王小柯
- 作品数：29 被引量：34H指数：4
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 着眼于提高医学生综合能力的分子医学实验课程群建设被引量：2
- 2014年
- 潍坊医学院为适应当代医学对医务工作者更高的知识与技能要求，以培养医学生分子医学素养与综合能力为目标，以课程群建设为思路，打破学科界限，组建分子医学实验课程群。将分子医学知识融入到实验课程群教学中，合理整合与优化实验教学内容体系，组建高素质教学团队，搭建多层次实验教学平台，实施以学生为主体的教学，探索有利于医学生形成系统分子医学知识与能力结构的实验教学途径。
- 付玉荣梁淑娟伊正君杨利丽王小柯
- 关键词：分子医学实验课程课程群医学生
- 小睑裂综合征家系的FOXL2基因突变研究(英文)被引量：10
- 2005年
- 目的对小睑裂综合征家系患者的FOXL2基因突变进行研究,寻找突变位点。方法设计FOXL2基因特异性引物进行PCR扩增,然后测序,并对突变位点进行克隆后测序。结果在一个类型尚不明确的家系中2例患者FOXL2基因PCR扩增后测序发现951953(delC),克隆后多克隆位点测序亦证实951953(delC)。所有正常人均未发现突变。951953(delC)引起238位S后出现移码突变,终止密码子提前,蛋白截短。结论951953(delC)致蛋白截短,可能是导致小睑裂综合征的原因。经查新验证,951953(delC)是一个新的突变位点,国内外未见报道。
- 李武修王小柯孙岩王艳丽林立新唐胜建
- 关键词：小睑裂综合征家系疾病突变位点
- 趋磁细菌基因组和磁小体成链机制研究进展被引量：1
- 2007年
- 趋磁细菌能够形成纳米级的磁小体,磁小体排列成链作为生物磁针使细菌沿氧化还原梯度在地磁线上移动。磁小体独特的晶体和磁性特征使其在生物技术、医药和地质生物学应用等领域有巨大的潜力,磁小体的细胞生物学特征也使其成为原核生物细胞器研究的理想模型。本文介绍了近年来在趋磁细菌基因组和磁小体链形成机制方面的研究进展。
- 王小柯池振明吴龙飞
- 关键词：趋磁细菌基因组磁小体
- mms13、ScFv(3G11)及其融合基因在大肠杆菌中的表达
- 目的构建蛋白表达载体pET30a(+)-mms13、pET30a(+)-ScFv和pET30a(+)-ScFv-mms13,将其转入E.coli Rosetta诱导蛋白表达。对表达条件进行优化,并对表达蛋白进行定位分析,...
- 孔登王小柯邢秋翠陈永付新华王守训
- 关键词：AMB-1单链抗体融合基因WESTERNBLOT
- EndoA基因真核表达载体构建及其对皮肤表皮细胞的作用
- 2006年
- 瘢痕组织是人体创伤修复过程中的一种自然产物。然而，胚胎皮肤却具有创伤后无瘢痕愈合的能力。近年来研究发现无瘢痕愈合是胚胎皮肤固有的特性。我们通过构建真核表达载体pcDNA3．1／EndoA,并转染小鼠皮肤表皮细胞，研究EndoA对成鼠皮肤表皮细胞的作用。
- 唐胜建王小柯刘霞林立新孙文娟
- 关键词：皮肤表皮细胞真核表达载体构建真核表达载体PCDNA3.1无瘢痕愈合胚胎皮肤
- 铁因素对趋磁螺菌AMB-1磁小体形成及其相关基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的 观察铁（Fe3＋）对趋磁螺菌AMB-1磁小体形成及相关基因表达的影响,为优化磁小体最适生长条件和探讨磁小体形成机制提供实验依据.方法 驯化的无磁性AMB-1接种到有Fe3＋或无Fe3＋培养基中培养,测定Cmag值和透射电镜研究磁小体形成,qRT-PCR检测磁小体相关基因mms13,mms6和magA表达.结果 在好氧条件下,有Fe3＋培养的AMB-1 Cmag值增长明显,磁小体呈短链状排列;无Fe3＋培养AMB-1无磁小体;有Fe3＋比无Fe3＋培养细胞mms13上调表达,magA下调表达.微氧条件下,有Fe3＋比无Fe3＋培养的AMB-1 Cmag值明显增高,磁小体颗粒较大,magA上调表达.结论 铁因素促进趋磁螺菌AMB-1磁小体形成,并明显影响mms13和magA基因表达.
- 唐丽娟陈永付新华陈小丽纪国强王小柯
- 关键词：磁小体铁基因表达
- FOXL2酵母双杂交诱饵载体构建及检测
- 2011年
- 目的:用FOXL2编码区片段构建酵母双杂交诱饵质粒并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法:PCR扩增FOXl2编码区DNA片段,克隆入pGBKT7质粒,转化至DH-5α大量扩增后提取质粒,经PCR、酶切和测序验证,再转化至Y187酵母菌株中用缺陷培养基筛选并进行自激活和毒性检测。结果:获得FOXL2基因1 137bp片段,并成功将人类正常和一突变型FOXL2编码区克隆入pGBKT7中,经检测在SD/-Trp/X-α-Gal单缺培养基平板上无蓝色菌斑出现,在SD/-Ade/-Trp培养基平板无生长。同时在SD/-Trp/Kana(20μg/ml)培养24h后测得菌液OD600≥0.8,说明重组诱质粒无自激活活性和酵母毒性,满足作为诱饵质粒的条件。结论:成功构建了正常及突变型的FOXL2酵母杂交诱饵质粒;为进一步利用酵母双杂交技术研究与FOXL2相互作用的蛋白打下坚实基础。
- 张伟黄旭东韩小波任珊珊王小柯李艳艳唐胜建
- 关键词：FOXL2BPES酵母双杂交
- 小睑裂综合征FOXL2基因突变分析及蛋白质结构预测被引量：4
- 2007年
- 目的对小睑裂综合征（BPES）患者进行FOXL2基因突变筛选，并对基因突变前后的蛋白质结构进行预测，研究基因突变对编码蛋白一、二级结构的影响，探讨该病发生的分子机制。方法以临床确诊的7例BPES患者为研究对象，取外周血进行基因组DNA抽提，PCR扩增FOXL2开放性阅读框及5’非翻译区，产物直接或克隆后测序。用PDH和ExPASy软件包对正常及发生突变后的蛋白质结构进行预测，分析比较它们一、二级结构的差异。结果我们在1个Ⅱ型小家系的2个患者和1例散发患者中发现了FOXL2 901-930重复插入突变，而在正常人对照中，没有发现该突变。一级结构分析显示，FOXL2突变前后蛋白质相对分子质量发生了明显的改变，但蛋白质等电点没有发生改变。二级结构分析显示，FOXL2为一跨膜蛋白，其聚丙氨酸肽段包含1个α-螺旋区，该螺旋区域位于跨膜区内；发生突变后，聚丙氨酸扩增，螺旋区域长度增加，从而使α-螺旋占整个蛋白质二级结构的比例较突变前增加了4．1％，而β折叠与无规卷曲的比例相应下降。结论经查实FOXL2 901-930重复插入突变是一新的突变，该突变导致了聚丙氨酸肽段的扩增（222-232插入10）；蛋白质结构预测显示突变前后其编码蛋白二级结构存在显著差异，这可能与BPES发病密切相关。（中华腰群杂志,2007，43：535-539）
- 林立新唐胜建王小柯孙岩王艳丽
- 关键词：睑裂狭小蛋白质构象DNA结合蛋白质类
- 小睑裂综合征致病基因的定位克隆
- 唐胜建张伟唐彬王小柯朱建莹
- 本项目属于临床医学外科学中整形外科领域的基础应用研究课题。小睑裂综合征(Blepharophimosis-ptosis-epicanthusinversussyndrome，BPES，MIM:110100)，为常染色体显...
- 关键词：
- 关键词：小睑裂综合征常染色体显性遗传病致病基因
- pcDNA3.1/RPs15载体构建及对皮肤成纤维细胞作用的实验研究被引量：2
- 2005年
- 目的 构建核糖体蛋白s15 (RPs15 )基因真核表达载体 ,研究其对小鼠皮肤成纤维细胞的体外作用。方法 将RT PCR法获得的鼠胚皮肤RPs15cDNA克隆入真核表达载体pcDNA3 1(- ) ,在FuGENE6介导下转染体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞 ,观察RPs15基因的表达情况及其对成纤维细胞生物学特性的影响。结果 构建的重组表达载体pcDNA3 1 RPs15经DNA测序证实序列正确。RT PCR法检测RPs15基因在转染的成纤维细胞中获得表达 ,细胞生长密度下降 ,形态发生变化。结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3 1 RPs15 ,并可在体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞中表达 ,为深入研究RPs15基因对皮肤成纤维细胞的作用奠定了基础。
- 唐胜建王小柯吕晓杰刘霞张鹏张军周晓燕
- 关键词：成纤维细胞真核表达载体基因表达
