT)and enhances invasiveness in thyroid cancer FRO cells
- <正>Protein kinase C delta(PKCδ) is a Ser/Thr kinase which regulates numerous cellular pro-cesses,including pro...
- 李宁刘宝琴李超张强王华芹
- 文献传递
- 活性氧对硼替佐米诱导甲状腺癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨活性氧在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法选取4种人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC2、8305C,分别设空白对照组、还原型谷胱甘肽(GSH)组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组、硼替佐米组、硼替佐米+GSH组、硼替佐米+NAC组、R-丁胱亚磺酰亚胺(BSO)组、硼替佐米+BSO组、硼替佐米+BSO+GSH组。流式细胞仪检测细胞凋亡情况;测定还原型谷胱甘肽含量。DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇水平。结果与空白对照组相比,4种细胞GSH组及NAC组中GSH水平显著增加(P<0.01),BSO组中GSH水平减低(P<0.05),但细胞凋亡率差异没有统计学意义(P>0.05);FRO、KTC2细胞中硼替佐米组GSH水平减低(P<0.01);ROS水平显著增加(P<0.01);与硼替佐米组相比,GSH+硼替佐米组及NAC+硼替佐米组中GSH显著增加(P<0.01),活性氧簇水平显著降低(P<0.01);细胞凋亡率显著降低(P<0.01);BSO+硼替佐米组中GSH显著减少(P<0.05);细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论活性氧簇的生成可能参与甲状腺癌细胞对蛋白酶体抑制剂硼替佐米细胞毒素的应答;耐药肿瘤细胞诱导GSH水平,进而清除活性氧簇;减少细胞内GSH可增敏甲状腺癌细胞对硼替佐米的应答。
- 冯莹张海燕孟欣都镇先王华芹邓娓娓
- 关键词：甲状腺肿瘤蛋白酶体抑制剂活性氧还原型谷胱甘肽
- PRDX1抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡机制探讨被引量：1
- 2014年
- 目的:初步探讨过氧化还原蛋白1(peroxirodoxin 1,PRDX1)抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡的机制。方法:选取人甲状腺癌细胞,设立随机序列核酸siRNA、siASK1、siPRDX1和siASK1+siPRDX1组,分别用培养液、lactacystin和MG132培养细胞;用蛋白印迹法检测PRDX1、ASK1、p38、JNK1/2、p-ASK1、p-P38和p-JNK1/2在各组甲状腺癌细胞中的表达;用微小RNA干扰技术转染细胞;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:MG132处理组中,p-ASK1是对照组的1.5倍(F=214.14,P<0.001),其下游效应子p-p38和p-JNK1/2分别为对照组的1.34(F=216.75,P<0.001)和1.94倍(F=1 601.68,P<0.001);siASK1下调MG132介导的p-ASK1为随机序列组的0.58倍(F=1 136.82,P<0.001),p-p38为随机序列组的0.73倍(F=507.00,P<0.001),p-JNK1/2为随机序列组的0.51倍(F=6 087.48,P<0.001)。甲状腺癌细胞凋亡率降低为34.25%,显著低于于随机序列组的51.98%,F=18.39,P=0.013。MG132处理组中,siPRDX1组甲状腺癌细胞凋亡率为68.99%显著高于随机序列组的49.58%和siPRDX1+siASK1联合组的41.28%,而siASK1组的甲状腺癌细胞凋亡率为31.85%,显著低于上述两组,组间差异有统计学意义,F=30.13,P<0.001。结论:PRDX1通过负向调节ASK1活性及ASK1-p38和ASK1-JNK通路,抑制ASK1介导的细胞凋亡进而消减MG132对甲状腺癌细胞毒性效应。
- 孟欣邓娓娓张海燕都镇先王华芹
- 关键词：蛋白酶体抑制剂甲状腺肿瘤
- 国际学生生物化学实验中的云端混合教学模式
- 2022年
- 目的探索云端混合教学模式“雨课堂—定向自学—科研设计—家庭实验”在国际学生医学生物化学实验教学中的实施和效果。方法通过教学内容设计,合理引入科研设计和家庭实验,建立新型线上混合教学模式。在全球新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情防控形势下,对2018级临床医学(MBBS,89人)和牙科(BDS,16人)共计105名国际学生开展线上云端实验混合教学模式改革。结果与传统实验课堂比较,云端混合教学模式有效地提高学生实验学习的积极性和参与度。学生能够利用现有教学和网络资源独立完成定向自学任务,形成科研思维,正确运用科研方法进行科研设计和家庭实验。结论科研设计和家庭实验的引入能够辅助线上实验教学培养学生创新思维和动手能力,提升线上生物化学实验的教学效果。
- 胡博阎敬冯晨王华芹
- 关键词：家庭实验
- siNrf2对万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响及其机制的探讨被引量：1
- 2012年
- 目的:明确Nrf2对蛋白酶体抑制剂万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡的影响及其作用途径。方法:选取Nrf2高表达的8305C细胞,用微小RNA干扰技术转染细胞,采用实时定量PCR法和蛋白质印迹法分析封闭效果,而细胞内GCLCmRNA的表达、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量和细胞凋亡率,分别由实时定量PCR法、比色法和流式细胞仪法测得。并测定siNrf2对万珂诱导其他甲状腺癌细胞凋亡的影响。结果:与对照组相比,siNrf2组在培养液和万珂处理中Nrf2mRNA和蛋白都显著减少,P<0.01;随机序列核酸siRNA和错位型siNrf2差异无统计学意义,P>0.05。与对照组相比,siNrf2能够增加万珂诱导8305C、8505C、KTC1和KTC3的细胞凋亡率,差异均有统计学意义,P<0.01;FRO和KTC2的细胞凋亡率差异无统计学意义,P>0.05。与随机序列核酸siRNA组相比,空白对照组中siNrf2转染组GCLCmRNA及GSH减少,P<0.05;万珂处理组中siNrf2转染组两者减少更显著,P<0.01。GSH和NAC(GSH的前体并能提高GSH的含量)抑制了siNrf2促万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用。结论:Nrf2抵消万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用,至少部分是通过GCLC转录激活和随后GSH的生成实现的。
- 张海燕孟欣都镇先邓娓娓刘国良王华芹
- 关键词：蛋白酶体抑制剂氧化应激NRF2
