王蕾蕾
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 松材线虫危害后马尾松林的土壤养分变化特点
- 松材线虫是一种主要以松墨天牛等昆虫为传播媒介的外来入侵生物。松材线虫病是世界上最具危险性的森林病害之一，可造成松树大量迅速死亡、原有生态系统急剧退化。合肥市大蜀山森林公园自1999年首次发现松材线虫病危害以来，危害而积不...
- 王蕾蕾
- 关键词：松材线虫病马尾松土壤养分
- 文献传递
- 玉米叶绿体表达载体的构建及AsRED基因原核表达
- 2010年
- 从玉米幼嫩叶片中提取玉米叶绿体基因DNA,通过PCR克隆出叶绿体同源重组片段trnA和trnI、叶绿体特异性启动子Prrn以及终止子psbA。构建玉米叶绿体表达载体pBAIRTARED,含有一个人工操纵子,其中,筛选标记基因aadA和红色荧光蛋白报告基因AsRED处于Prrn启动子和psbA终止子控制。将构建的载体转化大肠杆菌BL21(DE3),观测到重组细胞呈现红色,表明构建的载体可以用于玉米叶绿体转化以及表达报告基因。
- 程潇马庆刘艳王蕾蕾范军程备久
- 关键词：叶绿体基因组表达载体构建玉米
- 一种新型筛选标记玉米丝氨酸消旋酶基因应用于烟草转化技术
- 本发明涉及一种新型筛选标记玉米丝氨酸消旋酶基因应用于烟草转化技术。本发明以玉米自交系B73三叶期的cDNA为模板克隆得到玉米丝氨酸消旋酶基因序列(ZmSR)，将该基因替换双元表达载体pCAMBIA1301上的GUS标记基...
- 范军项艳赵华琳王蕾蕾董庆李媛
- 文献传递
- 玉米丝氨酸消旋酶的重组表达、纯化及其酶学性质研究
- 丝氨酸消旋酶（serine racemase，SR）是一个双功能酶，同时具有消旋酶和脱水酶活性，可以将L-/D-丝氨酸转化成相应的D-/L-丝氨酸;还可以将L-/D-丝氨酸转化成丙酮酸。已研究了拟南芥、大麦和水稻SR的酶...
- 王蕾蕾
- 关键词：酶活性转化烟草
- 文献传递
- 表达大肠杆菌分子伴侣GroEL、GroES和GrpE载体的构建及其应用被引量：2
- 2012年
- 大肠杆菌(Escherichia coli)共表达系统常要求质粒具有不同抗生素抗性以及不同的复制子。利用粘性末端PCR技术,以含有大肠杆菌分子伴侣基因GroEL、GroES和GrpE的pR-GESP质粒为模板,设计两对引物,通过两次独立的PCR反应扩增3个基因的多顺反子,将形成粘性末端的PCR产物插入NcoI和XhoI酶切的pACYCDuet-1质粒,构建的pA-GESP质粒具有p15A复制子及氯霉素抗性,和具有ColE1复制子及卡那霉素抗性表达载体pET28b相容。SDS-PACE显示含有pA-GESP质粒的大肠杆菌细胞中3个分子伴侣蛋白的表达水平和含有pR-GESP质粒的大肠杆菌细胞没有明显差异,它们对玉米丝氨酸消旋酶的可溶性表达有部分促进作用,但对N端含有组氨酸标签的玉米铁氧还蛋白还原酶的表达没有作用,在三个含有不同抗生素基因的质粒中共表达分子伴侣、5-氨基乙酰丙酸合酶和尿卟啉原Ⅲ甲基化酶,两个酶连续催化的荧光产物在细胞内积累量为562.13±3.17/OD_(600),而没有分子伴侣的积累量为457.66±4.98/OD_(600),表明分子伴侣改善部分蛋白在大肠杆菌的可溶性表达和催化功能。
- 许鹏王蕾蕾程备久范军
- 关键词：分子伴侣大肠杆菌
- 玉米过氧化物还原蛋白BAS1的原核表达及其功能研究被引量：2
- 2010年
- 植物过氧化物还原蛋白BAS1是巯基依赖的过氧化物酶,通过催化的Cys残基还原过氧化氢,依赖NADPH的叶绿体硫氧还蛋白还原酶保持BAS1的还原态。玉米含有两种BAS1:2-CysPrxA和2-CysPrxB。利用RT-PCR方法从玉米幼叶中克隆了编码成熟2-CysPrxA的基因,并将蛋白Cys34残基突变成Ser34。SDS-PAGE显示纯化的野生型和突变体蛋白为一条主带,分子量约为23kDa;体外蛋白结合实验表明纯化的叶绿体硫氧还蛋白还原酶通过分子间二硫键结合纯化的2-CysPrxA的C34S突变体,非还原SDS-PAGE显示纯化的野生型2-CysPrxA含有分子间二硫键组成的二体,而纯化的C34S突变体呈现单体,巯基专一性标记化合物AMS修饰及活性分析表明纯化的BAS1还原态是催化还原过氧化氢所所必须的,它由硫氧还蛋白还原酶及其辅酶NADPH所催化。
- 程雷王蕾蕾程备久范军
- 关键词：玉米功能分析
