王敏珍
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 惊厥和亚惊厥剂量戊四唑对大鼠脑内NMDA受体亚单位蛋白表达的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 :研究不同剂量戊四唑刺激对大脑皮层内 N-甲基 - D-天门冬氨酸 ( NMDA)受体 NR1、NR2 A和NR2 B 3种亚单位表达量的影响。方法 :腹腔注射亚惊厥剂量 ( 35 mg/kg)和惊厥剂量 ( 5 0 mg/kg)的戊四唑 ,注射后不同时间点分离大脑皮层 ,用免疫印迹法检测 NMDA受体 NR1、NR2 A、NR2 B 3种亚单位的蛋白含量。结果 :注射戊四唑亚惊厥剂量和惊厥剂量组大鼠的行为学差异非常显著 ( P<0 .0 0 1) ,但 NMDA受体 3种亚单位仅 NR2 A亚单位在 1h点有显著性增高 ,且惊厥剂量组 NR2 A的表达量比亚惊厥剂量组高 ( P<0 .0 5 )。惊厥剂量组 NR2 A和NR2 B表达有先增加再降低然后恢复至正常水平的趋势 ,而 NR1亚单位改变不明显。结论 :戊四唑引起惊厥的机制可能与戊四唑首先影响 NR2亚单位蛋白的表达 ,以调节
- 朱丽君王敏珍吴晓华徐淑君罗建红陈忠
- 在发育过程中大鼠、小鼠和人脑N—甲基—D—门冬氨酸受体亚单位蛋白的表达
- 目的:研究新生大鼠、小鼠不同脑区和人胚脑皮层组织在发育过程中N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体亚单位蛋白的表达水平和变化式样。方法:采用NMDA受体亚单位特异性抗体,引入成年皮层组织系列稀释的样品作标准,建立了定量的...
- 罗建红王敏珍朱丽君郑功沈海清
- 关键词：发育过程NMDA受体
- N-甲基-D门冬氨酸受体复合物亚单位蛋白的组成及其在发育过程中表达的研究
- 2000年
- 本研究通过用重组DNA技术制备NMDA受体亚单位融合蛋白并免疫动物获得相应的特异性抗体,采用定量免疫印迹技术系统研究了大鼠、小鼠和人类不同脑区NMDA受体亚单位NR1、NR2A及NR2B在不同发育阶段的表达。
- 罗建红余应年王敏珍朱丽君沈海清
- 关键词：NMDA亚单位融合蛋白特异性抗体
- 三通道荧光共振能量转移分析法的优化及其对活细胞内受体复合物组成的分析被引量：1
- 2005年
- 目的在活细胞内建立并优化三通道FRET检测方法,使之更好地适用于膜蛋白复合物亚单位的相互作用。方法利用在HEK293细胞中转染pCFP-YFP作为阳性对照,共转pCFP和pYFP作为阴性对照,用不同的公式如FRETN、NFRET、FR及NetFRET/Df等进行FRET定量计算,并通过改变供体与受体比例来观察所测得的FRET值与FRET转移效率的关系。在HEK293细胞内转染CFP或YFP标记的不同亲离子型谷氨酸受体(iGluR)亚单位,分析它们之间的相互作用。结果FRETN、NFRET、FR及NetFRET/Df等公式均可以适用于本研究所建的三通道FRET检测系统;对于不同的公式,供体与受体蛋白分子表达比例的变化会对测量结果产生不同的影响。用所建FRET技术,发现CFP-GluRl与YFP-GluRl之间,以及CFP-NRl与YFP-NRl具有确定FRET信号,而CFP-GluRl与YFP-NRl则没有FRET发生。结论在对不同iGluR亚单位之间相互作用的研究中证明同一受体亚型中的亚单位之间可以形成同聚体,而不同受体亚型的亚单位之间则不会形成复合物。
- 王敏珍邱爽滑玉林杨帆沈逸罗建红
- 关键词：荧光共振能量转移蛋白相互作用
- N-甲基-D-门冬氨酸受体与使君子酸受体在培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位被引量：2
- 2004年
- 目的 研究含NR2B亚单位的N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体 (NR2B NMDAR)与含GluR1亚单位的使君子酸 (AMPA)受体 (GluR1 AMPAR)在发育不同阶段的培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位。 方法 以FLAG NR2B和GFP GluR1表达载体共转染原代培养第 5d(DIV5 )的大鼠海马神经元 ,分别用相应特异性抗体和荧光标记二抗作活细胞染色 ,显示膜表面表达的受体簇。 结果 对DIV7和DIV14的培养海马神经元树突表面受体簇计数 (个数 10 0 μm) ,GluR1 AMPAR受体簇分别为 5 9 2± 5 6和 74 8± 3 1(P <0 0 5 ) ;NR2B NMDAR为 38 7±3 5和 80 8± 4 9(P <0 0 1) ;两者共定位为 16 3± 5 2和 4 0 1± 6 0 (P <0 0 1)。DIV14海马神经元 4 0 %的共定位受体簇分布在树突棘上。 结论 随着海马神经元的发育 ,树突膜表面NR2B NMDAR、GluR1 AMPAR及两者共定位受体簇密度均增加 ,提示 ,形成更多具有活性的兴奋性突触 ,且主要位于树突棘上。
- 邱爽王敏珍傅展燕黄曼罗建红
- 关键词：N-甲基-D-门冬氨酸受体海马共定位
- 人精子蛋白SP17基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2001年
- 目的 :获得人精子蛋白SP17基因 (hSP17) ,构建重组表达载体并在大肠杆菌中表达。方法 :获取人睾丸组织 ,提取总RNA ,通过RT -PCR获得hSP17的全长cDNA ;将该cDNA克隆入TA载体 ,并亚克隆进融合蛋白型重组表达载体pGEX - 3b ;转化大肠杆菌DH5α并诱导表达之。结果 :获得了全长hSP17的cDNA ,构建了重组表达子hSP17/pGEX - 3b ,获得了预期大小的融合蛋白hSP17-GST的表达。结论 :通过构建重组表达质粒hSP17/pGEX并转化大肠杆菌 ,获得了融合蛋白hSP17-GST的高效表达。
- 王敏珍刘志成高展郑文波罗建红
- 关键词：精子蛋白质类克隆大肠杆菌基因表达
