王庆勇
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人乳头瘤病毒16型DNA疫苗的实验研究
- 目的:宫颈癌是危害妇女健康和生命的严重疾病,每年约有50万新发病例,20万的死亡病例,其中发展中国家的病例占2／3。我国是宫颈癌的高发区,近年来我国宫颈癌的发病率又进一步增高,且发病年龄趋于年轻化。目前对晚期宫颈癌的治疗...
- 许雪梅许于飞王庆勇
- 文献传递
- CD40L融合改造后的人乳头瘤病毒16型E7基因DNA疫苗的构建及其免疫原性测定被引量：5
- 2007年
- 目的研究针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的DNA疫苗,测定其免疫原性,用于治疗HPV16感染及感染相关恶性肿瘤。方法联合采用基因切割重排、定点突变及密码子优化等策略改造HPV16的转化基因E7,基因合成法获得改造后的E7基因(mE7);PCR法将mE7基因与CD40L胞外区编码序列融合,然后以pVR1012为载体构建pVR1012-mE7(mE7)及pVR1012-mE7/CD40L(mE7/CD40L)表达质粒;经肌肉免疫C57BL/6小鼠;ELISA法检测E7特异性血清抗体水平,ELISPOT法分析E749-57(H-2b)特异性分泌IFN-γ的CD8+T细胞活化水平,胞内染色-流式细胞检测分析E7特异性CD4+Th细胞活化水平;并在C57BL/6小鼠体内进行疫苗抗瘤活性检测。结果与野生型E7基因(wE7)相比,mE7基因诱发产生的E7特异抗体水平(P<0.01)、分泌IFN-γ的CD8+T细胞数目(P<0.01)及CD4+Th细胞活化水平(P<0.05)均显著提高;与mE7基因相比,mE7/CD40L融合基因可进一步显著提高E7特异性分泌IFN-γ的CD8+T细胞数目(P<0.01),但对E7特异性抗体产生及CD4+Th细胞活化水平没有明显影响。疫苗小鼠体内预防性免疫实验中,经wE7免疫的小鼠接种瘤细胞后2周内全部形成移植瘤,而所有经mE7及mE7/CD40L免疫的小鼠在瘤细胞攻击后第7周仍未见移植瘤形成;疫苗体内治疗性免疫实验中,小鼠在接种wE7后第8天左右全部形成移植瘤,并呈渐进性生长,而接种mE7的小鼠移植瘤清除率为30%,接种mE7/CD40L的小鼠移植瘤清除率增高至45%。对移植瘤的组织学检查结果显示,mE7/CD40L及mE7免疫组小鼠瘤细胞间及瘤组织周围可见大量淋巴细胞浸润,而wE7组小鼠的瘤细胞呈编织状紧密排列,未见有淋巴细胞浸润。结论HPV16型mE7/CD40L融合基因疫苗免疫小鼠后可诱发较强的E7特异性细胞免疫及体内抗瘤活性,具有较强的免疫原性。
- 王庆勇许于飞范东升彭清林张婷许雪梅
- 关键词：人乳头瘤病毒子宫颈癌DNA疫苗CD40配体
- 人乳头瘤病毒16型DNA疫苗和基因佐剂及其应用
- 发明提供一种人乳头瘤病毒16型(HPV16)DNA疫苗抗原基因及融合抗原基因，及其真核表达质粒，同时还涉及该疫苗佐剂基因N端含人IL-2信号肽的IL-15成熟肽cDNA的真核表达质粒的构建。mE7/HSP70DNA疫苗具...
- 许雪梅许于飞王庆勇宋国兴曾毅司静懿
- 文献传递
- E6-p53和E7-pRb模式在人乳头瘤病毒致癌过程中的作用被引量：3
- 2007年
- 在全球范围特别是发展中国家，宫颈癌的发病率居女性恶性肿瘤的第二位。目前认为人乳头瘤病毒（HPV）是宫颈癌的主要致病因子，而早期基因E6、E7是HPV致癌机制研究中的重点。体内体外实验均表明E6、E7是细胞转化所必需的，尤其是在高危型HPV感染机体时，E6结合并灭活肿瘤抑制因子p53、E7结合并降解抑制蛋白pRb，最终导致细胞无限分裂而不发生凋亡。E6、E7分别与抑癌蛋白p53、pRb相互作用的模式为人乳头瘤病毒致癌机制的进一步研究提供了基本的理论基础。
- 王庆勇许雪梅
- 关键词：人乳头瘤病毒E6E7
- 人乳头瘤病毒16型DNA疫苗和基因佐剂及其应用
- 发明提供一种人乳头瘤病毒16型(HPV16)DNA疫苗抗原基因及融合抗原基因，及其真核表达质粒，同时还涉及该疫苗佐剂基因N端含人IL－2信号肽的IL－15成熟肽cDNA的真核表达质粒的构建。mE7/HSP70 DNA疫苗...
- 许雪梅许于飞王庆勇宋国兴曾毅司静懿
- 文献传递
