王彦凤
- 作品数：18 被引量：31H指数：4
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 毛囊特异性表达Cre酶基因载体的构建
- 本文利用绵羊KAP6-1启动子构建毛囊特异性表达Cre酶的真核表达载体,为利用Cre/LoXP系统删除目的基因提供条件.研究表明：表达载体pIRES2-KAP6.1-Cre-EGFP可以在毛囊细胞中特异性表达Cre酶，进...
- 王靖李洋连梦瑶王彦凤王志钢刘东军
- 关键词：基因启动子真核表达载体
- 文献传递
- mTOR信号通路在乳脂合成中的调控作用被引量：3
- 2015年
- 乳脂肪含量与组成是构成牛奶重要营养品质的主要物质基础之一。牛乳脂肪的主要成分是甘油三酯,乳腺细胞以细胞内合成和胞外摄取两种形式获得脂肪酸并进一步合成甘油三酯。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)是一个进化上十分保守的蛋白激酶,与其他蛋白一起组成m TOR信号通路,通过感受细胞内外的营养状况进而调控细胞生长和代谢,在乳脂合成中发挥重要作用。综述了m TOR信号通路在乳脂合成中的作用与机制,并结合研究现状展望了未来研究热点。
- 郭志新李佳鑫冯炜王彦凤王志钢
- 关键词：MTOR信号通路甘油三酯乳脂合成
- 共转染Krox20和IGFBP5基因绒山羊胎儿成纤维细胞克隆的筛选
- IGFBPS基因被认为是第一个区分不同毛囊类型的标记基因，它在毛囊中的表达可引起毛发的弯曲与细化。本研究旨在筛选得到IGFBPS和Krox20两个基因共转染的绒山羊胎儿成纤维细胞克隆，以探索IGFBPS与Krox20在绒...
- 梁燕王晓晶王彦凤王潇郭旭东王志钢刘东军
- 关键词：转基因克隆绒山羊胎儿成纤维细胞
- 文献传递
- CRISPR/Cas9技术及其在转基因动物中的应用被引量：3
- 2015年
- CRISPR/Cas9技术是一种新型的基因组定点编辑技术,具有设计简单、特异性强、效率高及可以在目标位点产生多种类型的编辑结果等特点,适用于在多种细胞中进行大规模的基因编辑。综述了CRISPR/Cas9技术的研究背景、基本原理和研究进展,从靶基因敲除(knock-out)、外源基因整合(knock-in)和目标基因转录沉默(knock-down)等方面总结了CRISPR/Cas9在转基因动物中的应用概况,并对现有的三种基因组定点编辑技术进行了比较。CRISPR/Cas9技术在转基因动物中具有明显的应用优势和良好前景。
- 李佳鑫冯炜王志钢王彦凤
- 关键词：转基因动物
- 表达红色荧光及转胸腺素β4基因绵羊胎儿成纤维细胞系的制备被引量：1
- 2010年
- 旨在构建胸腺素β4(thymosin beta4,Tβ4)基因真核表达载体并转染绵羊胎儿成纤维细胞,获得稳定表达胸腺素β4及红色荧光蛋白的转基因细胞克隆。将克隆载体pMD19TT中的胸腺素β4基因亚克隆到表达载体pIRES2-DsRed2的多克隆位点,构建表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4,脂质体介导转染绵羊胎儿成纤维细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。RT-PCR检测Tβ4基因在宿主细胞中的转录。测序结果显示,构建的表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4序列中,Tβ4基因正确连接在CMV启动子下游,顺序连接IRES2序列和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。脂质体介导的稳定转染效率约为15%,经G418筛选得到转基因细胞克隆并高效表达红色荧光蛋白。RT-PCR检测显示外源Tβ4基因在绵羊胎儿成纤维细胞中得到转录。成功构建具有红色荧光蛋白和新霉素抗性双选择标记的胸腺素β4基因真核表达载体并稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞,筛选得到的超表达胸腺素β4绵羊胎儿成纤维细胞系为下一步通过核移植和克隆技术获得转基因绵羊提供了条件。
- 王彦凤梁燕王玮史偈君金永王晓晶郭旭东王潇王志钢刘东军
- 关键词：胸腺素Β4
- 中国马铃薯主产区晚疫病菌群体遗传结构研究
- 由致病疫霉(Phytophthora infestans)侵染马铃薯引起的晚疫病是严重危害全球马铃薯生产的第一大病害.晚疫病菌群体结构及其演替规律的变化直接影响着该病害的发生与流行.本研究连续三年从内蒙古、四川和云南马铃...
- 轩辕国超王彦凤郭海英毛锐涛王姝梅张若芳
- 关键词：马铃薯晚疫病致病疫霉病害防治
- 文献传递
- 微生物分离与鉴定实验模块的教学探索与实践
- 2019年
- 实验设计从富含乳酸菌的样品中分离目标菌,通过多次划线传代,结合形态观察与革兰氏染色,获得纯培养物,接下来通过16sRNA基因序列与使用API 50 CH试剂盒进一步将目标菌鉴定到种.教学实践证明通过开展这一综合性实验,可以培养学生良好专业技能,有助于提高学生综合素质和创新思能力.
- 王彦凤王志钢苑琳郝慧芳王潇
- 关键词：乳酸菌教学实践
- TSC1/TSC2二聚体及其在细胞生长调控中的作用被引量：4
- 2013年
- Tsc1和Tsc2是常染色体基因,在体内作为抑癌基因广泛表达,表达产物Hamartin/TSC1和Tuberin/TSC2直接相互作用形成异二聚体(TSC1/TSC2)而起作用。Tsc1和Tsc2突变可导致一种显性遗传性多系统并发症,即复合型结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC),具有很高的表现度和多样的并发表征,成人和小孩分别有1/8 000和1/6 000的几率受到TSC的影响。TSC1/TSC2能响应生长因子、胰岛素及各类环境胁迫信号,并发挥其靶向小G蛋白Rheb的GAP(GTPase active protein,GAP)活性,经由Rheb/mTORC1(mammalian target of rapamycin complex1)模式信号途径来调控细胞生长、分化及迁移并在胚胎发育及机体代谢过程中发挥重要的功能。综述Tsc1和Tsc2的分子遗传特性及其产物TSC1/TSC2在细胞生长调控中的作用。
- 秦毅王彦凤王志钢
- 关键词：细胞生长信号通路
- 克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4基因并稳定转染胎儿成纤维细胞被引量：6
- 2010年
- 【目的】克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4(thymosinbeta4,Tβ4)基因,构建皮肤特异性表达载体,转染内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达红色荧光蛋白并可用于核移植的转基因细胞克隆。【方法】通过RT-PCR克隆Tβ4基因cDNA序列,然后与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成Tβ皮肤特异性表达载体pCDsRed-KT。外源表达载体以lipofectamineTM2000介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合。【结果】克隆了内蒙古白绒山羊Tβ4基因,cDNA全长142bp,其中包含135bp的完整ORF,编码44个氨基酸残基,氨基酸序列与已报道的牛胸腺素β4(NM_001002885)同源性为100%。测序显示构建的表达载体pCDsRed-KT中,Tβ4基因正确连接在皮肤特异性启动子KAP6-1下游,顺序连接CMV启动子和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。PCR检测显示外源KAP6-1启动子和Tβ4基因整合到细胞基因组中,筛选出的转基因细胞高效表达红色荧光蛋白。【结论】克隆得到内蒙古白绒山羊Tβ4基因并构建成功其真核表达载体,可稳定转染绒山羊胎儿成纤维细胞,为下一步通过核移植方法获得转胸腺素β4基因绒山羊提供了条件。
- 王彦凤梁燕金永王晓晶郭旭东王玮王潇王志钢刘东军
- 关键词：胸腺素Β4稳定转染
- Rheb和FKBP38之间具有相互作用关系的新证据
- mTOR信号通路被认为是细胞生长的中心协调器,它控制着细胞的增值、分化、自噬、凋亡及代谢等多种生理过程。Rheb作为mTOR信号通路的上游调节因子,它激活mTOR的具体机制一直是各国生物学者的关注焦点。Rheb是Ras超...
- 王志钢郑旭王彦凤鲍文蕾刘明涛
- 关键词：信号通路MTORRHEB
- 文献传递
