王新娟
- 作品数：13 被引量：53H指数：6
- 供职机构：北京大学医学部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- STI571诱导K562细胞凋亡机制研究被引量：6
- 2002年
- 目的 研究格列卫 (Glivec ,STI5 71)诱导P2 10BCR/ABL(+)K5 6 2细胞凋亡机制。方法 采用Annexin Ⅴ /PI双染实验、DNA的PI染色、碘化二己基恶碳菁 (DiOC6 [3])染色、2 ,7 二氯荧光素二乙酸酯 (DCFH DA)染色及DNALadder等方法测定凋亡细胞。利用Westernblot实验分析K5 6 2细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平 ,测定Bcl XL、caspase 3蛋白的表达并分别测定线粒体及胞浆部分的细胞色素C(cytoC)蛋白。结果 STI5 71可诱导K5 6 2细胞凋亡 ,出现DNA亚二倍体凋亡峰及DNALadder,线粒体跨膜电位及活性氧物质降低 ,P2 10BCR/ABL酪氨酸磷酸化水平降低 ,Bcl XL、蛋白减少 ,caspase 3蛋白前体活化降解出相对分子质量为 2 0× 10 3 亚单位 ,胞浆部分出现cytoC ,同时线粒体cytoC减少。结论 STI5 71可迅速使P2 10BCR/ABL酪氨酸磷酸化水平下降 ,线粒体cytoC胞浆转位介导的信号通路是STI5 71诱导K5 6 2细胞凋亡的途径之一 ,STI5
- 秦亚溱陈珊珊常艳付家瑜王新娟
- 关键词：STI571K562细胞细胞凋亡格列卫酪氨酸磷酸化基因治疗
- GM-CSF-tk融合基因转导人神经母细胞瘤株SH-SY5Y的抗瘤作用被引量：1
- 2001年
- 目的 :将单纯疱疹病毒胸苷激酶和粒细胞 单核细胞集落刺激因子融合基因 (Lxpsp hGM CSF Hytk)转导人恶性神经母细胞瘤株SH SY5Y ,观察外源融合基因的表达及其对肿瘤细胞的杀伤作用。方法 :FuGENE6介导将含融合基因的逆转录病毒表达载体和仅含潮霉素磷酸转移酶基因的对照载体分别转染逆转录病毒包装细胞系PA317。以适量病毒上清转导SH SY5Y ,RT PCR方法检测融合基因的存在 ;细胞因子依赖株TF 1的生长状况及丙氧鸟苷 (GCV)杀伤实验鉴定融合基因的表达。结果 :将重组病毒产生细胞PA317 GM CSF Hytk和PA317 Hy的病毒上清 2ml分别转导SH SY5Y ,6 0mg·L-1的潮霉素进行筛选 ,得到了稳定传代的阳性细胞集落SY5Y GMHytk ,SY5Y Hy。RT PCR检测阳性细胞集落中有外源的GM CSF存在。用阳性细胞集落上清培养TF 1细胞 ,细胞成活。SY5Y ,SY5Y GMHytk ,SY5Y Hy 3种细胞的生长曲线无明显差别 ,但用不同浓度GCV分别作用于此 3种细胞显示 :0 .0 3～ 30 0mg·L-1的GCV对SY5Y GMHytk有明显的杀伤作用 (IC50 =3mg·L-1) ,而对另外两种细胞几乎无毒性作用 (IC50 >30 0mg·L-1)。 30mg·L-1GCV作用 96h后可杀死 80 %以上的SY5Y GMHytk细胞。结论 :应用逆转录病毒介导 ,将融合基因GMCSF tk成功地导入了SH SY5Y肿瘤细胞株 ,并观察?
- 张骏王新娟张蕾许进力王笑健蔺新力
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子胸苷激酶神经母细胞瘤
- 金雀异黄素对小鼠红白血病细胞系MEL的抑制作用被引量：3
- 2003年
- 选择小鼠红白血病细胞系MEL作为金雀异黄素 (genistein)的作用对象 ,以探讨其对MEL的抑制作用及其可能的作用机理 .MTT和生长曲线表明 ,金雀异黄素对MEL细胞具有很强的生长抑制作用 (半数最大抑制效应浓度IC50 为 7 12mg L) .流式细胞术显示 ,金雀异黄素能够使MEL细胞发生G2 M期阻滞 ,但是诱导MEL凋亡作用并不明显 .DNA凝胶电泳发现金雀异黄素能够造成MEL细胞DNA的损伤 .联苯胺染色显示金雀异黄素对MEL细胞具有很强的诱导分化作用 ,且这种作用是时间和剂量依赖性的 .RT PCR显示 ,金雀异黄素能够抑制MEL细胞中原癌基因c myc的表达 .生物流变学检测发现 :金雀异黄素作用后 ,MEL细胞表面电荷密度减少、渗透脆性增大。
- 钟兴兰王新娟姚伟娟李付英张蕾
- 关键词：金雀异黄素分化诱导生物流变学
- mGM-CSF转导的小鼠黑色素瘤细胞融合巨噬细胞的抗肿瘤作用研究
- 2011年
- 目的比较小鼠黑色素瘤细胞B16致瘤性与转导mGM-CSF基因的小鼠黑色素瘤细胞B16致瘤性的差别,同时研究转导该基因阳性的B16肿瘤细胞与同源小鼠巨噬细胞融合后其致瘤性变化,初步探讨巨噬细胞在肿瘤生成中的作用。方法本实验以FuGENE6介导,将融合基因Lxpsp-mGM-CSF转导逆转录病毒包装细胞PA317,以含适量感染能力的重组逆转录病毒上清液转导B16,潮霉素筛选获得阳性细胞(B16+GM-CSF),再将阳性细胞在PEG介导下与同源鼠巨噬细胞(MΦ)融合(B16+GM-CSF+MΦ)。B16、B16+GM-CSF、B16+GM-CSF+MΦ三种细胞分组分别接种于C57BL/6小鼠皮下观察成瘤能力。结果 B16组平均21天长出肿瘤;B16-GM-CSF长成实体瘤延迟7天,B16-GM-CSF-MΦ在第40天仍未长出实体瘤。结论巨噬细胞在小鼠黑色素瘤生长、转移中有重要作用。
- 许进力王新娟
- 关键词：MGM-CSF黑色素瘤B16巨噬细胞
- TRAIL基因对人白血病Jurkat细胞生物力学特性的影响被引量：6
- 2002年
- 本实验研究将人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体 (TNF relatedapoptosisinducingligand)的cDNA序列作为目的基因导入RevTet On后 ,利用在Jurkat中所建立起的四环素调控TRAIL基因表达系统 ,作为研究肿瘤细胞凋亡前后生物流变学特性变化的细胞模型。我们通过测量用强力霉素诱导TRAIL基因表达前后细胞生物力学特性的变化 ,研究TRAIL基因对Jurkat细胞生物力学特性的影响。结果显示TRAIL基因的表达对Jurkat细胞有明显的促凋亡作用。TRAIL基因表达后 ,细胞表面电荷密度减少 ,流动性下降。而且 ,本实验表明 。
- 李丹周淑佩陈凯姚伟娟谢利德顾黎王新娟文宗曜
- 关键词：JURKAT凋亡生物流变学
- 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其与肿瘤治疗前景被引量：7
- 2001年
- 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TNF relatedapoptosisinducingligand ,TRAIL)属于肿瘤坏死因子家族 ,可激活肿瘤细胞的凋亡。本文介绍了TRAIL的结构与功能 。
- 魏晓超蔺新力王新娟
- 关键词：肿瘤坏死因子凋亡肿瘤凋亡诱导配体
- 己酮可可碱对2,4,6-三硝基苯磺酸肠炎模型的影响被引量：8
- 2003年
- 目的 :观察己酮可可碱 (PTX)对 2 ,4 ,6 三硝基苯磺酸 (TNBS)肠炎模型影响。方法 :通过直肠给予雄性BALB/c小鼠TNBS诱导结肠炎 ,应用PTX对其进行治疗 ,6d后收集结肠标本评价结肠炎症程度 ;采用半定量RT PCR检测肠黏膜IL 18mRNA表达 ,采用免疫组织化学染色显示IL 18阳性细胞。结果 :直肠内给予BALB/c小鼠TNBS后可造成小鼠结肠炎性改变 ;PTX治疗可使小鼠疾病活动指数、结肠重量和炎症指数均显著下降 (P <0 .0 5 ) ,结肠IL 18mRNA和肠黏膜固有层表达IL 18细胞数显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 :PTX治疗可使TNBS肠炎模型小鼠肠黏膜局部IL 18表达显著下降 ,肠炎得以减轻。
- 张炳勇吕愈敏洪天配李军李付英张玲董秀云王新娟
- 关键词：白细胞介素18己酮可可碱
- K562细胞转p16基因前后流变学特性的改变被引量：5
- 2001年
- 将 p16抑癌基因转入 p16阴性的人红白血病细胞株K562 ,采用微吸管技术并配合某些生物物理技术 ,研究K562细胞在转基因前后生物物理特性的改变。结果表明 ,p16基因的引入使K562细胞表面电荷密度增加 ,抗渗透破碎能力变差。用标准固体粘弹性模型拟合微吸管实验结果后 ,发现表征细胞最大变形能力的弹性系数K1 增加 ,而另一弹性系数K2 粘性系数 μ 无明显改变 ,说明p16使K562细胞刚性增大。这些结论将加深对 p16基因抑制肿瘤转移和基因治疗理论和实验的认识。
- 姚伟娟梁玉陈凯谢利德孙大公王新娟文宗曜
- 关键词：K562细胞P16基因转基因抑癌基因
- 正常人及肿瘤组织中rb1基因的PCR分析
- 2004年
- 目的 研究人视网膜母细胞瘤(Rb)及其它肿瘤组织中视网膜母细胞瘤易感基因(rb1)的缺失或突变。方法 应用PER和PER-RFLP法分析人多种正常组织及肿瘤组织中rb1基因的第14～16和第20外显子。结果在9种正常组织中都检测到了正常rb1基因片段，而32例Rb患者第14～16外显子全部缺失，第20外显子缺失率为65％(21／32)。乳腺癌和胃癌组织中第14～16外显子的异常率分别为9、5％和33％。结论 rb1的缺失与Rb的发生直接相关，与其它肿瘤的发生也有一定关系。
- 王新娟徐斌孙宪丽王润田顾源
- 关键词：肿瘤组织RB1基因PCR分析聚合酶链式反应视网膜母细胞瘤
- γ射线联合HSV-tk/GCV基因治疗系统抗肿瘤体外实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究γ射线与人单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)基因治疗系统联合应用对Lewis肺癌细胞的杀伤作用及其可能机制。方法以脂质体介导法将含HSV-tk基因的真核表达质粒体外转染小鼠Lewis肺癌细胞,建立稳定表达的细胞株;RT-PCR检测细胞tk基因表达;Hoechst33258/PI荧光活染、流式细胞术检测γ射线与HSV-tk/GCV系统单独及联合作用下的细胞凋亡;集落形成法检测细胞存活曲线,反映放射敏感性变化;同时检测旁观者效应及γ射线对该效应的影响。结果HSV-tk/GCV系统对转染基因的Lewis细胞(Lewis-Hytk细胞)具有选择性杀伤作用。γ射线与HSV-tk/GCV系统联合应用可使Lewis-Hytk细胞的凋亡和坏死率显著高于二者单独作用之和。0.1μg/ml GCV可使Lewis-Hytk细胞的放射敏感性明显增高(SER=1.47)。γ射线可增强HSV-tk/GCV系统的旁观者效应,二者联合作用后的Lewis-Hytk细胞的培养液对未处理过的Lewis细胞具有杀伤作用。结论γ射线与HSV-tk/GCV系统联合应用对Lewis肺癌细胞具有协同杀伤效应。γ射线增强HSV-tk/GCV系统的旁观者效应可能是其协同效应产生的机制之一。
- 陈治国杨业鹏周梅占晓海沈剑沈磊李五岭王新娟
- 关键词：Γ射线基因治疗LEWIS肺癌细胞旁观者效应
